α、β、γ晶体蛋白在哺乳类动物角膜中的表达

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1、山东省医学科学院硕士学位论文α、β、γ-晶体蛋白在哺乳类动物角膜中的表达姓名：任胜卫申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：王宜强20100501课题一、Q、B、Y一晶体蛋白在哺乳类动物角膜中的表达Lensa一，13-，Y—crystallinsexpressioninmammaliancorneas课题二、小鼠角膜病变模型研究中实时荧光定量PCR最佳内参基因的筛选SelectionofHousekeepingGenesforUseInReverseTranscriptionQuantitativereal—timePCRAssaysontheMurineCornea本课题I扫973前期

2、研究专项(2007CB516705，2009CB526506)，国家自然科学基金(30973250)和山东省自然科学基金(JQ200908)资助山东省眼科研究所研究生：任胜卫导师：王宜强教授2010年5月山东青岛研究生导师和课题指导小组介绍姓名性别出生年月技术职务和职称从事专业王宜强男史伟云男宫华青男徐海峰女导师简介：1966．051959．041959．121964．11教授研究员主任医师眼科学基础眼科学mIillllllIlllllltlllllllllllllllllll＼1746568王宜强男，1966年出生，博士，研究员，“泰山学者”特聘教授(眼科学)，博士生导师。现兼任山东省

3、眼科学重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地常务副主任、山东省眼科研究所科教科主任。中华医学会眼科学分会免疫学组委员。自大学开始在基础医学领域的学习和研究，现主要研究方向为眼科生理和疾病相关的免疫学理论与应用基础。自2004年回国加入山东省眼科研究所以来，主持国家自然科学基金课题三项(完成一项，在研两项)、973前期研究专项一项(在研)、山东省自然科学杰出青年基金一项(在研)；参与863重点项目(第二位)、973前期研究专项(第六位)、山东省科技攻关计划(第三位)各一项。共计发表研究论文四十余篇。a、B、Y一晶体蛋白在哺乳类动物角膜中的表达．课题一a、13、Y一晶体蛋白在哺乳类动物角

4、膜中的表达专业眼科学研究生任胜卫导师王宜强教授摘要目的：角膜是如何维持其透明性的机制仍不清楚。角膜晶体蛋白(酶类晶体蛋白)在脊椎或无脊椎动物角膜中表达并在角膜的透明性中起重要作用。本实验重点研究3种经典晶状体晶体蛋白(非酶类晶体蛋白)，即Q、13、Y一晶体蛋白，是否参与小鼠和人类角膜的透明性。方法：利用Balb／c和C57BL／6小鼠，分别用缝线和化学烧伤诱导角膜新生血管模型，应用基因芯片和实时荧光定量PCR(RT—Q-PCR)技术检测相关基因的表达变化；在角膜或培养的角膜细胞中，应用RT—Q—PCR检测晶状体晶体蛋白和角膜晶体蛋白的mRNA表达水平，应用免疫组化(IHC)或蛋白质印迹法

5、检测他们的蛋白表达水平。结果：通过基因芯片或盯一Q—PCR技术检测到晶体蛋白基因在角膜或培养的角膜细胞中丰富表达，也可以通过IHC或蛋白质印迹法检测到QA、13、Y一晶体蛋白在角膜或培养的角膜细胞中表达。在缝线和化学烧伤诱导的新生血管模型中，晶状体晶体蛋白基因表达表现出时间和种属的依赖性改变模式，且与角膜晶体蛋白的改变不同。外源性氧化或炎性刺激如H：02和脂多糖能影响角膜细胞中晶状体晶体蛋白的表达。结论：a、13、Y一晶体蛋白在维持哺乳动物角膜透明性起重要作用。相关机制的进一步研究将有助于揭开角膜透明性的奥秘。关键词：角膜的发育；晶体蛋白；角膜透明性；屈光子；哺乳动物山东省医学科学院硕士

6、学位论文Lensa·，p-，Y-crystallinsexpressioninmammaliancorneasMajorophthalmologyM．D．candidateRenShengweiSupervisorProf．WangYiqiangAbstractPURPOSE．Howcornealtransparencyisformed／maintainedremainslargelyunclear．Agroupofenzymeswhicharereferredtoasenzymaticorcornealcrystallinswereproposedtocontributetocomea

7、ltransparencyininvertebratesandvertebrates．Thisstudyinvestigatedwhetherthethreeclassicallenscrystallins．namelya一，9-andy-crystallins，playanyroleinmouseandhumancomeas．METHODS．TwoinflammationcomealneoVascuIarization(CN、，)