资源描述：
《hcv患者外周血单个核细胞蛋白质表达质谱分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、HCV患者外周血单个核细胞蛋白质表达质谱分析作者：储春丽,邓小昭*,张云,董莉莉,王忠灿,喻荣彬,吴超【摘要】 目的:应用比较蛋白质组学的方法分析丙型肝炎患者外周血单个核细胞蛋白质表达模式的变化及寻找丙型肝炎相关生物标记分子,进一步识别鉴定其差异表达蛋白质,分析其对丙型肝炎慢性化机制的意义。方法:应用固相化pH梯度双向凝胶电泳(2-DE)分离健康者(10)及HCV患者(28)PBMC的总蛋白质,凝胶银染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获
2、得差异蛋白点的肽质指纹图谱,通过SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果:得到两张2-DE图谱,HCV患者及健康者PBMC凝胶的蛋白质点数分别为625及614;初步筛选出HCV患者与健康者存在明显差异的12个蛋白点,经质谱分析,初步鉴定了10种蛋白质。这些差异蛋白质包括病毒蛋白、蛋白质合成与分解、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号转导相关蛋白质。结论:应用2-DE及MALDI-TOF-MS方法建立了HCV患者PBMC双向凝胶电泳图谱,分离并初步鉴定了10种与HCV感染相关的差异表达的蛋白质,为研究HCV慢性化相关机制提供新的线
3、索。【关键词】丙型肝炎病毒蛋白质组学PBMC2-DEMALDI-TOF-MS10 ［Abstract］AIM:Toinvestigatethediversityofproteins’patternoftheperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)inpatientswithhepatitisCvirus(HCV)infection,identifythedifferentiallyexpressedproteinsandanalyzetheirrolesinthemechanismofchronich
4、epatitisC.METHODS:ThetotalproteinsfromPBMCsinHCVinfectedpatients(28)andhealthypersons(10)wereseparatedbytheimmobilizedpHgradient-based2-DE.ThedifferentiallyexpressedproteinswerescreenedbyPDQuestanalysissoftware,andthenidentifiedbypeptidemassfingerprint(PMF)basedonmatrix-a
5、ssistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry(MALDI-TOF-MS)anddatabasesearching.RESULTS:2-DEresultsshowedthatthemeannumberofproteinspotsinHCVinfectedpatientsandhealthypersonswas625and614.TwelvedifferentialproteinsweretestedbyMALDI-TOF-MS,and10ofthemwereide
6、ntified.Someoftheproteinsparticipatedinproteinsynthesisanddegradation,signaltransduction,metabolism,orcytoskeletonconstructionwhilesomeofthemwereproteinsofvirus.CONCLUSION:2-DEpatternofPBMCsfromHCVinfectedpatientsorhealthypersonshasbeenestablishedandtendifferentiallyexpre
7、ssedproteinshasbeencharacterized.OurstudyishelpfulforclinicaldetectionofHCVinfectionand10furtherresearchintothemechanismsofchronichepatitisC. ［Keywords］HCV;proteomic;PBMC;2-DE;MALDI-TOF-MS 丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）感染所引起的丙型肝炎呈全球分布。据WHO估计,目前全世界约有1.8亿HCV感染者,且呈增长趋势。HCV感染所
8、致的丙型肝炎慢性化率高达75%~85%,可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌,对人类的健康和生命构成严重威胁［1］。丙型肝炎慢性化的机制目前还不清楚,研究表明丙型
