DB34∕T 824-2020 动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定 胶体金免疫层析法(安徽省)

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1、TCS67.120C53DB34ET山巳....l-.且，文徽省万标准DB34/T824-2020代替DB34/T824-2008动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定胶体金免疫层析法DeterminationofclenbuterrolhydrochlorideresidueinanimaltissuesColloidalgoldimmunochromatographicmethod2020-08-03发布2020-09-03实施安徽省市场监督管理局发布DB34/T824-2020目IJ1=1本标准

2、按照四月1.1-2009给出的规则起草。本标准代替DB34/T824-2008((动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定胶体金免疫层析法))，除编辑性修改外主要技术变化如下:修改了标准名称，删除了标准名称中的连接符""一一修改了试剂和材料内容(见第4章);增加了仪器设备(见第5章);一一修改"实验步骤"为"检测步骤并修改了部分内容，优化了样品制备(见第6章);修改了结果判断内容方法确认"改为"有效性确认"(见第7章);一一修改结果确认方法表述(见第8章);增加了附录A(见附录的。本标准由安徽省兽药饲料

3、监察所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:安徽省兽药饲料监察所、7国市金东坊农业开发有限公司、合月巴谱尼测试科技有限公司、望江县畜牧兽医局、合肥市动物疫病预防与控制中心、合肥市动物卫生监督所、宁国市自然资源和规划局、安徽省水产技术推广总站、铜陵市义安区畜牧兽医局。本标准主要起草人:许世富、吴吴、赵家喜、可宏富、何广、徐勇、许晓靖、孙悟祥、何为俊、胡林林、王振。DB34/T824-2020动物组织中盐酸克伦特罗的残留测定胶体金免疫层析法1范围本标准规定了动物肌肉、肝脏、肾

4、脏中盐酸克伦特罗残留测定的胶体金免疫层析法。本标准适用于动物肌肉、肝脏、肾脏中盐酸克伦特罗残留的快速检测。本标准检测限为3/lg/kgo2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，{叉所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB!T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理本方法采用胶体金竞争抑制法。将氯金酸用柏梅酸铀还原法制成一定直径的金溶胶颗粒，标记抗体。耐酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细管作用，将样

5、本滴力日在胶体金检测条样品垫一端，使液体慢慢向吸水纸另一端渗移。在样本移动的过程中，会发生相应的抗原抗体反应，并通过免疫金的颜色而显示出来。样本中的克伦特罗在流动的过程中与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素(NC)膜检测线上的克伦特罗人工抗原的结合，i吏检测线不显颜色，结果为阳性:反之，检测线显紫红色，结果为阴性。4试剂和材料4.1除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合GB!T6682规定的二级水。4.2胶体金免疫层析快速检测卡组成4.2.1盐酸克伦特罗特异性抗体。4.

6、2.2胶体金。胶体金溶液采用氯金酸还原法制备，应为带负电的紫红色疏水胶体金溶液，金颗粒大小应在30nm~60nm之间。4.2.3硝酸纤维素膜。硝酸纤维素膜表面应平整、光滑、白净，没有划痕、凹印、小孔、水迹、桶皮状或其他肉眼能见的瑕疵，无灰尘、油渍或其他杂物。硝酸纤维素膜宽度为25.4土0.5mm，长度在100::1::2mm，厚度在185土19/lm，毛细流速度为180土45s/40mmo4.2.4聚酷纤维膜。聚酶纤维膜表面形状应为基本均匀的矩形，无明显歪斜现象。色泽好，白色，表面洁净，均匀度好

7、，无破损，无起皱，无污点，无色斑，无霉点，无异昧，无杂质及灰尘。聚醋纤维膜重量在98.3土10.0g/町，厚度在0.42土0.07mm，长度为305.0土2.5mm，宽度为254.0::1::2.5mmo4.2.5吸水纸。4.2.6底板。4.2.7塑料盒。DB34/T824-20204.2.8塑料吸管。4.2.9金标样品稀释液。4.3阴性对照:取不含盐酸克伦特罗的空白样品，作为空白试料。4.4阳性对照:取盐酸克伦特罗标准工作液用水稀释为10阳/L4.5盐酸克伦特罗标准品O5仪器设备5.1电子天平

8、:感量分别为O.01mg和1mgo5.2离心机:三3000rpmo5.3水浴锅。6检测步骤6.1样品制备取新鲜或解冻后的供试样品适量(约1g)，剪碎，装入3mL离心管中，盖紧管盖，100'C加热5min，取出，自然冷却，3000rpm离心5min，取上请组织渗出液100队，加入100μL金标样品稀释液(4.2.9)，~1昆匀，备用O6.2溶液制备6.2.1盐酸克伦特罗储备液准确称职盐酸克伦特罗标准品适量，用甲醇溶解后稀释成1mg/mL的储备液，-18'C冰箱中贮存备用，有效期3个月06.2.2盐