低氧对大鼠睾丸部分生化指标影响

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1、低氧对大鼠睾丸部分生化指标影响【摘要】目的通过研究低氧对大鼠睾丸中部分生化指标的影响，探讨低氧对精子发生局部环境的影响。方法将成年雄性DA）含量的影响，来了解低氧对精子发生局部环境的影响。　　1材料与方法　　11材料　　111实验动物　　选用180～220?ggCl2·6H2O溶于100?ml185?mmol/LpH?825Tris-HCl中)。37?℃孵育10?min，加入05?ml25%（in离心10?min，上清在405?nm下比色。以每分钟转化1?μmol底物的酶量为一个单位。用Follin

2、-酚法定量睾丸组织匀浆液中总蛋白质，酶活性以U/mg睾丸匀浆液总蛋白表示。　　124睾丸果糖含量测定　　采用倍比稀释法制备标准品浓度梯度，320,160,80,40,20和10?μmol/L果糖标准品（2?g/L安息香酸配制）。各取样本、标准品、纯水10?ml，加入1?g/L间苯二酚溶液10?ml和10?mol/L盐酸溶液30?ml。90?℃水浴10?min。505?nm波长下比色。结果以μmol/mg睾丸匀浆液总蛋白表示。　　125低氧对大鼠睾丸丙二醛含量的影响〔7〕　　取100?μl睾丸匀浆

3、液，加入10%SDS05?ml，沉淀蛋白20?min；加入01?mol/LHCl125?ml，1%硫代巴比妥酸05?ml；100?℃沸水中煮40?min。流水冷却；加入175?ml正丁醇，振荡3～5?min；静置10?min，4000?r/min离心10?min；取上清，在535?nm下比色。结果以nmol/mg睾丸匀浆液总蛋白表示。　　13统计分析　　组间比较采用SPSS?100统计软件的One-wayANOVA程序进行单因素方差分析。　　2结果　　21低氧对大鼠睾丸组织LDH-C4/LDH

4、的影响(图1)　　低氧30?d组大鼠睾丸组织LDH-C4/LDH显著低于常氧对照组（P<005）。低氧5?d组和低氧15?d组睾丸组织LDH-C4/LDH，与常氧组相比较差异无统计学意义（P>005）。注：与常氧对照组比较，*P<005　　23低氧对大鼠睾丸组织果糖含量的影响(图3)　　低氧各组睾丸组织果糖含量，与常氧对照组相比差异无统计学意义（P>005）。　　24低氧对睾丸组织丙二醛生成的影响(图4)　　低氧5?d组、15?d组大鼠睾丸组织中丙二醛含量显著低于常氧对照组

5、（P<005）。低氧30?d组大鼠睾丸组织丙二醛含量非常显著地低于常氧对照组（P<001）。　　3讨论　　LDH-C4是睾丸组织和精子细胞的一种特异酶，与睾丸生精功能有关，也是精子能量代谢的一个关键酶〔8〕。文献报道多种生殖毒性物质均可引起LDH-C4相对活性降低〔9，10〕。LDH-C4抗血清对大鼠有生殖抑制作用〔4〕。低氧30?d该酶的相对活性显著下降,提示慢性低氧对睾丸生精有抑制作用。　　GGT对抗氧化剂谷胱甘肽（GSH）的生成很重要。研究发现抗生精复合物CDRI-84/35〔11〕和硫

6、酸镍〔12〕能引起大鼠、小鼠睾丸GGT活性升高。GGT活性升高的机制不清。本研究中低氧30?d组GGT活性显著升高的机制可能与此类似。自由基增多是男性不育的重要因素。本实验发现，低氧能抑制睾丸组织产生自由基。这可能与低氧时睾丸组织氧供减少有关。低氧时MDA降低，GGT活性不变或增高，说明低氧时睾丸生精功能的抑制作用与自由基的毒性作用无关。低氧是否抑制了活性氧自由基(ROS)介导的信号传导通路，由此抑制了精子的发生需要进一步研究。低氧时，果糖可通过磷酸化进入糖酵解途径。但本研究发现，低氧各组睾丸组织中果糖含量并

7、无显著变化。这可能是由于催化果糖酵解的限速酶己糖激酶在精子细胞中的活性显著低于其他糖酵解酶的活性。并且这些细胞的糖酵解主要是通过葡萄糖转化为乳酸盐，而不是转化为6-磷酸葡萄糖来完成〔13〕。【参考文献】　　〔1〕徐莉春，王沭沂，王心如.镉对大鼠睾丸毒作用的酶学研究［J］.中国公共卫生，2000，16（2）：119-120.　　〔2〕徐宏伟，马爱国.维生素A缺乏对大鼠生精能力及睾丸标志酶活性的影响［J］.中国公共卫生，2002，18（11）：1298-1299.　　〔3〕史小均，杜继增，熊忠.缺氧对雄性大鼠性腺

8、的影响［J］.中国病理生理杂志，1998，14（2）：137-140.　　〔4〕FahimMS,MessihaFS,GirgisSM.Effectofacuteandchronicsimulatedhighaltitudeonmalereproductionandtestosteronelevel［J］.ArchAndrol，1980，4(3):217-219.　　〔5〕丛玉隆,马骏龙,秦晓玲.当代