紫杉醇诱导人子宫内膜癌细胞增殖凋亡的实验研究

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1、紫杉醇诱导人子宫内膜癌细胞增殖凋亡的实验研究作者：甘泉，辛晓燕，刘玉，王德堂，郭会玲【关键词】紫杉醇；子宫内膜肿瘤；,子宫内膜癌细胞珠；,增殖；,凋亡；,caspase　　Experimentalstudyonhumanendometrialadenocarcinomacellapoptosisinducedbytaxol　　【Abstract】AIM：Toinvestigatetheinhibitionofproliferationandinductionofapoptosisinvitroculturedhumanendometrialadenocarcinom

2、acell（HEC1B）bytaxol.METHODS：HumanendometrialadenocarcinomaHEC1Bcellsol／Ltaxolfor48h.Cellapoptosisicroscopyandintracellularcalciumfluorescencepixelvaluesoflivecellsicroscope.RESULTS:Throughtheblockageofcaspasepathetrialcarcinomacells.CONCLUSION:Taxolinhibitstheproliferationandinducesthe

3、apoptosisofhumanendometrialadenocarcinomaHEC1Bcells.　　【Keyetrialneoplasms;HEC1B;proliferation;apoptosis;caspase3　　【摘要】目的：探讨紫杉醇对体外培养的人子宫内膜癌细胞（HEC1B）凋亡的诱导作用.方法：体外培养的HEC1B细胞，用终浓度2，4，8，16，20nmol/L的紫杉醇作用48h后，荧光染色检测细胞凋亡的发生情况、caspase3及其抑制剂紫杉醇在诱导细胞凋亡中的作用.结果：共聚焦检测活细胞内钙离子的动态变化与Caspase3半胱氨酸蛋白酶中细胞

4、凋亡，使HEC1B细胞在活化过程中起了关键性的因素.结论：HEC1B对紫杉醇具有药物敏感性，紫杉醇对HEC1B细胞的杀伤作用，是通过诱导细胞凋亡途径实现的.　　【关键词】紫杉醇；子宫内膜肿瘤；子宫内膜癌细胞珠；增殖；凋亡；caspase3　　0引言　　子宫内膜癌（endometrialcancer，EC）是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，占女性生殖系统恶性肿瘤的20%~30%［1］.在治疗方面一直沿用传统的手术、手术加放疗或激素治疗.因此，疗效及治愈率无提高.化疗在恶性肿瘤的治疗中具有重要作用，在晚期肿瘤的治疗中尤为重要.近年来，EC的发病率有明显上升趋势［2］，为了

5、进一步提高子宫内膜的疗效，探索紫杉醇对子宫内膜癌在临床上的应用提供理论及实验依据.　　紫杉醇(taxol，paclitaxe1)是一种新的抗微管药物.紫杉醇作为抗癌药，对前列腺癌、乳腺癌等治疗已有广泛的应用.新辅助化疗对子宫内膜癌的疗效不断肯定［1］，肿瘤的发生及发展是细胞无限制过度增殖的过程，化疗对肿瘤的作用应包括杀伤肿瘤和抑制肿瘤细胞分裂，增殖及促进调亡两方面.本文探讨了新辅助化疗对HEC1B细胞调亡及增殖的影响，现报道如下.　　1材料和方法　　1.1材料　　1.1.1细胞株从美国AmericanTypeCultureCollection(ATCC)引进的HEC

6、1B细胞株购自中科院上海生命科学研究院细胞所.培养基：EMEM培养基（美国Gibco公司）；血清：胎牛血清（杭州四季清）.细胞培养：按照ATCC提供的培养传代方法［6］培养于含100mL/L胎牛血清、1.0mmol/L丙酮酸钠，1.0mmol/L非必需氨基酸和1.5g/L碳酸氢钠的EMEM培养液中，在37℃，50mL/LCO2培养箱中培养.　　1.1.2药物与试剂抗体①Taxol：北京四环医药科技股份有限公司产品;②caspase3多克隆抗体（SantaCruzBiotec，CAUSA）.　　1.1.3细胞培养用品EMEM培养基：美国Gibco公司产品.用时按说明用

7、三蒸水配制，并加入100mL/L非必需氨基酸和1.5g/L碳酸氢钠的EMEM培养液用0.22μm滤器除菌，4℃冰箱保存.胎牛血清：杭州四季青生物工程材料研究所生产.胰蛋白酶：美国Gibco公司产品.用无血清培养液配成2.5g/L浓度，0.22μm滤器除菌，4℃冰箱保存.40cm培养皿：中间有9mm小孔.Costar公司产品.(以上试剂均购于博微生物科技有限公司).　　1.2方法　1.2.1子宫内膜癌细胞株HEC1BGIBCOEMEM培养液中(含100mL/L胎牛血清、100μm/mL青霉素，100μm/mL链霉素，丙酮酸钠1.0mmol/L,非必需1.0mmol