铁皮石斛组培快繁技术的优化

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1、；密级：分类号学校代号：１０５３８学号：巧０１２００１５２＠寺劣為ＨＭＨ《卡、ＩＣｅｎｔｒａｌＳｏｕ化ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＦｏｒｅｓｔｒ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｙｙｇｙ硕±专业学位论文铁皮石解组培快繁技术的化化作者姓為；陈尔导师姓省：李铁华王华新培养学院：林学院类别：（领域）若称农业推广硕壬（林业）研究方向：林业提交日期：２０１５年５月ＴｈｅＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆ也ｅＴｉｓｓｕｅＣｕｌ

2、ｔｕｒｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍＣａｎｄｉｄｕｍｂｙＣＨＥＮＥｒＡｔｈｅｓｉｓｓｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎａｒｔｉａｌｆｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅｐＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＳｃｉｅｎｃｅＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒＰｒｏｆｅｓｓｏｒＬＩＴｉｅｈｕａａｎｄＳｅｎｉｏｒＥｎｇｉｎｅｅｒＷＡＮＧＨｕａｘｉｎＣｅｎｔｒａｌＳｏｕ出ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＦｏｒｅｓｔ

3、ｒａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｙｙ４９８ＳｈａｏｓｈａｎＳｏｕｔｈ民ｏａｄＴｉａｎｘｉｎＤｉｓｔｒｉｃｔ，ＣｈａｎｇｓｈａＨｕｎａｎ＂０００４，Ｐ．民．ＣＨＩＮＡＭａ２０１５ｙ，中斋妹朵种我夫＃学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材

4、料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：年ｒ月日牛斋妹皮對技夫緣学位论文版枚使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件或电子版。，允许论文被查阅或借阅本人授权中南林业科技大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可［＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。乂学仿论专属

5、干．１、保密□，在年解密后适用本授权书。＿＿２、不保密＂＂您在Ｗ上相应方框打Ｖ）作者签名；和导师签名减牛乂＾聋—知ｒ年１月日＾〇：年女月２｝＾＼摘要铁皮石解（公ｅｎ办ｏＷｗｆＪｃａ／？成减ｗＫｉｍｕｒａｅｔＭｉｇｏ）又名黑节草、铁皮兰，为兰科石解属多年生附生型草本植物。其药用价值独特，是石解属中的极品。目前通过组织培养技术已成功获组培苗，但是组培快繁过程中仍存在许多问题：组培苗易黄化、易产生变异、移栽成活率不高等。本研究Ｗ铁皮石餅的成熟果实和茎

6、段为材料，，采用正交试验设计对其姐培快繁技术进行优化，Ｗ期为铁皮石鮮的组织培养巧规模化生产提供理论参考和技术支持。主要研究结果如下：－（１）种胚萌发最适培养藍ＭＳ或ｌ／２ＭＳ＋６ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋挪汁１００ｍｌ／Ｌ＋活性炭１．０ｇ／Ｌ＋白糖２５ｇ／Ｌ＋琼脂４．６ｇ／Ｌ，植物生长调节剂与天然有机物挪汁的添加能缩短铁皮石解种胚的萌动时间。（２）外值体最优灭菌方法：经预处理的铁皮石解茎段在流动的自来水下冲〇洗３０ｍｉｎ，用八％酒精浸泡３０ｓ，再用

7、１０／〇ＮａＣｌＯ８ｍｉｎ＋０．１％ＨｇＣｌ２５ｍｉｎ＋０．２％ＨｇＣｌ２２ｍｉｎ综合灭菌，经该组合处理的外植体在培养３０ｄ后仍未发现有污染。ＭＳ＋ＮＡＡ０－（３）腺芽诱导最优培养基：．５ｍｇ／Ｌ＋６ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋白糖２５ｇ／Ｌ＋琼脂４．６／Ｌ８５％。ｇ，茎段诱导率达（４）化生芽诱导最优培养基：－．５ｍ／Ｌ＋６ＢＡｌｍ＋ＫＴ＋２＋，此培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０ｇ．０ｇ／Ｌ２．０ｍｇ／Ｌ白糖５ｇ／Ｌ琼脂４．６ｇ／Ｌ诱导的丛生芽数量最多，叶色浓绿、植株健壮，且新芽的

8、变异率居中。－（５）増殖最优培养基：ｌ／２ＭＳ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋６ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ＋活性炭０＋±豆汁＋白糖２５＋琼．．３、．５ｇ／Ｌ５％ｇ／Ｌ脂４６ｇ／Ｌ，增殖系数达８，原球茎生长紧凑绿色、且无变异和褐化现象。（６）＋－＋ＫＴ＋±豆汁＋分化最优培养基：Ｎ６６ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ１．０ｍｇ／Ｌ１００ｇ／Ｌ活性＋＋炭０．５ｇ／Ｌ白糖２５ｇ／Ｌ琼脂４．６ｇ／Ｌ，分化率达８７．７％，不定芽数量多、健壮度和整齐度均匀、叶绿。－（７