acquity uplctm beh色谱柱的维护和使用指南

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1、TMACQUITYUPLCBEH色谱柱的维护和使用指南TM感谢您选择Waters公司的ACQUITYUPLCBEH色谱柱，它是专门为了配合Waters的ACQUITYUPLC色谱系统设计的。它采用超纯试剂在满足GMP要求并获得ISO9001认证的TM条件下生产。ACQUITYUPLCBEH的每批填料都会用酸性、碱性和中性化合物的色谱分离进行检验，并且填料的指标控制非常严苛，以保证色谱柱卓越的重现性。每一根ACQUITYTMUPLCBEH色谱柱都是单独检测，色谱柱的性能图谱和填料的批次检验证书一起存储在TMeCord芯片上。请注意：TM我们不建议将ACQUITYUP

2、LCBEH色谱柱用于普通的HPLC仪器。内容提要：第一节开始A/色谱柱的连接B/色谱柱安装C/色谱柱平衡TMD/eCord安装E/新色谱柱柱效测试第二节色谱柱的使用A/样品的准备B/pH范围C/溶剂D/压力E/温度第三节色谱柱的清洗、再生和保存A/清洗和再生B/保存TM第四节eCord智能芯片技术介绍A/简介B/安装C/生产信息D/色谱柱使用信息其它补充信息TMA/延长ACQUITYUPLCBEH色谱柱使用寿命的小秘诀B/ACQUITYUPLCBEH色谱柱的建议流速和压力TMC/开始使用ACQUITYUPLCBEHHILIC色谱柱第一节开始TMTM每一根ACQUI

3、TYUPLCBEH色谱柱的eCord智能芯片上都有针对填料的分析报告和针对色谱柱的性能报告：分析报告是针对填料的批次测试报告，其中包括填料的批号、非键合颗粒以及键合颗粒的分析、测试图谱和测试的色谱条件；性能测试报告是针对每根色谱柱的测试报告，包括以下信息：填料批号、色谱柱序列号、塔板数、拖尾因子、容量因子以及测试的色谱条件。用户应该储存这些信息用于将来的参考。A.色谱柱的连接TMACQUITYUPLC系统是使用经过专门设计的可耐受高压并且有最小柱外体积的管路和接头，最优化的色谱柱进口管路（订货号430001084）是随仪器配置的，进样阀末端的管路清晰地用蓝色标记标

4、示出来，将这根管路的另一端插入UPLC色谱柱的入口端并用5/16英寸的TMTM扳手拧紧。关于ACQUITYUPLC色谱柱的出口管路，请参考ACQUITYUPLC系统操作手册的相关检测器部分（货号71500082502）。B.色谱柱安装说明：以下流程中给出的流速适用于50×2.1mmI.D.,1.7um粒径的色谱柱，对于其它规格的色谱柱需要根据其它补充信息中的表格B中建议的流速和压力进行调整1.Purge含有任何缓冲盐的泵系统，将色谱柱入口端连接到进样器的出口端（先不要接检测器）2.在0.1ml/min流速条件下用100％纯甲醇或乙腈冲洗色谱柱，然后在5分钟内将流速

5、升至0.5ml/min。3.当溶液均匀地从柱子出口流出时，停掉流速，将色谱柱出口端接到检测器上（这样操作可以避免气泡进入检测系统，并且可快速达到基线平衡）4.按照步骤2的方法逐渐提高流速5.一旦压力达到稳定值并且基线平衡好后，则进入下一步操作6.说明：如果流动相中含有低浓度的流动相改性剂如离子对试剂，要达到完全平衡可能需要100倍甚至200倍柱体积的流动相消耗；并且，对于含有甲酸或甲酸铵的流动相也需要较长的时间达到初始平衡C.色谱柱平衡TMACQUITYUPLC色谱柱是用100％乙腈保存的，在使用其它的流动相系统前一定要确保流动相和色谱柱内溶剂的“相容性”：至少用

6、10倍柱体积的流动相平衡色谱柱的（见表一中不同规格色谱柱的柱体积数值），当柱压平稳后即可认为色谱柱基本上达到了热力学平衡。TM表一：不同规格ACQUITYUPLC色谱柱的柱体积（乘以10作为冲洗色谱柱所用的流动相体积）柱长(mm)内径1.0mm内径2.1mm200.016ml0.07ml300.024ml0.1ml500.04ml0.2ml1000.08ml0.4ml1500.12ml0.5ml为了避免流动相中的缓冲盐在色谱柱或系统中析出，在换上流动相之前，需要用5倍柱体积的含水的有机溶剂的混合溶液（要求有机溶剂的含量比流动相中的含量略低或相等，将缓冲盐溶液用水替

7、代：如在使用60/40的甲醇/缓冲盐流动相之前先用5倍柱体积的60/40甲醇/水溶液冲洗色谱柱）。TM对于ACQUITYUPLCHILIC色谱柱来讲，用50倍柱体积的50/50乙腈/水平衡，如果流动相中含有缓冲盐则要求流动相中缓冲盐的最终浓度是10mmol/L（以水相部分的浓度计算）；在开始进样前，用20倍柱体积起始流动相进行平衡。D.eCord安装将eCord放至色谱柱柱温箱旁边，由于eCordButton是磁化的，因此不需要专门进行定位。E.初始色谱柱柱效测试•在开始使用色谱柱分析样品前先进行柱效测试，测试的样品可以是您实验室中常用的测试物或几种测试物的复合物

8、；或者使用