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1、T细胞对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响第26卷第8期20o6年8月南京医科大学(自然科学版)ACTAUNIVERSITATISMEDICINAUSNANJING(NaturalScience)?613?T细胞对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响董丽,刘超,刘翠萍,徐宽枫,茅晓东(南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏南京210029)[摘要]目的:观察T细胞对大鼠胰岛瘤细胞系RINm5f凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法:应用PI法检测T细胞与RINm5f共培养后RINm5f细胞的凋亡率;应用半定量Rrr_PCR技术检测培养后bc1.2,ba
2、x,p53和fasmRNA的表达.结果:PHA与T细胞均可致胰岛细胞的凋亡,且P,T具有协同效应,P或T或两者联合应用均呈时间依赖性地促进RINm5f细胞的凋亡;胰岛细胞凋亡过程中,P,T可协同致诱导凋亡基因bax,fasmRNA表达水平明显升高,而抗凋亡基因bc1.2及p53mRNA表达水平有下降趋势,但统计学无显着性差异.结论:T细胞可通过诱导胰岛细胞凋亡导致或加重胰岛移植排斥反应,其机制可能与凋亡基因与抗凋亡基因的表达比率变化有关,其中fas,bax诱导凋亡基因可能起主要作用.【关键词]RINm5f细胞;凋亡;凋亡基因[中图分类号]R5
3、87.1[文献标识码]A[文章编号]1007-4368(2006)08.061304EffectsofTcellontheapoptosisandexpressionofapop,.'osis-relatedgenesofRINm5fisletcellsDONGLi,LIUChao,LIUCui—ping,XUKuan—feng,MAOXiao—dong(DepartmentofEndocrinology,theFirstAffiliatedHospitalofNJMU,Nanjing210029,China)[Abstract]Object
4、ive:ToinvestigatetheeffectsofTcellontheapoptosisandexpressionofapoptosis?relatedgenesofRINm5fisletcells.Methods:ApoptoticcellswereidentifiedbyPImethod.ThemRNAlevelsofbcl一2,bax,p53andfaswereevaluatedbythemethodofsemi.quantitativeRT.PCR.Results:PHA,TcellsorPHAcombinedwithTcel
5、lscausedtime.dependentincreaseofapoptosisrate.Intheprocessofapoptosis,PHAcombinedwithTcellscouldinducesignificantincreaseofmRNAlevelofbaxandfas.Theexpressionofbcl一2andp53mRNAwasdecreasedwithnostatisticalsignificance.Conclusion:TheTcellmayinitiateandexacerbatetherejectionofi
6、slettransplantation.Thechangesoftheratioofinducibleapoptosistoanti—apoptosisgenesmayberele—vanttothemechanismsofapoptosisandfasandbaxgenesplayanimportantroleintheapoptosisprocess.[Keywords]RINm5fcell;apoptosis;apoptoticgene[ActaUnivMedNanjing,2006,26(8):613—616]自1997年Edmont
7、on方案…诞生以来,胰岛移植取得了可喜的成绩,但还存在许多问题.尤其在减轻免疫排斥反应反面,至今没有很好的解决方法.目前的研究主要着眼于开发免疫抑制药物,对于胰岛移植免疫排斥反应的细胞及分子机制研究涉足不深.本研究主要通过AnnextinV/PI双标法及PI法观察活化T细胞与胰岛细胞共培养后对RINm5f细胞凋亡的影响,同时利用半定量RT-PCR检测胰岛凋[基金项目]江苏省政府医学重点学科资助项目(2001—34)}通讯作者,E—mail:liuchao@nfmcn.tom亡相关基因bcl一2,bax,p53和fasmRNA的表达,探讨T细胞
8、引起胰岛细胞凋亡的机制,为治疗胰岛移植后发生的免疫排斥反应提供新思路.1材料与方法1.1材料清洁级SD雄性大鼠,体重150～200g,由南京医科大学动物中心提供.R
