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1、我国菲牛蛭的研究概况【摘要】综述了我国菲牛蛭的地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节、化学成分、生物活性成分、药理学作用、分离纯化以及菲水蛭素基因的克隆和序列测定。认为菲牛蛭可作为一种新的药用资源加以研究。【关键词】菲牛蛭化学成分药理学作用菲牛蛭Poecilobdellamanillensis，俗名金边蚂蟥，别名为马尼拉医蛭，隶属于环节动物门Annelida，蛭纲Hirudinea，无吻蛭目ArhynchobdellidaBlanchard，医蛭科HirudindaeS)分析,共分离出19个峰。与标准谱库对照分析,鉴定了16个组分,脂肪酸的相对含量采
2、用总离子流各色谱峰面积归一化法定量,结果见表1。实验共鉴定了菲牛蛭中脂肪酸的16个组分,占脂肪酸总量的97.39%,其中饱和脂肪酸占63.34%，不饱和脂肪酸占34.05%。饱和脂肪酸主要有硬脂酸、棕榈酸、肉豆蔻酸等;不饱和脂肪酸主要包括油酸、11-二十碳烯酸等。其中含量最多的是十六烷酸，达到23.78%，其次是9-十八碳烯酸,含量为12.53%；11-二十碳烯酸含量为11.75%。菲牛蛭中所含的单不饱和脂肪酸,如9-十八碳烯酸和11-二十碳烯酸的含量高于中药蚂蟥中的含量［6］。表1菲牛蛭中脂肪酸的组成及含量序号脂肪酸分子式(甲脂)相对含量(%)13-甲
3、基十三酸C15H30O21.022十四酸(肉豆蔻酸)C15H30O22.8834,8,12-三甲十三酸C17H34O27.434十四酸(异构体)C15H34O20.655十五酸C16H32O21.48614-甲基十五酸C17H34O21.279-十六烯酸C17H32O23.968十六酸(棕榈酸)C17H34O223.78915-甲基-十六酸C18H36O26.091014-甲基-十六酸C18H36O23.6511十七酸C18H36O22.78123，7，11，15-四甲基十六酸C21H42O21.77139-十八烯酸C19H36O212.53148-十八
4、烯酸C19H36O25.8115十八酸(硬脂酸)C19H38O210.611611-二十烯酸C21H40O211.752.2菲牛蛭中氨基酸的分析苗艳丽等［5］采用HPLC法，测定广西产菲牛蛭提取液中的氨基酸。并采用内标法进行含量测定,结果见表2。测定结果表明菲牛蛭中含有18种氨基酸，甘氨酸的含量最高为5392.70μg/g，其次是亮氨酸含量为2340.59μg/g。其中含有人体必需的7种氨基酸,这7种必需氨基酸含量为5536.28μg/g，占氨基酸总量的28.16%；高于其他水蛭（日本医蛭为22.50%，蚂蟥为21.40%）［7］中必需氨基酸的含量。表2
5、菲牛蛭中氨基酸的组成及含量μg·g-1氨基酸含量氨基酸含量△天门冬氨酸2142.24胱氨酸687.72谷氨酸205.65*缬氨酸512.65丝氨酸606.21*蛋氨酸213.35组氨酸398.94色氨酸320.26△甘氨酸5392.70*苯丙氨酸383.02*苏氨酸520.21*异亮氨酸1401.29△丙氨酸1478.56赖氨酸899.29△精氨酸1637.35△*亮氨酸2340.59*酪氨酸165.17脯氨酸353.74*为人体必需氨基酸；△：为含量较高的氨基酸3菲牛蛭的生物活性成分及其药理学作用3.1菲牛蛭素(Bufrudin)［8］菲牛蛭素是从菲牛
6、蛭分出的一种多肽,由60多个氨基酸组成,分子量7000D，序列分析表明,其中50%～60%的氨基酸残基与水蛭素相同。其立体结构和构型有待进一步研究。它的作用机理与水蛭素(Hirudin)、森林山蛭素(Haemadin)相同，都是抑制凝血酶［9］。黄爱民等［10］从广西产菲牛蛭消化液中分离出两种特异凝血酶抑制剂-菲牛蛭素A（BufrudinA,BDA）、菲牛蛭素B（BufrudinB,BDB）。BDA分子量约为15.2KD，等电点为3.97；BDB分子量为14.6KD，等电点为4.61。紫外扫描发现，BDA在230nm处有最大吸收，而BDB的最大吸收则在2
7、00～210nm之间。每1000ml水蛭消化液可以分离出菲牛蛭素A630μg,菲牛蛭素B615μg，收率菲牛蛭素A约为0.303％；菲牛蛭素B约为0.300%。3.1.1菲牛蛭及活性成分的抗凝血作用黄爱民等［11］用广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素（菲牛蛭素A和B）在体外及动物体内进行抗凝血实验，结果表明：菲牛蛭素A和B均能明显延长活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）及凝血酶时间（TT），但两者的3个指标有明显差异性，其中菲牛蛭素A对凝血酶时间（TT）的作用最显著，菲牛蛭素B则凝血酶原时间（PT）的作用更强。对于凝血因子，菲牛蛭素A对Ⅱ，
8、Ⅷ，Ⅻ因子产生抑制作用，对Ⅴ，Ⅸ，Ⅹ，Ⅺ因子无影响；菲牛蛭素B则对Ⅱ，Ⅷ，Ⅹ，Ⅻ
