基于液相色谱-串联质谱法分析茉莉酸与果梅休眠的关系.pdf

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1、江苏农业科学2015年第43卷第5期-——167．-——韩驰，仲文君，高志红，等．基于液相色谱一串联质谱法分析茉莉酸与果梅休眠的关系[J]．江苏农业科学，2015，43(5)：167—170doi：10．15889／j．issn．1002—1302．2015．05．055基于液相色谱一串联质谱法分析茉莉酸与果梅休眠的关系韩驰，仲文君，高志红，霍希美，李百健，庄维兵，倪照君(1．江苏省徐州市果树服务站，江苏徐州221009；2．南京农业大学园艺学院，江苏南京210095；3．南京傅家边科技园集团有限公司，江苏南京211221)摘要：建立了不同果梅(PrunusmumeSieb．etZucc)品种

2、4个休眠时期花芽的茉莉酸(jasmonicacid)含量的液相色谱一串联质谱(1iquidchromatography—tandemtriplequadrupolemassspectrometric，LC—MS／MS)测定方法。样品经过甲醇提取，AgelaCleanertSPE—NH：固相萃取小柱净化。色谱分离采用C。反相柱，以乙腈一水(水相含0．05％乙酸)为流动相梯度洗脱，质谱分析采用ESI离子源、二级串联质谱、负离子模式下进行检测。测定结果，方法标准曲线线性良好，茉莉酸r=0．9992，平均回收率范围为78．18％一97．49％，相对标准偏差(RSD，n=3)为1．25％一8．27％。该

3、方法操作简便，灵敏度高，选择性好，回收率高，适合果梅花芽中茉莉酸的测定。结果表明，被测2个品种的果梅花芽中，休眠解除和生态休眠时期的茉莉酸含量高于内休眠和抑制性休眠时期，推测内源激素茉莉酸可能有抑制果梅休眠和促进花芽正常生长的作用。本试验对进一步探讨果梅休眠与内源激素茉莉酸的关系打下了一定的基础。关键词：液相色谱一串联质谱；果梅；休眠；茉莉酸中图分类号：0657．63文献标志码：A文章编号：1002—1302(2015)05—0167—04季节性休眠包括抑制性休眠、内休眠和生态休眠3种类仪器分析手段，因其高灵敏性、高准确性、高选择性、分析检测型，其中内休眠又称为自然休眠⋯。果树在休眠过程中受到

4、范围宽、时间短以及定性定量方面的强大功能等特点，在分析环境因素尤其是光周期和温度的影响启动了一系列的生理生检测领域得到了广泛的应用。本研究通过液质联用方法化反应，涉及到植物激素、信号物质和多基因的表达和调来测定果梅不同休眠时期花芽内的茉莉酸含量，以期明确果控]。芽的休眠由内源激素控制，休眠的起始、终止均受激梅休眠与内源激素茉莉酸的关系。素调节，环境因素(外部信号)也通过影响激素(内部信号)的1材料与方法合成和运输来影响休眠进程而改变低温需求量。通常认为，休眠是由内源激素赤霉素、脱落酸、生长素和乙烯中的促1．1仪器与试剂进生长物质和抑制生长物质之间平衡状态决定。近期研究报安捷伦1260液相色谱一

5、G6530系列三级四级杆飞行时道植物休眠与生长过程中也相继发现了与茉莉酸代谢相关的间质谱联用仪、Eppendorf／Centrifuge5810R冷冻离心机、真空基因一。冷冻干燥机(中国北京博医康实验仪器有限公司生产)、氮吹茉莉酸类化合物在植物中具有多方面调节功能：(1)信仪(美国OrganomationAssociates公司生产)、高能量磨样号传导作用。如在植物创伤、胁迫、病虫害过程中，茉莉酸作仪等。为一种信号物质在植物体内传递生物或非生物胁迫的信号。二氢茉莉酸(dihydrojasmonicacid)购于TCI公司，茉莉酸(2)生理作用。如调节呼吸作用、花粉的发育、乙烯生物合购于Sigm

6、a公司，均为色谱级，产品纯度≥98％。甲醇、乙腈：成、果实的成熟、植物的光合作用和色素的形成、植物根系和色谱纯，德国Merck公司产品，二氯甲烷(色谱级)，乙酸(色植株的生长，以及植物次生代谢的调节等。(3)基因的调控谱级)，市售纯净水(娃哈哈)。作用。如茉莉酸生物合成和茉莉酸信号通路相关的AOS、1．2试验材料AOC、OPR3、JMT、LOX2，以及Zs、COH、MYC2等基因都可供试材料为果梅品种桃形梅、丰后，均采自南京农业大学能受茉莉酸的调控]。液质联用技术作为一种新型的现代国家果梅种质资源圃。桃形梅为低需冷量的果梅品种，而丰后为高需冷量品种。分别采取不同果梅品种4个休眠时期的花芽，即抑

7、制性休眠(A)、内休眠(B)、生态休眠(C)、休眠收稿日期：2014—06—05解除(D)4个时期。每个品种的花芽分别采于3棵对应品种基金项目：江苏省科技支撑计划(编号：BE2011458、BE2012361)；江的树上。采样日期的确定根据不同品种的需冷量和各自物候苏省自然科学基金(编号：BK2011642)；江苏省“青蓝工程”。特征决定。在叶片脱落之前，花芽处于抑制性休眠阶段；等待作者简介：韩驰