湖北麦冬茎尖离体培养技术研究论文

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1、湖北麦冬茎尖离体培养技术研究论文何家涛，赵劲松，别运清，瞿宏杰【关键词】湖北麦冬；,,,茎尖；,,,离体培养摘要：目的探讨湖北麦冬种质改良的途径。方法利用茎尖分生组织离体培养技术再生植株。结果茎尖外植体愈伤组织诱导，不定芽分化与增殖的适宜培养基为MS+BA(1.0~2.0)mg/L+IBA（0.1~0.3）mg/L;生根适宜培养基为1/2MS+NAA0.1或IBA0.1~0.3或IAA0.3。结论初步试验湖北麦冬茎尖再生植株生产性状优于当地品种。关键词：湖北麦冬；茎尖；离体培养TheTechnologica

2、lResearchoninvitroCulturefromStemTipofLiriopespicatavar.proliferaY.T.MaAbstract:ObjectiveToexploretheprovethegermplasmofLiriopespicatavar.proliferaY.T.Ma.MethodsMakeuseofstemtipmeristemtissueinvitroculturetechnologytoregenerateplant.ResultsThesuitablecultu

3、remediumofsteptipexplantcaclustissuesabductianandindefinitepuddifferentiationandmutiplicationisMS+BA1.0~2.0+IBA0.1~0.3,thesuitableculturemediumofradicationis1/2MS+NAA0.1orIBA0.1~0.3orIAA0.3.ConclusionExperimentshotip;Invitroculture湖北麦冬（Liriopespicatavar.pr

4、oliferaY.T.Ma）属百合科山麦冬属植物，为《中国药典》（1995年版）新增品种山麦冬的原植物。其块根与麦冬块根有相似的化学成分与药理活性［1］。湖北麦冬含多种甾皂苷。此外，还含有71%的单糖类和寡糖类，具有养阴生津、润肺补心、除烦安神等功效［2］。湖北襄樊市为湖北麦冬主产区.freelin，用自来水冲洗5~10min，除去表面污物，然后在超净台上用70%酒精浸泡20~30s，无菌水冲洗1次，再用0.1%HgCl2浸泡6~7min，最后用无菌水冲洗4~5次，1~2min/次，滤干水分以备接种。1.2

5、.2茎尖剥离在超净台上，将已表面灭菌的芽放在有无菌纸的培养皿中，在一台带光源的解剖镜下，一手用镊子将芽固定于视野中，一手用解剖针将幼叶与叶原基剥离，至出现裸露生长点，用锋利的长柄刀片将茎尖（0.2~0.3mm）切下，可带1~2叶原基或不带叶原基，然后及时用解剖针将切下的茎尖接种于分化培养基上。1.2.3培养基及培养条件以MS为基本培养基，附加两种不同浓度水平的外源激素6-BA（0.1,0.5,1.0,2.0,3.0）和IBA（0.05,0.1,.freelm小方块接种于愈伤分化率大于40%的两种激素不同水平

6、组合的培养基中进行不定芽分化与增殖培养。接种7~10d后，愈伤组织上绿色颗粒状物变为绿色芽点，芽点不断增大，培养35d后，统计增殖系数并考察不定芽生长情况（见表2）。表2两种激素不同水平组合对湖北麦冬不定芽分化与增殖系数及生长的影响（略）实验结果表明：从增殖系数、试管苗的质量等方面综全评判，适宜增殖的培养为MS+6-BA1.0~2.0+IBA0.1~0.3，增殖系数可达11.4~13.5。以MS+BA2.0+IBA0.1效果最佳。2.3不同激素种类与水平对不定根分化的影响将带3~4叶的不定芽切成单芽，接种于

7、诱导生根培养基中。每处理接种20瓶，每瓶接5株。培养5~7d，部分培养基上芽基部形成根源基突起，连续培养25d后，随机统计生根率与根的生长情况（见表3）。试验结果表明：在1/2MS中附加NAA0.1或IBA0.1~0.3或IAA0.3中，生根率可达96%以上，根生长健壮。表3不同激素种类与水平对湖北麦冬不定芽分化的影响激素种类与水平（略）2.4试管苗驯化与移栽将4~5叶生根试管苗根上的培养基洗净，用800~1000倍百菌清浸泡基部1~2min，植于珍珠岩∶蛭石∶腐叶土=1∶1∶1的基质中，移至苗室内，保持适

8、宜温、湿度，调节光照强度，其驯苗成活率可达97%以上。3小结湖北地道药材湖北麦冬在医药保健方面具广泛用途，年产量占全国麦冬总产量的50%以上。但在其主产区，湖北麦冬种质改良问题长期不受重视，造成其单产量与品质逐年呈下降趋势。利用茎尖离体培养技术再生植株，是对湖北麦冬进行提纯复壮、种质改良的有效途径，亦为进一步利用细胞工程、基因工程等生物技术对湖北麦冬种质改良奠定了基础。本实验研究结果表明：湖北麦冬以茎尖为外植体，