四种药物对斑马鱼急性毒性试验

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1、四种药物对斑马鱼急性毒性试验胡秀彩1，2，边延峰3，周捷1，吕爱军1（1.徐州师范大学生命科学学院，江苏徐州221116；2.江苏省药用植物生物技术重点实验室，江苏徐州221116；3.天津生机集团股份有限公司，天津300384）摘要：为探究消毒液和农药对斑马鱼的毒性与安全评价，首次选用高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死四种试剂进行急性毒性试验，以24~96h半致死浓度（LC50）判断斑马鱼对四种药物的敏感性。结果表明，24、48、72、96h的LC50，高锰酸钾分别为1.15、1.12、1.12、1.11mg/L；甲醛为48、45、45、40mg/

2、L；精碘分别为7.8×10-3、5.8×10-3、5.6×10-3、5.3×10-3mg/L；卡螨死分别为1.95×10-7、1.23×10-7、0.65×10-7、0.62×10-7mg/L。高锰酸钾、甲醛、精碘和卡螨死的安全质量浓度（SC）分别为1.07、11.8、0.96×10-3和1.48×10-6mg/L。参照我国化学物质对鱼类毒性分级标准，判定高锰酸钾对斑马鱼急性毒性为Ⅱ级，甲醛为Ⅲ级，精碘和卡螨死对斑马鱼急性毒性为Ⅰ级。关键词：斑马鱼；急性毒性；半致死浓度；安全质量浓度中图分类号：Q176文献标识码：A文章编号：1004-2091

3、（2012）01-0043-05斑马鱼（Brachydaniorerio）作为一种模式生物，除了具有经济、观赏价值外，目前已成为研究脊椎动物胚胎发育及对外界环境变化，如紫外线、重金属盐类、农药、消毒液、工业污水、放射性物质等对人类影响的良好研究材料，是一种极好的实验模式鱼[1]。高锰酸钾是一种外用消毒药物，通过强氧化性和吸附作用杀虫，也可以杀死细菌，常用于杀灭不形成孢囊的原虫、蠕虫、三代虫等，也可用于消毒、防腐、防治细菌性疾病[2]。甲醛是日益受到重视的环境污染物之一，在工业上主要用于制造塑料、树脂、橡胶等，在农林畜牧业、生物学和医药中普遍用作

4、消毒、防腐和熏蒸剂[3]。近年来，化学农药的大量施用对生态系统造成了严重影响。我国目前农药年产量达80万吨，居世界第2位，精碘和卡螨死是常用农药之一[4，5]。这些农药被大量施入土壤中，经过地表和地下径流会污染饮用水和地表水源水，导致饮水污染事故的发生，造成大量的经济损失，给人们的生产生活带来了不便。斑马鱼的急性毒性试验是一种较好的判断水毒性的方法，已被应用于废水和化学药品的毒性测试[6]。目前，国内关于鱼类急性毒性的实验研究，常以鲤、金鱼等作为实验对象[1-6]。斑马鱼急性毒性试验作为检测工业污染及水体污染的重要手段之一，还未广泛采用[7]。

5、本实验首次采用高锰酸钾、甲醛、农药精碘和卡螨死四种试剂对斑马鱼进行急性毒性试验，以便为水产养殖、鱼病防治等提供一定的科学参考。材料与方法11.1材料高锰酸钾（分析纯）购自徐州试剂总厂；甲醛购自徐州试剂二厂；精碘（有效成分5%）购自广西金穗农药有限公司；卡螨死（24.5%阿维柴）购自河南欣农化工有限公司。实验室配制高锰酸钾浓度为1.0g/L，甲醛120mg/L，精碘2.0×10-2mg/L，卡螨死储备液1.3×10-3mg/L，稀释至所需浓度，现用现配。斑马鱼购于徐州市某花鸟市场，斑马鱼平均体长2～3cm，平均体重0.15g，试验前在室内驯养5d

6、以上，自然死亡率小于0.5%，试验前1d停止喂食，试验期间也不喂食。1.2方法参照吕爱军等[7]实验方法进行。试验开始时连续观察8h，观察记录鱼的中毒情况（平衡、游动、呼吸、体色变化）以及24～96h的死亡情况及开始死亡时间及死亡数目。当鱼死亡时，立刻取出，观察并记录其体表特征和内脏表面特征。实验时间为96h，96h后若仍有存活鱼，继续实验至7d。资助项目：国家自然科学基金资助项目(30800847)；江苏省高校“青蓝工程”项目（2008）作者简介：胡秀彩（1976-），女，实验师，从事资源微生物学研究.E-mail:huxiucai126.c

7、om通讯作者：吕爱军，副教授.E-mail:lajand@126.com实验数据分析采用Bliss法计算斑马鱼的半致死浓度LC50，安全质量浓度用公式：SC=48hLC50×0.3（/24hLC50/48hLC50）2。无明显体色变化。卡螨死对斑马鱼急性毒性试验结果表明：卡螨死浓度为2.1×10-8mg/L时，就出现斑马鱼死亡；卡螨死浓度为3.2×10-7mg/L，1h内部分鱼出现S型扭曲游动，6h内鱼出现侧翻游动，高浓度组（6.4×10-7mg/L和8×10-7mg/L）出现鱼的死亡，6～12h是实验鱼集中死亡时段。卡螨死浓度为1.3×10-

8、8mg/L时，没有出现斑马鱼死亡。卡螨死中毒现象出现非常快，表现为呼吸急促，并上下反复窜游，后表现为呼吸异常，如鳃外翻，嘴大张，身体急剧扭曲成S型，并