DB13T 2283-2015 大花萱草工厂化育苗技术规程

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1、ICS65.020.20B05DB13河北省地方标准DB13/T2283—2015大花萱草工厂化育苗生产技术规程2015-12-25发布2016-02-01实施河北省质量技术监督局发布DB13/T2283—2015前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由河北省林业厅提出。本标准起草单位：河北省林业科学研究院。本标准主要起草人：赵玉芬、储博彦、尹新彦、李金霞、刘满光、郝建清、张永信、徐晓娜、张军霞、李国松、王乃泽。IDB13/T2283—2015大花萱草工厂化育苗生产技术规程1范围本标准规定了大花萱草工厂化育苗生产的组培工厂的设计要求

2、、所需的仪器设备及化学试剂、生产工艺流程、生根与移栽管理、质量分级及包装、标志、运输等内容。本标准适用于大花萱草工厂化育苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T2063-2012萱草种苗生产技术规程NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程3组培工厂的设计要求、所需的设备、器材及试剂按照NY/T2306-2013中4.1～4.2执行。4瓶苗生产工艺流程4.1品种选择选择市场流行的品种，见附录A。4.2

3、母株资源保存将大花萱草母株种植在特定区域，加强肥水管理，确保植株健壮，防治病虫害，减少植株表面附带的微生物和害虫。4.3培养基选择与母液配制4.3.1培养基选择根据大花萱草不同品种和外植体部位选择合适的培养基种类和激素配比。以MS和1/2MS(大量元素减半)为基本培养基。参见附录B。4.3.2基本培养基母液配制和保存按照NY/T2306-2013附录G执行。4.3.3植物生长调节剂的母液配制和保存按照NY/T2306-2013附录H执行。1DB13/T2283—20154.4培养容器和接种器械的清洗按照NY/T2306-2013中6.1和6.2执行。4.

4、5培养基制作4.5.1配制根据培养基成分准备好蒸馏水、琼脂、蔗糖和各类母液等。制作1L培养基加蒸馏水700mL（按所-1-1-1需容量的70%左右），再加入琼脂4g·L～6g·L，加热搅拌使琼脂融化。加砂糖30g·L，糖溶解后，根据预配母液取量，再根据要求加入激素若干，并充分搅拌均匀后，加蒸馏水定容至1L。用pH计或-1-1pH试纸测pH值，用0.1mol·L的HCl或0.1mol·L的NaOH调节pH至为5.8～6.0。生产中根据所需容量按比例配置。4.5.2分装根据不同需要定量分装，如150mL的培养瓶，每瓶分装约30mL～40mL。分装培养基时勿将

5、培养基沾在培养瓶瓶口。4.5.3高压灭菌-2-2培养基分装后应在10h内进行湿热灭菌；灭菌条件一般在1.1kg·cm～1.2kg·cm、121℃下，灭菌18min～20min。4.5.4贮存灭菌后的培养基应注明培养基编号及配制日期，储存于培养基储藏室内，存储时间不应超过10d。4.6接种操作按照NY/T2306-2013中10.1～10.11执行。4.7培养室操作按照NY/T2306-2013中11.1～11.5执行。4.8外植体选择、灭菌及接种4.8.1外植体的选择从健康植株上选取1.5cm～2.5cm花蕾做外植体最好。也可采用大花萱草的茎芽、幼嫩花序

6、轴上带节点区段为外植体。4.8.2外植体消毒将整理好的外植体，用餐具洗涤剂溶液浸泡并振荡5min～10min，然后自来水冲洗30min。在超净台上将预处理后的外植体放在有盖容器中，倒入75%酒精溶液中浸泡10s～30s，用无菌水冲洗外植体3次。再用0.1%的HgCl2溶液浸泡8min～10min，或者5%次氯酸钠溶液浸泡20min～30min，用无菌水冲洗3～5次后备用。升汞安全管理方法按照《危险化学品安全管理条例》执行。4.8.3外植体接种2DB13/T2283—2015在超净工作台上用手术刀和镊子将外植体切割成所需大小，一般切去花蕾顶部，留花托近1.

7、0cm左右，纵切为2块；茎芽1.0cm～1.5cm，幼嫩花序轴上带节点区段取0.5cm～1.0cm。接种到初代培养基上。每瓶接种1个外植体。将品种代号、培养基类型、接种人员以及接种日期认真标示到瓶上；放入培养室进行培养。4.9初代培养培养温度为23℃±2℃，，光照强度1000lux～1500lux，每日光照12h～14h。外植体在初代培养基培养1周后，花托基部开始膨大。培养3周后，形成淡黄或浅绿光滑的愈伤组织。4.10继代培养4.10.1不定芽分化将愈伤组织转接到继代培养基上，诱导不定芽分化，培养条件同4.9。4.10.2不定芽增殖与继代当瓶苗增加到一

8、定数量和规模后，降低分裂激素的浓度，进行丛生芽分化培养，可采用丛生芽—切割—小芽