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1、铁皮石斛组培与种植铁皮石斛(DendrobiumcandidumWall.exLindl.)为兰科多年生草本，属附生兰类。明代李时珍的《本草纲目》中记载：石斛除痹下气、补内脏虚劳赢瘦，强阴益精。久服，厚肠胃，补内绝不足。来胃气，长肌肉，益智除惊，轻身延年。道教医学经典《道藏》中，铁皮石斛名列中华..“九大仙草”之首。我国野生的铁皮石斛资源主要分布在皖、浙、云、贵、川等地高山峻岭的悬崖峭壁和岩石缝隙中。由于铁皮石斛生长条件的特殊性和分布的局限性，又经长期采挖，自然资源濒临枯竭，国内市场供应紧缺，国
2、际市场每千克干品价已达10000美元以上。1987年国务院将铁皮石斛列为重点保护的中药材之一。而植培快繁技术是解决植物优良无性系用苗的良好途径，所以，对这一珍贵植物资源，我们决定用组织培养技术来进行快繁。繁殖材料(云南铁皮石斛瓶栽苗，云南枫斗生物科技有限责任公司购得。)以铁皮石斛(DemdrobiumcardidumWall.exLindl)无菌幼苗茎段为外植体,分别研究了不同基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛原球茎、不定芽诱导、增殖和生根的影响.结果表明,在不定芽诱导和增殖中,4
3、种基本培养基中以B5的效果最好.而芽增殖率则以B5基本培养基中添加011mg/L6-BA的效果最好;在3种天然附加物中,以添加椰子汁对芽的增殖效果最好;原球茎的增殖以110mg/L的NAA效果最佳,诱导生根则以110mg/L的NAA效果最明显.（周俊辉,钟雪锋,蔡丁稳，恺农业技术学院园艺园林系,广东广州510225）试剂处理：在基本培养基中分别添加NAA015mg/L、6-BA015mg/L、蔗糖20g/L,调pH至5.18.在超净工作台上,将铁皮石斛试管苗切成1～2cm的茎段,在以上培养基上接
4、种进行芽诱导.每组各接种25瓶,随机抽取其中20瓶进行生长性状观测.培养时间均为1个月,培养温度(25±1)℃,光照强度1500～20001x,每天光照12h。在生产上,建议采用B5作基本培养基附加6-BA011mg/L、NAA015mg/L和椰子汁15010mg/L用于铁皮石斛不定芽的诱导增殖,附加NAA110mg/L和椰子汁15010mg/L用于原球茎的增殖,附加BA011mg/L和NAA110mg/L用于诱导生根为最适宜。处数据有待详查，感觉网上的资料不够准确。将铁皮石斛茎段诱导出的无菌苗
5、依苗的高度分切成2～3节,2个假鳞茎为一节,切除过长的根系,留约1cm长的根,从根茎处将根、茎分开,茎以下称为根蔸,以上为茎段。上述切段外植体分为带顶芽的茎段、茎段和根蔸。原球茎诱导培养基:①MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.2mg/L;②MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L;③MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.2mg/L;④MS＋6-BA4.0mg/L＋NAA0.2mg/L;⑤MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA1.0mg/L;⑥MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0
6、.5mg/L;⑦MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA1.0mg/L。生根培养基:①1/2MS＋NAA0.5mg/L;②1/2MS＋NAA1.0mg/L;③1/2MS＋NAA2.0mg/L;④1/2MS＋IBA0.5mg/L;⑤1/2MS＋IBA1.0mg/L;⑥1/2MS＋IBA2.0mg/L;⑦1/2MS＋NAA2.0mg/L＋香蕉50g/L。无菌苗移栽在适宜假植的季节(气温15～30℃)。将生根苗移到室外,作好遮阴,避免太阳直射,14d后打开瓶盖炼苗,直至培养基表面有轻度污染,小心取出生根苗
7、,洗净根部培养基,再用多菌灵或甲基托布津1000倍液浸泡根部10min,自然通风晾干至根系发白,移栽于已消毒的水苔或碎树皮为基质的小钵中,50%～70%遮阴,保持80%的湿度,细心管理,成活率能达90%以上。铁皮石斛的原球茎启动相对较难,而原球茎的增殖和分化容易,少量添加植物激素,可获得大量的分化苗,生产健壮的试管苗是移栽成活的关键。在充足的营养条件下,温度对铁皮石斛组培全过程至关重要,较高的温度利于增殖,较低的温度利于壮苗、生根。除培养基外,温度的调控是能够培养出优质无菌苗的关键。铁皮石斛的分
8、生能力极强,壮苗培养是整个组培过程的难点,也是人工栽培成功与否的关键所在,还需作进一步研究。苗长到6～9cm长，根系较发达之后，就可以进行移栽了，移栽前还要经过炼苗阶段，因为组培室的环境是人为控制的，温度、湿度、光照、供其生长的培养基成分都是设定好了的，如果直接移栽，由于生长环境突然的改变，会导致其不能适应外界环境，造成生长缓慢、成活率不高等后果，这就要求，在移栽前要进行炼苗，待其适应了外界的环境再进行移栽。将组培瓶苗放在温室大棚内，自然光条件下一周左右，待苗的颜色转为翠绿色后，即可移栽，移栽时
