icsi在常规体外受精失败后卵子再受精中的应用

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1、ICSI在常规体外受精失败后卵子再受精中的应用【摘要】目的探讨卵细胞浆内单精子注射（ICSI）技术在常规体外受精失败后卵子再受精中的有效性。方法在12个体外受精失败周期中应用ICSI对未受精的MⅡ期卵子进行再受精，将获得的优质胚胎冷冻保存，选择适当时机复温后移植，移植前均行胚胎辅助孵化。结果106个未受精的成熟卵子接受ICSI，注射后92个卵子存活。其中75个卵子正常受精，受精率为70.8%（75/106）；12个卵子出现三原核或单原核。69个正常受精卵发生分裂，卵裂率为92.0%（69/75）。最后获得

2、优质胚胎58个，冻融后共移植胚胎38个，其中1个周期的7个冻融胚胎均破碎而未移植，其余11个周期均有可供移植的胚胎。1例孕3月时流产，1例单胎临床妊娠分娩出正常婴儿，临床妊娠率为18.2%。结论ICSI使常规体外受精失败的卵子再受精，配合胚胎冻融及辅助孵化技术实现临床妊娠，具有一定的应用价值。【关键词】卵细胞浆内单精子注射受精体外妊娠［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetheapplicationofintracytoplasmicsperminjection(ICSI)inh

3、umanoocytereinseminationafterfailureofconventionalinvitrofertilization(IVF).MethodsReinseminationviaICSIbryosongalfertilizationonoploidic)oocytesbryosen.Oneembryofailedtobetransplanted,sevenembryosagedseriouslyduringtransplantation.Onepatientconceivedtica

4、lly.Thepregnancyrateinatetheoocytesfromthefailedfertilizationcyclesinvitro.Ithassomeefficacyofobtainingpregnancybryos.［KEYⅡ期卵子即为受精失败的卵子。立即按卵细胞浆内单精子注射的程序进行“再受精”补救。注射后的卵子转移至P1培养液中培养，20h后观察卵子受精情况。含有2个清晰可见的雌雄原核的卵子为正常受精卵，将其转移至含体积分数0.10血清的新鲜P1培养液中继续培养，24h后观察受精卵

5、分裂情况，优质胚胎进行冷冻保存。选取适当时机进行冻融胚胎移植。移植前均行透明带机械性切割以帮助胚胎孵出。移植后2周查血清βhCG，阳性表示生化妊娠。移植后7周B超检查妊娠囊数目及胎心搏动情况，判断是否为临床妊娠。2结果12对不孕夫妇共获取118个卵子，其中受精失败的MⅡ期卵子106个，MⅠ期卵子8个，GⅤ期卵子2个，退化卵子2个。对106个成熟的未受精卵均行卵母细胞内单精子注射，注射后存活卵子92个，存活率为86.8%。其中双原核卵子75个，三原核卵子9个，单原核卵子3个，无核卵子5个，正常受精率为70

6、.8%（75/106），异常受精率为11.3%（12/106）。69个正常受精卵发生分裂，卵裂率为92.0%（69/75），最后获得优质胚胎58个。胚胎冻融后可供移植的胚胎数目为38个，其中11个周期均有可供移植的胚胎，1个周期有7个冻融胚胎均破碎而未予移植。2例获得临床妊娠，其中1例孕3月时流产，1例为单胎临床妊娠足月分娩出正常婴儿，临床妊娠率为18.2%。3讨论自1978年英国诞生了世界上第一例试管婴儿以来，传统的体外受精胚胎移植术(IVFET)已经发展成为一种比较成熟的辅助生殖技术。严格掌握适应

7、证，可以获得较高的受精率，但是某些难以预料的因素时常使卵子遭遇部分或全部的受精失败。ICSI以较少的精子需求和较高的受精率成为辅助生殖技术发展史上的又一个里程碑[1]，适用于严重的少弱精病人，甚或能从睾丸或附睾获取精子的无精子症病人。近年来，已有卵细胞浆内单精子注射使体外受精失败的卵子再受精并获得临床妊娠的报道，但是卵子老化、透明带变性以及胚胎发育与子宫内膜的不同步等因素降低了卵子的再受精率和胚胎种植率。到目前为止，还没有一种比较好的方法能够直接检测出配子的受精能力。精液的常规检查只能对精子的质量进行初步

8、的评估。去透明带金黄地鼠卵穿透试验也仅能提供部分参考。较为理想的方法是人类配子的透明带结合实验，但是成熟的人卵母细胞较难获得，这种检测方法尚不能广泛开展。鉴于卵细胞浆内单精子注射具有较高的受精率，为避免体外受精失败，有学者提出将其作为一种常规手术方法来采用，尤其是对原发性不孕的病人。国内庄广伦教授认为，卵细胞浆内单精子注射是一种侵袭性手术，它对卵子遗传物质的改变具有不确定性。除非病人确实具有严重的少弱畸精等适应证，否则不能作为