野生及栽培甘草hplc指纹图谱

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1、维普资讯http://www.cqvip.com野生及栽培甘草HPLC指纹图谱jj罾闫永红,段天璇,王文全,姜珊北京中医药大学中药学院,北京100102【摘要】目的:研究野生及栽培甘草的质量区别。方法:建立野生及栽培甘草的HPIIC指纹图谱(CromasilODS色谱柱;0.1%磷酸溶液为流动相;梯度洗脱)并进行对比分析;利用MS/MS技术推测化合物结构。结果:鉴定了部分成分的化学结构;野生与栽培甘草所含成分大部分相同,仅有少量区别;栽培甘草中少数成分随栽培年限不同有所变化。结论:_扭方法灵敏度高,分析快速、准确,可以为甘草药材内在质量控制提供依据。【关

2、键词】甘草;HPI£指纹图谱;甘草酸【中图分类号】R284.1,917【文献标识码】A【文章编号】1672—3651(2【x】6)02一Ol16.(15《中国药典》收载的甘草来源为豆科植物甘草1.2药材Glyeo~rrhizauraler~isFisch.、胀果甘草G.inflateBat.人工栽培和野生甘草药材样品由作者之一闫或光果甘草G.glabraL.的干燥根及根茎,主要生永红2003年l0月于内蒙古杭锦旗采集并鉴定,全长在我国北部及西北半荒漠地区,为常用大宗中部为甘草G.uralensisFiseh.的根。人工栽培甘草药材。中医药传统认为甘草具有

3、补脾益气,清热生长年限分别为2、3、4年。每个栽培样品共lO解毒,润肺止咳,缓急止痛,调和诸药的功效,现代份,每份样品为30个植株混合均匀而得,栽培甘药理研究也发现其具有提高免疫力、保肝、抗炎、草根头直径0.8~1.2cm;野生甘草据根头部直径抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、解痉抗溃疡、止咳平喘分为条草一(1.5~2.0cm)、二(1.01.4cm)、三等作用⋯;甘草的供应长期以来主要依赖于野生(0.7~0.9cm)等2,每等lO份。资源,其销量约占甘草总销量的90%以上。但过1.3对照品度的采挖、保护措施的缺乏,已导致甘草野生资源甘草酸:购于中国药品生物制品检

4、定所(批严重匮乏,大量使用和栽种人工甘草成为大势所号:l10731—200205),供含量测定用。趋。因此,作者对道地产区内蒙古杭锦旗的野生1.4试剂甘草G.uralensisFisch.及栽培品的HPLC指纹图乙腈为色谱纯,磷酸、甲酸、甲醇、氨水、四谱进行了对比研究,为进一步全面评价野生、栽培氢呋喃均为分析纯;水为纯净水。甘草中成分变化规律,指导甘草的人工栽培及合2方法理应用奠定基础。2.1色谱条件1仪器、药材、对照品与试剂Kromasil100一CI8色谱柱:250111/I1×4.6ⅡⅡn,51.1色谱仪t-an;流动相A:0.1%磷酸水(含少量四

5、氢呋喃),B:Agilent1100一高效液相色谱仪,DAD检测器,自乙腈。梯度洗脱条件及检测波长见表l。流速为0.8mL·min。。,进样量为l5止,柱温24℃,检测时动进样器,柱温箱,Agilent1100色谱工作站;岛津UV一120紫外分光光度计。间为60min。色谱图见图1,2。Table1Timetableforgradientofeluteanddetectionwavelength【收稿日期】2005.O¨6t(mil1)01016202260【基金项目】国家自然科学基金资助项目(30271074)B%10253270【通讯作者】闫永红,副

6、教授,Tel:010.84738625,F:010.(nm)27536o24884738611。E—trail:lxdyyh@yeah.netllfiClti,‘JNatMedMar.2006Vo1.4N0.2寸脚元然染均2006年3月第4卷第2期维普资讯http://www.cqvip.com份,连续进样5次,考察方法精密度;按供试品制备方法平行操作,制备5份,依次进样各1次,考A察方法重现性;用考察精密度的同一样品,分别在0,2,4,6,8,12,16,24,36,48h进样,(样品于窜温一lL..J.LI_⋯J一~^一一一放置),考察样品的稳定性。

7、,AJAlI.⋯.一一~,I^4Jh一一⋯一⋯方法学考察结果:于上述各指纹图谱中,计算一^l“.1L.~一—一一~iLp.1⋯一~~~共有峰中,单峰面积大于5%总峰面积的色谱峰保.一lJ}_¨lJ}lL一一一h‘.^-..】l留时间、峰面积,并计算相对标准偏差,结果方法OIO2030405060精密度(RSD分别为0~1.24%,0~0.76%,0~mln0.29%)、重现性(RSD分别为0.02~2.35%,0.01~1.35%,0~1.31%)和稳定性(RSD分别为0.01~1.85%,0~1.38%,0~0.65%)均符合指纹图谱技术要求l3l。3

8、不同甘草样品HPLC指纹图谱测定3.1野生及栽培甘草共有峰的标定3.1.1野生品

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