高效液相色谱在食品分析领域的应用

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1、高效液相色谱在食品分析领域的应用摘要概述了HPLC在食品营养成分、食品添加剂、食品中有害成分的分析中的应用。关键词高效液相色谱食品分析高效液相色谱法是色谱分析法的一个分支，是在本世纪60年代末期，在经典液相色谱和气相色谱的基础上，发展起来的新型分离分析技术。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、食品分析、药物及临床分析。近年来，随着色谱技术的不断发展，各种工作站软件的开发，以及与质谱等仪器的联用，大大拓宽了HPLC的应用范围。目前很多新型专用的HPLC仪不断出现，如氨基酸分析仪、糖

2、分析仪、离子色谱仪等相继出现。我国在食品分析领域的应用始于70年代末，90年代后期国家标准中开始将HPLC法列为检测食品中的污染物、营养成分、添加剂、毒素、无机成分等的国标方法。1.食品中营养成分的分析1.1食品中碳水化合物的分析食物中的碳水化合物是人体必需的营养素之一，是人体热能的主要来源。化学法只能测总糖，气相色谱法虽可分别测定各种糖分，但样品需衍生化，操作麻烦。而HPLC法操作简便，灵敏度高，可同时测定各种糖。国际上已将HPLC法作为酒类糖份含量测定的仲裁。高新蕾【1】应用高效液相色谱对奶粉中的乳糖、蔗糖、葡萄糖进行快速测定，线性相关系数达0．999以上，回收率为1

3、00．2％～101．4％，相对标准偏差小于0．6％。。莫海涛等【2】采用高效液相色谱一激光蒸发光散射检测法测定低蔗糖食品中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖含量，结果表明，样品的加标平均回收率为92．9％～99．0％，相对标准差在1．9％～3．5％之间，检出限为4．5mg，L一6mg，L。1.2食品中维生素的分析维生素是人体内代谢过程中起重要作用的物质，人体所需维生素量很少，但却是构成生命活动不可缺少的营养物质。维生素种类很多，在化学结构上并无共性，它们可分为胺类(VB)，醛类(VB)或醇类(VA)。李克【3】等采用离子对反向高效液相色谱法同时测定了复合维生素片中烟酰胺、维生素B

4、，、维生素B、维生素B等4种水溶性维生素的含量。以HypersilC，化学键合硅胶为固定相，紫外检测器于280nm波长下检测。该方法已成功应用于复合维生素片中4种水溶性维生素的同时测定。成志强【4】等建立了以0．05mol／LKH，PO一甲醇为流动相的梯度洗脱反向高效液相色谱同时测定维生素c、B、B。、B、B．，、烟酸、烟酰胺和叶酸的分析方法。方法检出限为1．4—0．76ng，用该法测定了奶粉、玉米粉、饮料及复合维生素片中的水溶性维生素，相对标准偏差2．8—8．8％；加标回收率74．7—112．5％。1.3食品中氨基酸的分析氨基酸是食品中主要的营养成分。由几十到几千个氨基

5、酸分子借助肽键和二硫键相互连接形成了蛋白质，测定食品中的氨基酸组成无论对营养成分的分析，还是开发新的食品资源都很有意义。商振华【5】等采用反向高效液相色柱对常见的16种1一氟一2，4一二硝基苯(FDNB)衍生化氨基酸进行了有效的分离分析，用紫外吸收检测器和外标定量法对灵芝蛋白中各种氨基酸的含量进行了测定，回收率在96％-102％，相对标准偏差小于1％。1.4食品中脂肪酸的分析脂肪酸和丙三醇结合成脂肪，通过测定食品中脂肪酸的含量，可为食品加工、贮存及合理配比等提供必要的数据。段更利【6】等利用LC一6A高效液相色谱仪，配有化学发光检测器(不锈钢分析柱：150mmX4．6mm

6、I．D；顶柱：30mmX4．6mmI．D；柱填料均为ODS一80TM5ITI，日本岛津)，以适当的乙腈与水配比检测出脂肪酸，灵敏度极高，达到fmol级。张萍【7】等以60％0．2tool磷酸盐甲醇溶液为流动相，pH2．8的条件下，采用线性反相梯度洗脱，同时分离测定出甲酸、乳酸、乙酸、琥珀酸、丙酸、丁酸、戊酸等7种短链脂肪酸。2.食品中添加剂的分析食品添加剂是指为改善食品的品质和色香味以及防腐和加工工艺的需要而加入食品中的天然和化学合成物质，主要分为防腐剂、甜(香)味剂和天然或人工合成色素。食品添加剂对人体具有一定的毒性，尤其当过量使用时，会损害消费者的健康，因此在食品添加

7、剂的使用中，明确制定了卫生标准，限定了食品添加剂的种类、名称、应用范围、最大使用量和残留量。2.1防腐剂的分析食品中常常为了防腐、保鲜而加入一些化学合成的防腐剂，常用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐，山梨酸及其钾盐。徐宁【8】采用ODS色谱柱，流动相为甲醇和0．02mol／L乙酸铵混合溶液，流速1．0mL／min测定糕点类食品中的苯甲酸含量。测定结果的相对标准偏差<2．25％，苯甲酸检出限为0．50mg／L，回收率91．52％一103．20％。骆和东【9】等用HypersilODS色谱柱，流动相为0．02mol／LpH5．0乙酸铵甲醇