金花茶组培快繁技术

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1、QQ交流:330861128金花茶的组培快繁技术QQ:330861128摘要:利用植物细胞的全能性,经组织培养技术,获取大批量的无菌幼苗。材料是用金花茶幼果,取其幼坯进行培养,获取较大的愈伤组织块,进一步诱导丛生芽,从而得到无菌的脱毒瓶苗,并继代,扩大繁殖,获取大量金花茶幼苗。关键词:细胞全能性组织培养脱毒无菌苗前言:金花茶是山茶属金花茶组植物,是世界珍贵、稀有的观赏植物和种质资源,并具有独特的药用价值。并被称为花卉中的“超级明星”、“茶族皇后”、及植物界的“大熊猫”。金花茶主要产于我国和越南。于20世纪60年代初在我国广西南

2、部首次发现。目前世界上已报道的23个分类群中,我国产21个,特有19个,有4个分类群被列为我国一级和二级保护植物,越南产4个,特有2个。金花茶为常绿灌木或小乔木,高约为2-5米,其枝条疏松,树皮淡灰色,叶深绿色,如皮革般厚实,狭长圆形,先端尾状渐尖或急尖。叶边缘微微向背面翻卷,有细细的硬质锯齿。金花茶组植物的垂直分布的高度,一般出现于海拔700米以下,以海拔200-500米之间的范围较常见,垂直分布的下限为海拔20米左右。金花茶组植物在分布区内除分布于碳酸盐岩发育成的各种岩溶地貌外,砂页岩、砾岩和花岗岩发育成的流水浸蚀的地貌也

3、有分布。金花茶的花为金黄色,耀眼夺目,仿佛涂着一层蜡,晶营而油润,似有半透明之感。金花茶的花单生于叶腋,花开时,有杯状、壶状或碗状,娇艳多姿,秀丽雅致;其果实为蒴果,内藏6至8粒种子,种皮黑褐色。金花茶4-5月叶芽开始萌发,11月份开始开花,花期可延续至翌年3月。金花茶还有较高的经济价值。其花除可做观赏外,尚可入药,可治便血和妇女月经过多,也可作食用染料;叶除泡茶作饮料外,也可药用,可治痢疾和用于外洗烂疮;其木材质地坚硬,结构致密,可雕刻精美的工艺品及其他器具。此外,其种子尚可榨油、食用或工业上用作润滑。同样还具有抗癌、降低胆

4、固醇与β脂蛋白的作用。基于以上金花茶的各种经济价值及其市场前景,利用现代的组织培养技术代替过去的扦插、嫁接和芽插栽培,可不受季节的约束而大量快速地繁殖。从而促进金花茶经济价值的更快开发,并服务于人类。1.生产工艺流程:培养基配制↓培养基→接种培养←外植体预处理←采取外植体↓单芽、丛生芽→继代培养→无根苗→生根苗→移栽定植↙↘QQ交流:330861128市场出售提取药用成份2.快繁技术要点2.1诱导培养基①MS+BA1。5+NAA1.0+IBA1.0+PVP1.0+VC1+LH500②MS+BA2.0+NAA1。5+IBA1。5

5、+PVP1+VC1+LH500继代培养基:MS+BA1。5~3+NAA1~1。5+IBA0。1~0。5生根培养基:1/2MS+BA0。1+NAA0。5+0.3%活性炭以上培养基糖的用量为4%,琼脂0.4~0.9%,PH6.0~6.42.2选材在天气晴朗的上午或午后采摘当年未成熟的幼果,幼果应无病虫、无畸形,果皮色泽正常。2.3外植体的预处理将采回的幼果,先用自来水冲洗,之后用洗衣粉洗,并用刷子轻刷外皮,将果皮柔毛刷掉,冲洗干净,置于超净台的瓶子内,用40倍的新洁尔灭溶液消毒4-6分钟,中间轻轻摇晃瓶子;再用0.1%的升汞消毒5

6、-8分钟,并轻轻摇晃瓶子,最后用无菌水冲洗4-5次即可。2.4接种用解剖刀将消毒好的幼果外皮削掉(每切一下换一把解剖刀),然后剥开种皮,最后露出完整的坯,切下整个坯或坯根或坯芽接到培养基上,每瓶一株,轻插于培养基表面,不易太深。2.5成苗的诱导开始3-4天给予暗培养,温度22℃左右,之后,移到光照强度为500-2000lax,温度为25℃的光照培养箱内培养,每天光照时长为12-14h。7天后,①开始有明显的生长迹象,15天后开始长出较为肥厚的畸形叶,根部有0.3㎝左右的愈伤组织;②在15天且开始长愈伤组织,并长出墨绿色的小叶子

7、。1个月之后①和②都长出较大的暗红色的愈伤组织;①长出的畸形叶更肥厚,有黄豆粒般大小,呈灰绿色,但生长绶慢;②中嫩芽已长有0.5㎝高。两个月之后,将①较接到②中进行培养,将畸形叶也切下,接入到②中,1个月后,畸形叶表面有红色颗粒形成,并渐渐增多转绿,开始分化出丛生。4个月之后,②中的金花茶已长到5-6个茎节,此时可进行继代培养。2.6继代培养将长出的芽从愈伤组织上切下,并切去叶片,接到继代到培养基上,每瓶一株。将愈伤组织的表面老化部分削去,重新接到新的②中继续诱导长芽。开始一个星期进行暗培养,温度在25℃,然后将温度调到28℃

8、,光照1500lax左右,约10天,在叶腋处长出腋芽来。40天瓶苗可长到5-6个茎节。2.7生根培养及炼苗、移栽将继代瓶苗接到生根培养基上,两个茎节一株,每瓶5株,半个月后在金花茶的根部长出明显的突起,此时可以进行炼苗。把瓶苗拿到走道的架上,3天之后打开瓶盖,并适当地喷上低浓

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