高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素的比较研究

《高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素的比较研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、粮食与食品工业Ｖｏｌ．２２，２０１５，Ｎｏ．３标准与检测ＣｅｒｅａｌａｎｄＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙ高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素的比较研究贾卫昌，朱寅常州市粮油质量监督检测站（常州２１３０１６）摘要：以小麦为样品，通过高效液相色谱法和酶联免疫法检测结果对比分析，改进高效液相色谱法中的洗脱方法，稀释酶联免疫法中的样品量。结果显示：高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素在２００～１５００μｇ／ｋｇ存在相关性，即呕吐毒素含量ＣＨＰＬＣ＜ＣＥＬＩＳＡ，两者相差平均为１４９．２μｇ／ｋ

2、ｇ，ＲＳＤ为１２．６％。酶联免疫法操作简便快速，适用于大量样品的快速初筛，而高效液相色谱法检测时间较长，成本较高，更适合经ＥＬＩＳＡ法初筛后呈阳性样品的确证以及呕吐毒素含量的准确定量。关键词：小麦；高效液相色谱法；酶联免疫法；呕吐毒素中图分类号：ＴＳ２１０．７文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－５０２６（２０１５）０３－０９７－０３ＡｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｄｅｏｘｙｎｉｖａｌｅｎｏｌｉｎｗｈｅａｔｗｉｔｈＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄａｎｄＥＬＩＳＡＪ

3、ｉａＷｅｉｃｈａｎｇ，ＺｈｕＹｉｎＣｈａｎｇｚｈｏｕＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎａｎｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎＳｔａｔｉｏｎｆｏｒＧｒａｉｎａｎｄＯｉｌ（Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ２１３０１６）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇｗｈｅａｔａｓｓａｍｐｌｅ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆＨＰＬＣａｎｄＥＬＩＳＡｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄａｎｄａｎａｌｙｚｅｄ，ｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｅｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆＨＰＬＣ，ｄｉｌｕｔｅｔｈｅｓａｍｐｌｅｑｕａｎｔｉｔｙｏｆＥＬＩＳＡ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗ

4、ｔｈａｔｔｈｅｒｅｉｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｏｆｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｈｅＤＯＮｉｎｗｈｅａｔｗｉｔｈＨＰＬＣａｎｄＥＬＩＳＡｗｈｏｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｓｆｒｏｍ２００ｔｏ１５００μｇ／ｋｇ，ｍｅａｎｉｎｇｔｈａｔｔｈｅＤＯＮｃｏｎｔｅｎｔｉｓｔｈａｔＣＨＰＬＣ＜ＣＥＬＩＳＡ，ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓｉｓ１４９．２μｇ／ｋｇ，ＲＳＤｉｓ１２．６％．ＴｈｅＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｉｓｑｕｉｃｋａｎｄｅａｓｙｔｏｂｅｏｐｅｒａｔｅｄａｎｄｓｕｉｔａ

5、ｂｌｅｆｏｒｔｈｅｒａｐｉｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｌａｒｇｅｎｕｍ－ｂｅｒｓｏｆｓａｍｐｌｅｓ．ＷｈｉｌｅＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｔａｋｅｓｌｏｎｇｅｒａｎｄｃｏｓｔｓｈｉｇｈｅｒｔｏｄｅｔｅｃｔ，ｓｏｉｔｉｓｍｏｒｅｓｕｉｔ－ａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎｏｆｐｏｓｉｔｉｖｅｓａｍｐｌｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙＥＬＩＳＡ，ａｎｄｔｈｅａｃｃｕｒａｔｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｏｆＤＯＮｃｏｎｔｅｎｔ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｗｈｅａｔ；ＨＰＬＣ；ＥＬＩＳＡ；ＤＯＮ脱氧雪

6、腐镰刀菌烯醇又名呕吐毒素（ＤＯＮ），与１０００μｇ／ｋｇ，而根据调查监测发现我国部分省份夏雪腐镰刀菌烯醇均属于单端孢霉烯族毒素，主要由季小麦的呕吐毒素超标现象较为严重，直接影响了某些镰刀菌产生。根据粮食卫生标准（ＧＢ２７１５—收储粮食的质量安全。因此加强对小麦中呕吐毒素２００５），小麦中的呕吐毒素限量要求不超过的监测也成为粮食部门每年夏粮收购的重点工作。目前，对小麦中呕吐毒素检测主要采用的是高收稿日期：２０１５－０１－０９［１－２］效液相色谱法和酶联免疫法。高效液相色谱法作者简介：贾卫昌，男，１

7、９６６年出生，工程师，主要从事粮食质量监管及粮油检测工作。按照ＧＢ／Ｔ２３５０３—２００９《食品中脱氧雪腐镰刀菌９７标准与检测贾卫昌等：高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素的比较研究烯醇的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》方要，准确吸取一定量的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储法进行检测，其过程是用提取液提取试样中的脱氧备液，用流动相稀释，分别配成相当于０．１、０．２、雪腐镰刀菌烯醇，经免疫亲和柱净化后，用高效液相０．５、１．０、２．０、５．０μｇ／ｍＬ的标准工作液。色谱紫外检测器测定。而酶联免

8、疫法是按照ＧＢ／Ｔ１．２仪器与设备５００９．１１１—２００３《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌ＪＸＦＭ１１０锤式旋风磨，上海赛霸精密仪器有限烯醇的测定》中第二法免疫测定法（ＥＬＩＳＡ）方法来公司；ＷＺ－２Ａ微量振荡器，江苏金坛恒丰仪器厂；检测，其过程是利用抗原—抗体原理，在已含有抗原１２００高效液相色谱仪（配有紫外检测器），美国安捷的酶标板微孔中加入一定量的单克隆抗体与标准溶伦公司；ＨＳＣ－１２Ａ氮吹仪，天津市恒奥科技发展液或样品提取液，孵育后形成抗原抗体复合物，然后有限公司；７８ＨＷ－１恒温磁力搅