ho-1 mrna在肺腺癌中的表达

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1、HO-1mRNA在肺腺癌中的表达作者：戚振云鲍文华刘跃忠刘岩刘伟时【关键词】肺腺癌　　【摘要】目的探讨HO-1在肺腺癌组织中的表达状况。方法采用反转录－多聚酶链式反应（RT-PCR）方法检测27例单纯肺腺癌组及10例正常对照组织（距癌组织大约10cm）中HO-1mRNA表达水平。结果37例标本均进入半定量结果分析。肺癌组mRNA表达量（0.84±0.03），正常对照组HO-1mRNA表达量为（0.39±0.02），两组有显著性差异（P＜0.05）。结论HO-1在肺腺癌中明显的高表达，为防治肺癌提供新思路。　　【关键词】肺腺癌;

2、血红素氧合酶-1;逆转录-多聚酶链式反应　　HO-1mRNAexpressioninpulmonaryadenocarcinoma　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionofHO-1mRNAinpulmonaryadenocarcinoma.MethodsReversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR)wasusedtodetectHO-1mRNAexpressioninspecimensfrom27pulmonary

3、7adenocarcinomaand10normaltissuesaroundthepulmonaryadenocarcinomaawayabout10cm.ResultsAllthe37specimenswereinvolvedintheanalysisofhalfquantityresults.TherelativecontentsofHO-1mRNAwas(0.84±0.03)and(0.39±0.02)in27pulmonaryadenocarcinomaand10normaltissuesaroundthecance

4、r.Significantdifferenceexistedbetweenthetwogroups.（P＜0.05）.ConclusionHO-1mRNAexpressioncontentwassignificantlyhigh.　　【Keywords】pulmonaryadenocarcinoma；hemeoxygenase-1；RT-PCR　　血红素氧合酶(hemeoxygenase,HO)是一种血红素降解的催化酶和限速酶，可将血红素分解成一氧化碳(carbonmonoxide,CO)、胆红素和铁。已发现HO有3种同工酶［

5、1］，分别为HO-1、HO-2及HO-3。HO-1在呼吸系统疾病中已有广泛研究，而在肺腺癌实体中HO-1表达情况尚未有文献报道。为探讨HO-1在人肺癌组织中的表达状况，我们采用RT-PCR方法检测27例肺腺癌及正常组织中HO-1mRNA的表达情况，结果报告如下。　　1资料与方法7　　1．1病理资料肺腺癌组：选择2004~2005年黑龙江省佳木斯市肿瘤结核医院肺癌手术标本，组织学诊断采用1981年WHO肺癌组织学分类标准。正常对照组：为肺腺癌手术患者中余10例无其他基础性疾病，在远离癌组织约10cm取肺组织。均为手术切除后立即取

6、材，液氮冷冻。　　1.2引物序列及合成HO-1引物依照文献［2］设计的序列，由北京奥科生物技术有限责任公司合成，引物序列如下:上游引物：5’-CGGGCCAGCAACAAAGTG-3’；下游引物：5’-AGTGTAAGGACCCATCGGAGAA-3’，扩增片段长度为107bp。β-actin内参照引物，由北京奥科生物技术有限责任公司合成，上游引物：5’-TCCTCCCTGGAGAAGAGCTA-3’，下游引物：5’-TCAGGAGGAGCAATGATCTTG-3’，扩增的目的片段长度为302bp。　　1.3组织总RNA的抽提

7、试剂合购自宝生物（大连）公司。取100mg冷冻保存的组织标本，在液氮内研磨，取90mg加入已装好1mlTrizol的EP管中，剧烈振荡，静置5min，用1ml针筒抽吸2次。加入200μl氯仿，用力摇晃15s，静置2~3min，12000r/min4℃离心15min，将上清移入另一EP管中，加入500μl异丙醇，静置10min，12000r/min4℃离心10min，弃上清，加入75％乙醇1ml洗RNA2次，7500r/min4℃离心5min，干燥RNA，加无RNA酶的水30μl在60℃7孵育10min，琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA

8、质量，紫外分光光用紫外/可见光分光光度计检测A260、A280，确定RNA纯度及浓度。所有实验中的塑料制品都经1%DEPC处理后高压灭菌。　　1．4逆转录－多聚酶链式反应（RT-PCR）取1μg总RNA进行逆转录反应，逆转录产物取5μl进行PCR。使用50μl反应体系同时扩增