DB63_T 1435-2015 藏獒细管冷冻精液生产技术规程(青海省)

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1、TCS65.020.30B43备案号48512-2016DB63主同ET山巳海省且，万标准DB63/T1435-2015藏莫细管冷冻精液生产技术规程2015-12-21发布2016-03-20实施青海省质量技术监督局发布DB63/T1435--2015目IJ1=1本规程依照GB!T1.1-2009编写。本规程由青海省农牧厅归口。本规程由青海省家畜改良中心起草。本规程主要起草人:胡宁主、薛晓蓉、张晋青、杨桂梅、马元梅、常永梅、赵静、刘宁、运玉、袁海洲、白坤云、潘顺利、赵莉渲、郭舰、周{青、郭万春、郭占泽。DB63/T1435--2015藏莫

2、细管冷冻精液生产技术规程1范围本规程规定了藏莫细管冷冻精液生产的基本要求、稀释液配制、采精、精液处理、细管标识、精液冷冻、冻精包装、标记和贮存等。本规程适用于藏契细管冷冻精液的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T5458液氮生物容器NY1870藏莫3术语与定义下列术语和定义适用于本规程。3.1种公莫经国家畜牧行业组织评定，符合NY1870的B级以上公英。3.2采精用人工模拟的方法获得公英精

3、液。3.3采精量公英射精时第二段的精液量。3.4精子密度每单位体积精液中的精子数目。单位为亿每毫升。3.5细管冷冻精液DB63/T1435--2015在细管内注入精液经液氮冷冻所形成的产品。简称"细管精液"或"冻精"。4准备4.1月牙、精制作室的要求室内清洁卫生，做到无菌操作。4.2仪器设备用于藏英细管冷冻精液生产的仪器设备见表10表1仪器设备序号设备名称参数1精液细管喷码机2细管封装机5250支XO.25毫升3精液也度仪O.21毫升~O.23毫升4精液程控冷冻仪45oC~-140oC5相差显微镜100倍~400倍6电子天平O.0001克

4、4.3器械清洗和消毒4.3.1玻璃器皿首次使用的玻璃器皿用自来水冲洗后放入5%稀盐酸中浸泡12小时，取出后立即用自来水冲洗，再用于工或超声波清洗器在加有洗涤剂的温热水中进行刷拭，然后用自来水冲洗干净，最后用蒸锢水冲洗，直至器皿光亮、无水滴附着。将洗净的玻璃器皿放置于电热干煤箱内，加热至160oC后再恒温60分钟，自然冷却后使用。使用过的玻璃器皿用自来水冲洗，遇有污物或油垢不易清洗的器皿，放入重锚酸辛甲洗液中浸泡数小时，取出后立即用自来水冲洗，后续步骤同上。4.3.2纱布纱布清洗干净紫外线消毒30分钟后持用O4.3.3其它器具金属摄子、止血

5、钳、药匙、胶塞和吸管胶头等用75%酒精棉球擦拭消毒，待酒精挥发尽后方能使用。细管、冷冻架使用前用紫外线消毒30分钟。4.4稀释液的配制稀释液的配制按照附录A进行。5采精5.1种公契的选用条件2DB63/T1435--2015种公英必须健康，无遗传疾病，无农业部规定的动物疫病。5.2采精年龄18月龄以上。5.3采精频率成年种公英在繁殖季节每周可采精2天。每天采精1次。5.4采精采集藏英第二部分乳白色精液。藏契的采精可参照附录B进行。6精液的处理6.1精液处理准备凡接触精液的器皿均应放置于34'C恒温箱中，稀释液置于34'C恒温水浴箱中备用O

6、对盛装稀释精液的稀释瓶做明显标记O6.2精液要求所采集的藏莫精液质量指标应符合表2的要求，有一项不符合的精液不得用于生产冻精。表2精液质量指标序号项日质量指标试验力法I外观为乳白色或微黄，略有腥味。自然光下目测。2桔子活力(%)?65取精液或稀释精;夜5微升~101放升丁载玻片r，加盖盖玻片后;在38℃恒温装置的400倍显微镜山评定活力。3精于密度(亿/毫升二6用精液密度仪测定。6.3精液稀释与平衡6.3.1精液稀释量确定和活力评定根据鲜精液的密度、活力、采精量等确定应加入的稀释液量，确保每剂i牙、精所含直线前进运动桔子数的要求。精液稀释

7、后和平衡后应评定活力。6.3.2稀释方法与平衡按附录A配制第I液及第II液。用34'C的第I液缓慢地加入精液中，摇匀，所加第I液的量为所加稀释液总量与精液量总和的一半减去精液量，用烧杯盛适量的34'C水，把稀释管置于4'C~5'C低温柜内降温，与此同时把第H液也放入。稀释后的精液，采用逐渐降温法。在1小时~1.5小时内，使稀释精液的温度降到4'C~5'C，然后再在同温的恒温容器内平衡1小时~2小时O冷冻前半小时加入第3DB63/T1435--2015II液，所加第II液的量为所加稀释;夜总量减去所加第I液的量。加入第II液后平衡半小时，然

8、后在低温柜中进行细管分装，分装后的细管即可进行冷冻。6.4涛、精制作6.4.1细管的封装与冷冻6.4.1.1细管要求细管为无毒、耐低温的专用塑料管。保证清洁、无菌。6.4.1.2封装在低温柜中