重质原油和轻质原油对卤虫的毒理学研究

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1、重质原油和轻质原油对卤虫的毒理学研究重质原油和轻质原油对卤虫的毒理学研究溢油是指海上开采、运输、装卸及利用石油过程中发生的事故[1]，其对生态环境及人类生活造成了不良影响，常导致大量海鸟及鱼虾等生物死亡[2]，浮油被冲到海岸后，对滨海旅游区等造成污染、毁坏，若不及时清理，还容易导致爆炸和火灾，造成更为严重的后果[3]。发生溢油后，海面被油膜覆盖，氧气和二氧化碳等气体交换受到抑制，从而破坏了海洋中溶解气体循环平衡，破坏了光合作用的客观条件[4-5]。　　卤虫（Artemia）作为一种良好的试验动物材料，已经成为国家标准中检测污染物

2、急性毒性的受试生物[6]。该文重点关注重质原油和轻质原油水溶组分对卤虫的半数致死效应及生长毒性，并且探究了不同浓度原油溶液对卤虫卵孵化时间的影响，以期为溢油污染生物效应快速监测指标筛选和评估提供理论数据。　　1材料与方法　　1.1试验材料　　重质原油和轻质原油由国家海洋局溢油重点实验室提供，试验用海水取自青岛8号码头近岸60m深井，海水盐度为30‰～31‰，pH值为8.0～8.2。按原油与海水以1∶20（体积）的比例进行混合，240r/min搅拌2h，水浴超声4h，避光于烧杯中静置过夜，将其下层水溶性

3、组分作为母液。　　试验所用卤虫采用卤虫卵培养箱孵化，培养箱温度设定27.0±0.5℃，24h后挑选活动能力强的幼虫进行试验。卤虫的急性毒性试验卤虫来自本实验室培养。试验条件：水温25℃，盐度30‰～31‰，pH值8.0～8.2，自然光照。卤虫毒性试验中，使受试卤虫暴露于含不同浓度（由母液稀释）原油的水溶液，试验浓度分别设为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80mg/L，暴露时间96h，试验过程中及时记录受试生物的死亡率，采用数理统计方法确定半致死浓度，用96h-LC50表示。卤

4、虫孵化试验中，受试卤虫卵暴露于含不同浓度原油的水溶液中，试验浓度分别设为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80mg/L，试验过结束统计卤虫卵开始孵化孵化的时间。　　仪器：6L圆形玻璃缸；多功本文由.L.收集整理能均质器；ScientificIndustries生产的VortexGenie型涡旋混匀器；HITACHICT15RE型小型冷冻离心机；上海双捷实验设备有限公司DRHH-2型数显恒温水浴锅；TECANF200型全自动酶标仪；ACO-001型充氧泵（深圳市兴日生实业有限公司）。1.2试验方法　　重质原油和轻质原油对

5、卤虫的96h-LC50急性毒性试验参照《海洋石油勘探开发污染物生物毒性检验方法（GB/T18420.2-2009）》和化学品毒性测试的相关方法[7]，生长毒性试验采用梯度浓度暴露法测量卤虫卵开始孵化的时间。　　参照《GB/T12763.4-2007海洋调查规范第4部分：海水化学要素调查》方法对g/L，重质原油对卤虫的96h-LC50值为0.0934mg/L，由此可以看出轻质原油对卤虫的96h半致死毒性显著高于重质原油，这可能与轻质原油和重质原油的组分差异有关。　　重质原油和轻质原油暴露下卤虫卵开始孵化的时间见图2。可以看出，无论

6、是轻质原油或是重质原油暴露下，卤虫卵开始孵化的时间随着原油暴露浓度的增加而增加，且除0.1mg/L浓度下，其余各浓度条件下，轻质原油暴露下，卤虫开始孵化的时间均长于重质原油暴露组，较大程度抑制了卤虫卵的孵化，轻质原油和重质原油对卤虫卵的孵化抑制无显著差异（P>0.05）。　　3结论与讨论　　已有研究表明，暴露于石油的海洋动物呈现出活动能力下降，身体失去平衡，逐渐昏迷至死等症状[9]，如当卤虫暴露于原油WAF时，其身体严重萎缩，触角紧贴身体，上有絮状物附着，且泳动次数减少[10]。油类WAF通过影响海洋动物体内脂膜的流动性、

7、干扰体内生理生化系统的正常运转，造成活动能力降低及非极性麻醉昏迷[11]，并最终导致死亡。油类WAF大都具有较强的亲脂性[12]，而卤虫体内脂肪含量较高，通过摄食和体表途径，WAF中的许多有机化合物（特别是多环芳烃）容易在其体内蓄积[13]，产生不利影响。即使是在低浓度的油类WAF暴露下，卤虫也会出现异常：一方面，其摄食率降低、行为表现异常；另一方面，其耗氧量却增加。这就会使其体内糖类、蛋白质和脂肪含量及电子转移系统活力受到影响，能量收支失去平衡，进而导致其生长发育期异常、生长率和繁殖率降低[14]。　　不同浓度石油对卤虫的毒性

8、试验结果表明，卤虫对不同原油污染物的敏感性不同，轻质原油对卤虫的96h半致死毒性显著高于重质原油，这可能与轻质原油和重质原油的组分差异有关。可能主要是由于不同原油所含有机物种类不同造成的，轻质原油中所含的两环、三环芳烃（如萘、菲等化合物）浓度较高所致[15]。卤