不同中药方剂对弓形虫感染小鼠脾细胞分泌il_2活性的影响

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1、动物医学进展,2014,35(12):96-99ProgressinVeterinaryMedicine不同中药方剂对弓形虫感染小鼠脾细胞分泌IL-2活性的影响王鹏1,刘春凌1,王琼2,方素芳1,崔平1*(1.河北北方学院动物科技学院,河北张家口075000;2.张家口市动物疫病预防控制中心,河北张家口075000)摘要:通过观察不同方剂对小鼠感染弓形虫后脾IL-2含量的影响,确定对弓形虫病治疗效果最佳的复方中药。将昆明系小鼠随机分为中药复方方剂组(A、B、C组)、复方SMZ组(D组)、模型组(E组)和对照组(F组)。用RH株弓形虫速殖子腹腔感染小鼠,2h后灌

2、胃给药,其中A、B、C3个组每只每次0.5mL自拟弓形虫汤剂;D组每只每次0.5mL复方SMZ混悬液300mg/(kg·d-1),疗程15d。采用双抗夹心ELISA法,观察不同方剂对小鼠脾细胞IL-2含量的影响,并对照不同方剂之间的差异,采用F检验和q检验进行统计分析。结果表明,A、B、C组和D组IL-2活性水平均随着时间延长而逐渐升高;A、C、D组与F组有显著性差异;B组IL-2水平活性保持了较高值,与E组差异极显著。说明3种自拟中药复方方剂均能显著提高弓形虫感染小鼠脾细胞IL-2的含量,增强小鼠免疫功能,其中复方二提高最显著,对IL-2活性影响最大。关键词

3、:中药方剂;弓形虫;白介素-2;小鼠中图分类号:S852.72;S853.7文献标识码:A文章编号:1007-5038(2014)12-0096-04刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种专性动物寄生虫研究所提供。细胞内寄生的原虫,在人和野生动物之间广泛传播,1.1.3药物中药购自河北省张家口市南山堂大[1-2]药房,检验合格,自拟弓形虫汤组方:复方一:黄芪、给人畜健康和畜牧业发展带来了严重的危害。目前临床上治疗弓形虫病主要以西药为主,如乙胺白术、青蒿、草果、槟榔;复方二:黄芩、甘草、槟榔、黄嘧啶、磺胺嘧啶等,但是这些药物毒副反应发生率高芪;复方

4、三:常山、槟榔、苦参、黄芪、甘草;复方SMZ达40%,且不能根治,作用时间长[3-4]。粉剂,由典牧动物药业有限公司提供,批号:兽药中药治疗弓形虫病的研究已取得了许多成就,GMP证字791号。用双蒸水配制成悬浊液,浓度但仍存在一些问题。中药抗弓形虫感染的研究,需12mg/mL,现配现用。借助许多学科来促进其发展,依靠中兽医理论指导1.1.4试剂IL-2检测试剂盒由上海彩佑生物技术有限公司提供;RPMI-1640粉,GIBCO公司产品;临床用药,然后启发我们进一步探讨药物作用机理,刀豆蛋白A(ConA),Sigma公司产品。筛选高效低毒的单味中药及中药配伍对弓形

5、虫病的1.2方法治疗,不断开发新药。本试验在中兽医理论的指导1.2.1分组将昆明小鼠随机分为6组:复方一组下,自拟弓形虫汤剂,通过不同方剂对小鼠感染弓形(A组,使用复方一);复方二组(B组,使用复方二);虫后脾细胞分泌IL-2活性的影响比较研究,以期为复方三组(C组,使用复方三);复方SMZ组(D组);开发高效、低毒并最终控制弓形虫感染的新药提供模型组(E组);对照组(F组)。每组40只,雌雄各理论依据。半。另取同样数量小鼠随机分为相同的6组,以相1材料与方法同饲喂和给药方法饲养,观察死亡情况。1.1材料1.2.2动物模型建立用RH株弓形虫速殖子常1.1.1实

6、验动物健康昆明小鼠240只,雌雄各规腹腔感染小鼠,72h后断颈处死,5g/L碘酊消毒半,体重18g~22g,由河北北方学院实验动物中心小鼠腹部,750mL/L乙醇溶液脱碘,注射生理盐水提供。3mL洗涤腹腔,吸取冲洗液,用血细胞计数板按白1.1.2虫株弓形虫RH强毒株,由河北北方学院细胞计数方法在高倍镜下计数,调整弓形虫速殖子收稿日期:2014-04-08基金项目:河北省教育厅自然科学基金项目(2007103)作者简介:王鹏(1978-),男,河北张家口人,讲师,硕士,主要从事临床兽医学研究。*通讯作者王鹏等:不同中药方剂对弓形虫感染小鼠脾细胞分泌IL-2活性的

7、影响97浓度为2×104/mL,除对照组外每只小鼠腹腔注射37℃、体积分数为5%CO2培养箱内48h,收集上上述弓形虫悬液0.5mL。清,置-20℃保存待测。1.2.3自拟弓形虫汤剂的制备将配好的复方中1.2.7IL-2的检测严格按照试剂盒说明书操作药置砂锅内,加入6倍~8倍的冷水浸泡30min~(双抗夹心ELISA法)。60min,用火加热,开始用强火,沸后改用文火,煮沸1.2.8统计学处理结果用x珚±SD表示,试验数30min,用纱布过滤。药渣加3倍~5倍量水继续按据的统计经SPSS13软件处理,采用方差分析,q检上法煎煮,沸后煎煮30min,滤过,合并得

8、两次滤液,验。于水浴上浓缩成每毫升相当

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