勿忘草的组培快繁技术

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1、勿忘草的组培快繁技术学生：张骏坤指导教师：杨保明黄玉玲摘要：以勿忘草为外植体进行组培快速繁殖，选用MS培养基为基本培养基，添加不同浓度的6-BA和NAA，接种后进行对比试验。选择出勿忘草组培的增殖培养基以及最佳生根培养基。关键词：勿忘草组织培养快速繁殖勿忘草，别名勿忘我，紫草科，勿忘草属，多年生草本；原产欧亚大陆，多年生草本植物，叶互生，狭倒披针形或条状倒披针形；喜阳，能耐阴，易自播繁殖。昆明市是一个气候宜人四季如春的城市，其气候对于花卉产业有着先天的优势，在经济的发展中花卉产业也在80年代末期随之崛起，在20年的过成中

2、已经发展到相当的水平，以有大规模的生产，创造了不小的经济价值，但生产技术上在世界处于落后的水平。在种苗的培植方式上多依赖于扦插、播种等方式。用这些方法育苗已经不能满足现今市场对勿忘草种苗的需求，随着组织培养技术的应用推广，组织培养种苗也进入市场，并有着较好的发展前景，组织培养可以得到无病毒的苗，并且繁殖速度快，可短时间内获得大量种苗。在此对勿忘草的繁殖技术进行实验研究，本实验通过对勿忘草的组培寻找对勿忘草的最佳培养基，培养得到大量的无菌组培苗。1材料与方法1.1试验材料已经培养分化出芽的无菌勿忘草组培苗，由云南省农业科学

3、院环境资源所组培室提供。1.2培养基配制采用MS培养基做为基本培养基，和附加不同浓度的蔗糖、6-BA、NAA、琼脂。待培养基煮沸后将PH调为5.8后注入容器中，封好盖后放入高压灭菌锅内灭菌20分钟。[1-3]继代培养基：蔗糖为30g/L,琼脂5g/L。(1)MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L;(2)MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.5mg/L;(3)MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.5mg/L;(4)MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.5mg/L;(5)MS+6-BA1.0mg/L+NAA

4、0.5mg/L。生根培养基：蔗糖为30g/L,琼脂5g/L。(6)MS+NAA0.2mg/L;(7)MS+NAA0.4mg/L;(8)MS+NAA0.6mg/L;(9)MS+NAA0.8mg/L;。1.3组培苗接种将准备的勿忘草瓶苗在洁净台内分单株，后接种于实验用的培养基。分苗时应将基部的老化组织切去，并且切单而不是丛芽，以免影响实验效果。1.2培养条件将接种了组培苗的培养瓶置于光照培养室内，室温25℃左右，高低幅度为±2℃。光照度为20000Lx（变化幅度我1000—5000Lx），每天光照时间为12小时，继代培养20

5、天后进行生根培养。[4]1.3观察记录在组织培养的不同时期观察记录苗的单丛率、发育情况、幼苗长势及生根情况。2结果与分析2.1不同培养基对苗的继代培养的影响勿忘草的重生直接影响着后期花的产量和品质，所以在做组培时不仅要考虑苗的长势，还要考虑它的单株率。继代培养中苗越单越有利于生根培养，生根培养出的苗才会单不重生，有利于提高花的产量和品质。由表1可以看出，5种不同配比的培养基下继代培养，幼苗的分化结果有很大不同。（1）处理的单株率最好，其次是（3）（4）处理的；从分化情况来看，（3）处理的分化情况比较好，增殖系数较高，其次

6、是（2）（4）处理的，（1）（3）处理分化较差。（1）处理的单株率之所以比较好是因为它分化的苗较少，从而显得比较单。综合苗的单株率、生长状况及幼苗的分化情况来看，（3）处理的培养基继代培养效果最好，分化出的苗较多，单株率及生长状况也较好。与其他的比较（1）（5）处理的结果不理想，分化的苗较少达不到增殖的效果。表1不同培养基处理下对苗的继代培养的影响处理编号培养基单株率生长状况幼苗的分化情况（1）MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L较好较好20天均分化1—2苗（2）MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.5m

7、g/L一般好20天均分化3—4苗（3）MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.5mg/L好好20天均分化4—6苗（4）MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.5mg/L好一般20天均分化3—4苗（5）MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L一般差20天均分化1—3苗2.2不同培养基对苗的生根培养的影响由表2可知，在4钟不同的生根培养基中生根效果有明显的差异性。处理（9）的生根效果最好，13天就有根生成20天均生根2-4条。随着培养基中NAA浓度的降低，生根效果逐渐变差，在培养基(6)MS+NAA0.2mg/L处

8、理中20天还不能生根或是已经不能生根。表2不同培养基处理下对苗的生根培养的影响处理编号　　　　培养基　生根效果（6）　　MS+NAA0.2mg/L20天无生根（7）　MS+NAA0.4mg/L20天均生根1-3条（8）　MS+NAA0.6mg/L20天均生根2-4条（9）　　MS+NAA0.8mg/L13天就有根生成