NY∕T 2720-2015 水稻抗纹枯病鉴定技术规范(农业)

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1、ICS65.020B16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T2720一2015水稻抗纹枯病鉴定技术规范Rulesforevaluatiooofriceforresistaocetosheathblight(RhizoctoniasolaniK旧10)2015-05-21发布2015-08-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T2720-2015前言本标准按照GB/T1.1二2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位:中国水稻研究所、中国农业大学、扬州大学、华南农业大学

2、、福建农林大学、浙江大学。本标准主要起草人:黄世文、王玲、刘连盟、郭泽建、潘学彪、周而勋、鲁国东、王政逸、陈旭君、左示敏。INY/T2720-2015水稻抗纹枯病鉴定技术规范范围本标准规定了水稻品种、材料苗期和成株期对纹枯病的抗性鉴定方法和评价方法。本标准适用于水稻品种、材料抗纹枯病鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4285农药安全使用标准GB4404.1粮食

3、作物种子第1部分:禾谷类GB5084农田灌溉水质标准GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则GB15618土壤环境质量标准NY/T496肥料合理使用准则通则NY5117无公害食品水稻生产技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1水稻纹枯病ricesheathblight由立枯丝核菌RhizoctoniasolaniKühn所引起的为害地上部分以叶鞠、叶片为主产生云纹状病斑症状的水稻病害。3.2融合群anastomosisgroup引起水稻纹枯病的

4、立枯丝核菌(RhizoctoniasolaniKühn)是以菌丝融合型为基础所构成的群体，凡是两个菌株的菌丝能发生融合的则归于相同的融合群。3.3苗挺高straightedseedlingheight从土表至水稻秧苗拉直后最高叶尖的高度。4试剂与材料本标准所用试剂在未加说明时均采用分析纯试剂。实验室用水应符合GB/T6682中规定的三级水要求。4.1PDA培养基称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加入1000mL水，煮沸20min~30min，纱布过滤，补水至10000mL，再加入18g琼脂和18g葡萄糖，

5、搅拌均匀，高压灭菌(121C,20min)。4.2PDB培养基NY/T2720一2015称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加入1000mL水，煮沸20min~30min，纱布过滤，补水至1000mL.加入18g葡萄糖，搅拌均匀，高压灭菌(1210C,20min)。4.3培养基A稻谷用清水浸泡24h后，冲洗干净，装入250mL锥形瓶中，每瓶中装人稻谷占瓶体积的1/3，高压0灭菌(121C,20min)。4.4培养基B将木质牙签剪成O.8cm~l.0cm长，纵劈为二，单层平排于直径9cm培养皿中，每皿加入适量

6、的PDB培养基(液面高度刚好淹没短牙签)，高压灭菌(1210C,20min)。5仪器设备5.1恒温培养箱:(28十2)oC。5.2显微镜:物镜头10倍~100倍。5.3电子天平:感量0.01g。5.4高压灭菌器。5.5超净工作台。6苗期抗病性鉴定6.1接种体接种体为立枯丝核菌AG1-IA菌丝融合群，应符合附录A的规定。6.2试验材料6.2.1种子质量种子质量应符合GB4404.1常规稻或杂交稻一级种标准，不应带检疫性病虫。6.2.2播种选择饱满度一致的试验材料种子，经3%过氧化氢榕液浸种1d后，用清水冲洗

7、后再浸种2d，放入垫有两层滤纸的培养皿中，置于恒温培养箱中300C催芽。待胚根长至0.5cm时，选择芽长一致的种子播于装有灭菌土的塑料育苗箱中(长45cmX宽35cmX高10cm)。按宽窄行点播，同一品种窄行3cm，不同品种宽行5cm，种子表层覆1cm左右的灭菌土。每重复每份试验材料播10株苗。采用随机区组设计，重复3次。每50份试验材料设附录B中已知抗性的对照品种。6.2.3育苗在180C~280C的室外自然光照下育苗，幼苗应生长健壮、一致。苗床土保持湿润，不能有水层。6.3接种体6.3.1接种体准备根

8、据试验需要选取附录C的鉴别菌株作为接种体，将菌株移植到PDA培养基的正中央，菌丝面朝0上，盖上皿，置于人工培养箱28C培养48h。6.3.2接种体繁殖将培养好的病原菌，在无菌条件下用直径5mm的灭菌打孔器，自菌落边缘切取菌饼，接种于培养0基A.在培养箱中28C培养7d~10d,1d~2d摇动一次，待谷粒表面布满菌丝后作为接种物备用。6.4接种6.4.1接种方法在水稻秧苗4叶期，将带有菌丝的稻谷紧贴每株水稻小苗基部的两侧各放置1