044保健食品中vc测定方法的标准操作规程(2,4二硝基苯肼比色法)

《044保健食品中vc测定方法的标准操作规程(2,4二硝基苯肼比色法)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、江苏吴中大自然生物工程有限责任公司管理标准----质量管理文件名称保健食品中Vc测定方法的标准操作规程（2，4二硝基苯肼比色法）编码SOP-QC-044页数3-3一、目的：制定保健食品中Vc测定方法的标准操作规程（2，4二硝基苯肼比色法），确保保健食品中Vc含量测定的科学化。二、适用范围：适用于保健食品中Vc含量的测定。三、责任者：保健食品中Vc含量测定者。四、规程：1、试剂1.14.5mol/L硫酸：谨慎地加入250mL硫酸（相对密度1.84）于700mL，水中，冷却后用水稀释至1000mL。1.285%硫酸

2、：谨慎地加入900mL硫酸（相对密度1.84）于100mL水中。1.32，4-二硝基苯肼溶液（20g/L）：溶解2g2，4-二硝基苯肼于100mL4.5mol/l硫酸中，过滤。不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。1.4草酸溶液（20g/L）：溶解20g草酸于700mL水中，稀释至1000mL。1.5草酸溶液（10g/L）：取500mL草酸（20g/L）稀释至1000mL。1.6硫脲溶液（10g/L）：溶解5g硫脲于500mL草酸溶液（10g/L）中1.7硫脲溶液（20g/L）：溶解10g硫脲于500mL草酸溶液

3、（10g/L）中1.81mol/L盐酸：取100mL盐酸，加入水中，并稀释至1200mL。1.9抗坏血酸标准溶液：称取100mg纯抗坏血酸溶解于100mL20g/L草酸溶液中，此溶液每毫升相当于1mg抗坏血酸。1.10活性炭：将100g活性炭加到750mL1mol/L盐酸中，回流1h～2h，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子为止，然后置于110℃烘箱中烘干。检验铁离子方法；利用普鲁士蓝反应。将20g/L亚铁氰化钾与1%盐酸等量混合，将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。2、仪器2.1恒温箱：37℃±0.

4、5℃2.2可见-紫外分光光度计2.3捣碎机3、样品的制备（全部实验过程应避光）3.1称2g～5g样品放入乳钵内，加入10g/L草酸溶液磨成匀浆，倒入100mL江苏吴中大自然生物工程有限责任公司管理标准----质量管理文件名称保健食品中Vc测定方法的标准操作规程（2，4二硝基苯肼比色法）编码SOP-QC-044页数3-3容量瓶内，用10g/L草酸溶液稀释至刻度，混匀。3.2将样品液加入10%钨酸钠数滴至底面有沉淀，过滤，离心，备用。4、氧化处理取25mL上清滤液，加入2g活性炭，振摇1min过滤，弃去最初数毫升滤

5、液。取10mL此氧化提取液，加入10mL20g/L硫脲溶液，混匀，此试样为稀释液5、呈色反应5.1取三个试管，各加入4mL氧化处理稀释液。一个试管作为空白，在其余每支试管中加入1.0mL20g/L2，4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入37℃±0.5℃水浴中，保温3h。5.23h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷却到室温，然后加入1.0mL20g/L2，4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10min～15min后放入冰水内。其余试管同试样。6、85%硫酸处理当试管放入冰水后，向每一试管中加入

6、5mL85%硫酸，滴加时间至少需要1min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。7、标准曲线的绘制7.1加2g活性炭于50mL标准溶液中，振荡1min，过滤。7.2取10mL滤液放入500mL容量瓶中，加5.0g硫脲，用10g/L草酸溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度20μg/mL。7.3取5，10，20，25，40，50，60mL稀释液，分别放入7个100mL容量瓶中，用10g/L硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1，2，4，5，8，10，12μg/mL。8、比色用

7、1cm比色杯，以空白液调零点，于500nm波长测吸光值。9、结果计算X——试样中总抗坏血酸含量，单位为毫克每百克（mg/100g）c——由标准曲线查得或回归方程算得“试样氧化液”中总抗坏血酸浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）V——试样用10g/L草酸溶液定容的体积，单位为毫升（mL）江苏吴中大自然生物工程有限责任公司管理标准----质量管理文件名称保健食品中Vc测定方法的标准操作规程（2，4二硝基苯肼比色法）编码SOP-QC-044页数3-3F——试样氧化处理中的稀释倍数m——试样的质量，单位为克（g）计算结

8、果表示到小数点后两位