不同浓度有机碘对人甲状腺细胞增殖影响

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1、不同浓度有机碘对人甲状腺细胞增殖影响赵妍，蔺新英，郭冬梅，王淑娥，刘晓婷【关键词】有机碘(DIT);甲状腺细胞(TEC)；增殖　　摘要：目的研究不同浓度的有机碘(DIT)对体外培养的人甲状腺细胞(TEC)增殖情况的影响，并且和无机碘(KI）进行比较，以探讨一种更安全有效的补碘制剂。方法取甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织，应用原代细胞培养技术进行细胞培养，以不同浓度(10-8～10-3mol/L)的DIT和KI刺激单层培养的甲状腺细胞，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测定各组甲状腺细胞的增殖情况。结果低浓度的KI对人甲

2、状腺细胞生长没有影响，而中、高浓度的KI对细胞生长具有抑制作用，并且呈现剂量-时间依赖关系；与对照组相比，浓度越高,时间越长，抑制越明显。DIT组只有在高浓度才对甲状腺细胞出现抑制作用，并且DIT各剂量组与KI各剂量组在同一剂量水平进行两两比较发现，DIT对细胞的抑制作用明显轻于KI对细胞的抑制作用。结论高浓度的碘可以抑制甲状腺细胞的生长，DIT对细胞生长的抑制低于KI，即DIT对细胞的损伤较KI轻。　　关键词：有机碘(DIT);甲状腺细胞(TEC)；增殖　　EffectofDITonproliferation

3、ofhumanthyrocytesinvitro　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofDITontheproliferationofhumanthyrocytesandpareDITenttoUSIthatanthyroidepitheliumcellsfrompara-adenomanormaltissuesfromthyroidadenomapatientsol/LDITorKI.MTTmethodployedtoobtaintheproliferat

4、ionofculturedhumanthyrocytes.ResultsKIofmiddleandhighdosecaninhibithumanthyrocytestoproliferateandexhibitdose-effectandtime-effectrelationships.DITofonlyhighdosecaninhibithumanthyrocytesproliferate.InthesamedoseofDITandKI,theeffectofDITanthyrocytestoprolifer

5、ateandtheeffectofDITislessthanKI.DIThasmoresecuritythanKI.　　Keyin内送至细胞培养室进行细胞培养，甲状腺组织去除包膜及结缔组织后，D-Hanks液反复冲洗，并剪成1mm×1mm×1mm左右的碎块，03%的胶原酶在37℃水浴条件下消化100～150min，然后以025％的胰蛋白酶消化15min左右。200目不锈钢网筛过滤，离心后去上清液，用RPMI-1640培养液（含10％小牛血清，1mU/ml促甲状腺激素（TSH），100U/ml青霉素，100U/m

6、l链霉素）调整细胞浓度至2×105/ml，接种到培养瓶中。置于37℃培养3d，细胞贴壁后继续培养4d。隔日换液1次，以去除未贴壁的非甲状腺细胞。　　1．3四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）实验将甲状腺细胞传代培养于96孔培养板中，每孔200μl，置于37℃,5%CO2培养箱中培养24h后，弃原培养液，换成每孔100μl无血清培养液，继续培养24h，使各孔细胞同步化。然后弃去培养液，每孔加入200μl含不同浓度KI或DIT(10-8～10-3mol/L）的RPMI-1640培养液（含10％小牛血清），每一种浓度设6个细胞

7、孔，对照组加200μl不含碘的培养液，置37℃、5%CO2培养箱中静置培养。分别于24，48，72h后测定各孔的吸光度（A）值，测定波长为490nm。并计算增殖率　　增殖率（%）=实验组A值对照组A值×100%。　　14统计分析实验中的所有数据均采用±s表示，应用SPSS115统计软件对研究结果进行处理，组间均值比较采用方差分析，F值检验。　　2结果　　21不同浓度DIT和KI在24h后对甲状腺细胞生长的影响甲状腺细胞在加入不同碘制剂培养24h后显示，DIT10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组，差异有统计

8、学意义；与KI各剂量组在同一剂量水平进行两两比较，DIT10-7、10-5，10-4、10-3mol/L浓度组A值均高于同一浓度的KI组，差异有统计学意义；KI10-5、10-4、10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组，差异有统计学意义（图1）。　　22不同浓度DIT和KI在48h后对甲状腺细胞生长的影响培养48h后，DIT10-3mol/L浓度组A值低于正常对照组，差异有统计学意