DB23∕T 2338—2019 侧金盏花组培快繁技术规程(黑龙江省)

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1、ICS65.020.01B64DB23黑龙江省地方标准DB23/T2338—2019侧金盏花组培快繁技术规程2019-04-03发布2019-05-02实施黑龙江省市场监督管理局发布DB23/T2338—2019前言本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省森林工业总局提出。本标准起草单位：黑龙江省林业科学研究、黑龙江省林业监测规划院、黑龙江茅兰沟国家级自然保护区、黑龙江省林业科学院、黑龙江丰林国家级自然保护区管理局、哈尔滨理工大学。本标准主要起草人：李晶、王丹、王承义、王颖、王英、孙海滨、孙一萌、黄金龙、王晓荣、

2、舒钰、赵学丽、崔崧、刘延滨、刘强。IDB23/T2338—2019侧金盏花组培快繁技术规程1范围本标准规定了侧金盏花（AdonisamurensisRegeletRddde）组培快繁技术的培养基制备、外植体选择、采集与消毒处理、培养条件、诱导分化与继代增殖、生根培养、组培苗炼苗与移栽和技术档案。本标准适用于侧金盏花组织培养生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6001育苗技术规程NY/T23

3、06花卉种苗组培快繁育苗技术规程。3培养基制备3.1培养基初代培养基：MS+NAA0.1mg/L+IAA0.5mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH值调至5.8；诱导分化培养基：MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.3mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH值调至5.8；继代增殖培养基：MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.5mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH值调至5.8；生根培养基：1/2MS+IAA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L，pH值调至5.8。培养基制备按

4、NY/T2306进行。3.2培养基消毒灭菌。瓶装培养基需在10h内完成灭菌，采用高压蒸汽灭菌锅灭菌，在压力0.105MPa、温度121℃条件下灭20min～25min，锅内的灭菌物应不超过锅的容量3/4，高压灭菌时锅内使用蒸馏水。3.3培养基保存灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下7d内使用，2℃～4℃条件下14d内使用。培养基应保存于洁净环境中，应避光和防尘。4外植体采集及处理4.1采集时间1DB23/T2338—2019应选择晴天上午采集外植体。4.2采集部位五月上旬，花凋落后，选择生长健壮无病虫害的母株，剪取有芽茎段作为外植体，外植

5、体大小4cm～5cm。4.3外植体清洗洗涤剂清洗表面泥土，然后用自来水冲洗2h～3h。4.4外植体灭菌将外植体用洗涤剂作表面清洗后，流水冲洗30min，放入超净台中,加入75%酒精灭菌10s，无菌水冲洗3次～5次，然后用0.1%升汞灭菌8min，无菌水冲洗3次～5次,并用无菌水浸泡20min，无菌滤纸吸干水分备用。4.5切割将外植体两端各剪去2mm，应保持茎段长度1.0cm～2.0cm。5培养条件5.1温度培养室温度应控制在25℃±2℃。5.2湿度培养室相对湿度应保持40％～50％。5.3光照强度培养室光照强度控制在27μmol•m-2•

6、s-1～36μmol•m-2•s-1。5.4光照时间每天光照12h。6诱导分化与继代增殖6.1外植体的接种将培养瓶口在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒，将外植体放入培养瓶中，每个培养瓶放3个外植体，接种后盖上封口膜，并标注日期。6.2初代培养将消毒好的茎段接种到初代培养基上，培养40d生长侧芽。6.3诱导分化2DB23/T2338—2019将侧芽接种到分化培养基中进行诱导分化。每个培养瓶放3个～4个外植体，培养10d后开始分化不定芽，20d分化成丛生芽。6.4继代增殖培养将芽接种到继代增殖培养基中，经过50d可分化成丛生苗，3周～5周继代一次。7

7、生根培养选取生长健壮且高度在1.0cm～2.0cm的分化苗，接种到生根培养基中进行生根培养，培养30d诱导生根。8组培苗炼苗与移栽8.1炼苗8.1.1炼苗标准当组培幼苗基部长出3条以上新根、根长1.0cm～2.0cm即可进行炼苗。8.1.2炼苗方法将组培苗转移到日光温室中，自然散射光下炼苗，温度控制在20℃～25℃，湿度在70%～80%，揭去封口膜，每天中午在培养瓶周围喷洒雾水，3d后移栽。8.2移栽8.2.1基质选择蛭石。8.2.2移栽方法取出组培苗，用清水洗去苗基部的培养基，移栽至基质中，育苗基质放入育苗容器并浇透水，育苗盘规格35c

8、m×50cm×10cm，基质厚度5cm～7cm，株行距3cm～3cm，组培苗移栽应在傍晚进行，育苗管理按GB/T6001进行。8.2.3移栽管理50%透光率遮光网遮光7d，7d后移除，温室应保