欢迎来到天天文库
浏览记录
ID：70404538
大小：1.33 MB
页数：19页
时间：2021-11-22
《毛细管电泳》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、毛细管电泳（CapillaryElectrophoresis,CE）一.概述电泳是电解质中带电粒子在电场力作用下，以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象.利用这种现象对化学和生物化学组分进行分离的技术称之为电泳技术。丛20世纪30~40年代起,相继发展了多种基于抗对流介质的电泳技术(如纸电泳，凝胶电泳等).传统的电泳技术由于受到焦耳热的限制，只能在低电场强度下进行电泳操作，分离时间长，效率低.80年代初,细径毛细管被用于电泳，由此产生了一种新型的分析技术——毛细管电泳。毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE),是指离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动
2、力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。由于毛细管内径小，表面积和体积的比值大,易于散热，因此毛细管电泳可以减少焦耳热的产生,这是CE和传统电泳技术的根本区别。CE开始主要用于蛋白质，多肽的分析,以后逐渐被广泛应用于生物，化学，医药，环保等领域。它具有分离效率高，分析速度快，样品及试剂用量少,洁净无污染等特点,和HPLC(高效液相色谱法)成为分析化学中互补的技术。随着生命科学的发展，毛细管电泳技术也有了广阔的发展空间.目前，不同分离模式的毛细管电泳技术正成为最重要的生物样品分离分析手段。二.毛细管电泳基本原理1.基本概念有效长度(Ld,
3、cm)毛细管的入口端到检测器窗口的距离；迁移时间(tmmin)带电粒子在电场作用下做定向移动的时间；电泳速度（Uecm/s）在单位时间内，带电粒子在毛细管中定向移动的距离；电场强度(EV/cm)在给定长度毛细管的两端施加一个电场后所形成的电效应的强度；电泳淌度（μepcm2/(V.s)）带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比；电渗流： 毛细管内壁表面的电荷所引起的管内液体的整体流动，来源于外加电场对管壁溶液双电层的作用；电渗流方向样品分子泳动方向1.基本概念１．使液体沿毛细管壁均匀移动；２．使携带不同电性的分子均向负极移动，中性分子也随着电渗流一起移动。电渗流
4、的作用特点２．毛细管电泳仪系统Comeon进样系统静压力进样和电动进样进样体积一般在纳升级进样长度必须控制在毛细管总长度的1%~2%，否则将影响分离效率分离系统毛细管:由熔融石英制成,内径通常为25~75μm,外径为350~400μm，有效长度为80~100cm;恒温系统:控制柱温变化在±0.10C；高压电源:电流0~300μA电压0~30KV,电压稳定性在±0.1%;back检测系统常用的检测方式是紫外-可见光吸收.检测器位于距样品盘约毛细管总长的2/3~4/5处,对毛细管壁内部分进行光聚焦；此外，荧光，激光诱导荧光，质谱等检测方法也被应用于
此文档下载收益归作者所有
