细胞膜渗透性反应

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1、细胞生物学实验报告题目：细胞膜渗透性反应姓名：余振洋学号：200900140156系年级：09级生科3班时间：2011/3/17一、【实验目的】1、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。二、【实验材料】1、器材显微镜，离心机，离心管，试管，滴管，载玻片，盖玻片2、试剂0.85％NaCl溶液、0.0085％NaCl溶液、0.8mol/L甲醇、0.8mol/L丙三醇、6％葡萄糖溶液、2％TritonX-100三、【实验原理】将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，

2、引起溶血。由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不同。四、【操作步骤】1、取鸡血2-3ml，加0.85％NaCl溶液4ml，在1000r/min条件下离心5分钟，重复2~3次（RBC压积量应不少于0.3ml，否则应补加鸡血）2、将上述离心的红细胞按沉淀量配成50％浓度。（总体积量应不少于0.6ml）3、每组取6支试管，分别加入如下溶液各3ml○10.85％NaCl溶液○20.0085％NaCl溶液○30.32mol/L甲醇○40.32mol/L丙三醇○56％葡萄糖溶液○61.5％TritonX-1004、向上述6支试管中分别加入50％红细胞悬液1滴，轻轻混匀，观察各试管是否

3、有溶血现象发生（观察时间1小时）。记录溶血时间并于显微镜下观察各溶液中细胞。五、【试验结果及绘图】结果：表1不同低渗溶液下的溶血现象试管编号是否溶血时间结果分析该溶液浓度与鸡红细○10.85％NaCl溶液否胞内细胞液浓度相+1滴红细胞悬液当，为等渗溶液，不发生溶血该浓度溶液为低渗溶○20.0085％NaCl溶液是5min液，使细胞吸水胀裂+1滴红细胞悬液小分子、亲脂性的非○30.32mol/L甲醇极性分子甲醇为低渗+1滴红细胞悬液是46s溶液，容易溶解于脂双层，并迅速透过，提高红细胞的渗透压，促使水分进入细胞，引起溶血不带电荷、极性分子○40.32mol/L丙三醇的丙三醇溶液

4、为低渗+1滴红细胞悬液是31min溶液，但分子体积不够小，虽然能透过脂双层引起溶血，但时间较长葡萄糖虽然不带电○56％葡萄糖溶液荷，为极性分子，但+1滴红细胞悬液不完全溶血分子体积较大，可以跨膜扩散运输，但比较困难该试剂是一种表面活○61.5％TritonX-100性剂，可抽取膜质蛋+1滴红细胞悬液是50s白质，使细胞通透性增强，快速溶血，并使溶液变浑浊绘图：○1○2○3○4○5○6血细胞液和各试剂混合后外观变化（从左到右依次为1-6号试管）0.85％NaCl溶液内的血细胞（10x10）0.0085％NaCl溶液内血细胞（10x40）0.32mol/L甲醇溶液内血细胞（10x

5、40）0.32mol/L丙三醇溶液内血细胞（10x40）6％葡萄糖溶液内血细胞（10x40）由于技术原因，1.5％TritonX-100溶液内的血细胞无法观察到六、【结果分析与讨论】1、从1、2两个试管，即0.85％NaCl溶液和0.0085％NaCl溶液的实验结果可得，血细胞在低渗溶液中容易发生溶血。同时，因为两组实验所得时间差距极大，也可得出：细胞膜内外溶液浓度差越大，溶血越容易发生。2、在3号试管，即0.32mol/L甲醇溶液中，溶血时间极快，但在显微镜下并未观察到明显细胞体积变小且边缘出现褶皱的现象，经分析得：红细胞在甲醇溶液中溶血速度极快，必须在滴血立刻制片，否则血

6、细胞便会破碎，无法观察。同时也可以得出：亲脂性的、小分子的非极性分子极易穿过细胞膜。3、在5号试管，即6mol/L葡萄糖溶液中，几乎不发生溶血，得出：分子体积大的极性分子不易进入细胞。4、在6号试管，即TritionX-100溶液，为一种表面活性剂，可抽取膜质蛋白质，使细胞通透性增强，快速溶血，产生絮状沉淀，使溶液变浑浊。该反应也极快发生，必须在滴血立刻制片，否则血细胞便会破碎，无法观察。附：溶血结果的判断（1）不溶血：液体分2层，上层浅黄色透明，下层红色不透明，镜检红细胞完好。（2）不完全溶血：溶液混浊，上层变红色，镜检有部分红细胞破裂。（3）完全溶血：液体变红而且透明，镜

7、检发现细胞全成碎片。