P16蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义.doc

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1、P16蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义摘要目的:探讨P16蛋白在食管鳞状细胞癌发生、发展和转移的相关性。方法:采用SP免疫组织化学方法,检测食管鳞癌90例,淋巴结转移癌49例中P16蛋白的表达。结果:P16在高分化鳞癌组阳性表达率(52.6%)显著高于低分化鳞癌组(25.0%),(P<0.05);有淋巴结转移组原发癌(21.9%)和无淋巴结转移组原发癌(60.4%)比较,具有显著性差异(P<0.05)。结论:P16基因蛋白对食管癌的转移可能有抑制作用,检测P16蛋白对食管癌淋巴结转移预测及预后

2、评估具有一定意义。  关键词食管鳞状细胞癌;免疫组织化学;P16蛋白食管癌是我国最常见恶性肿瘤之一,对食管癌转移分子调控机制的研究,已成为食管癌研究领域的关键问题。为了探讨P16蛋白在食管鳞状细胞癌发生、发展过程中的变化及其与临床病理特征的关系,本实验采用灵敏的SP免疫组织化学方法,初步探讨了P16在食管癌的发生、发展、转移及判断预后的意义。  1材料和方法  1.1材料  收集2004年~2005年长治医学院附属和平医院食管鳞状细胞癌新鲜组织标本90例,所有患者术前均未经放疗或化疗。经病理证实高分化鳞癌3

3、8例,中分化40例,低分化12例;其中侵及粘膜下肌层和浅肌层者35例,侵及深肌层及外膜者55例。伴淋巴结转移者32例,其中转移淋巴结49枚,无淋巴结转移者58例。男性患者61例,女性29例,年龄40岁~76岁,平均年龄60.2岁。  1.2方法  采用SP法,P16单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色剂由福建迈新生物技术有限公司提供。DAB显色,苏木素复染。用PBS代替一抗作阴性对照,以已知阳性切片作阳性对照。  1.3免疫组化染色结果判定  P16阳性物质位于细胞核内,呈棕黄色颗粒,每张切片连续观察10个高

4、倍视野,阳性细胞数超过10%定为染色阳性病例(+),否则,定为阴性病例(-)。  1.4统计学处理  采用χ2检验,对各组资料进行统计学分析。  2结果3    90例食管鳞状细胞癌组织中P16蛋白阳性表达42例,总阳性率为46.7%。P16蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系见表1。结果表明P16蛋白在食管低分化鳞癌中表达较低,在中―高分化鳞癌中高表达,两者与前者比较有显著性差异(P<0.05),而P16蛋白表达与癌组织的浸润深度无关。有转移组原发癌P16表达的阳性率为21.9%,无转移的原发癌阳性

5、表达为60.4%,两者有显著性差异,在90例食管癌中,有42例阳性表达,但在49枚转移淋巴结中,P16蛋白仅有9枚阳性表达,两者统计学上有显著性差异(P<0.05)。表1P16蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系(略)  3讨论  P16蛋白属于细胞周期依赖性激酶抑制剂(cyclindependentkinaseinhibitors,CDKI)中重要成分,它是细胞周期监控、驱动机制中最主要的调控蛋白,对细胞周期具有显著的抑制作用[1],检测P16蛋白有助于人们对食管癌生物学行为及预后的认识。  P16

6、基因定位于人类染色体9p21,全长8.5kb,含3个外显子和1个内含子。P16是G1-S期限速步骤中重要的调节组件[2]。有文献报道,在宫颈癌及其癌前病变中存在P16基因的丢失,提示P16失活参与宫颈癌的发生,并可能发生在宫颈癌的早期阶段[3]。目前已发现,在人类许多种肿瘤细胞系和原发肿瘤中均有P16基因及其产物的改变[4,5]。  本研究表明P16蛋白表达在食管鳞状细胞癌中阳性率为46.7%。P16蛋白在高分化鳞癌中的阳性率为52.6%,显著高于低分化组的25.0%,提示P16蛋白表达缺失与食管癌分化不良

7、有关,检测P16可作为判断肿瘤分化程度的一个参考指标。本资料还显示,有淋巴结转移组的P16蛋白阳性率(21.9%),明显低于无淋巴结转移组(60.4%),两组比较具有显著性差异(P<0.05),提示P16的低表达对食管癌的演进及最终使癌细胞获得转移的潜能具有重要作用。P16在食管原发癌中阳性率为46.7%,而在淋巴结的转移癌中其阳性表达率为18.3%,转移癌中阳性病例在其相应的原发癌中P16同样为阳性,二者比较有显著性差异(P<0.05),结果表明,P16在原发癌和转移癌中失活机制可能不尽相同,

8、转移癌为食管癌的晚期事件,故失活率较高。P16的高表达有可能抑制食管癌淋巴结转移,提示检测P16对于食管癌转移预测及预后评估有一定作用。  参考文献  [1]夏加增,尹浩然,朱正纲.P27蛋白分子生物学及其与消化系肿瘤的关系[J].国外医学消化系疾病分册,2000,20(2):107~110.  [2]SerranoM,HannonGJ,BeachD,etal.Anewregulatorymotifincycle

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