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1、毕业论文食管鳞状细胞癌中PINCH蛋白的表达及意义2014年6月25日食管鳞状细胞癌中PINCH蛋白的表达及意义作者：朱振龙，杨艳红，张饪，王政民，崔冬牛，张金廷王铭维,孙晓峰，AnnRearden【摘要】H的探讨PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌小的表达及其临床病理意义°方法采用免疫组化ABC法检测10例正常食管粘膜组织和64例食管鳞状细胞癌组织屮PINCH蛋白的表达，并分析其临床意义。结果PINCH蛋白在鳞癌组织相关间质屮呈异质性表达，其阳性率为56.25%(36/64),明显高于正常食管粘膜组织(0/10)(P<0.05),差异有显著性，而且在肿瘤浸润边缘阳性更明显。PINCH蛋白表达与患
2、者性别、年龄及鳞癌组织学分级无相关性；淋巴结转移组的鳞癌组织中PINCH蛋白阳性表达率为90%(18/20),未转移组鳞癌病例中阳性率为40.91%(18/44),二者相比差异有显著性(PV0.05)。结论PTNCH蛋白在食管鳞癌屮异常表达，可能利于肿瘤的浸润和转移。提示PINCH蛋白可作一个刖
3、瘤相关间质的标志物來预测肿瘤浸润和淋巴结转移的能力。在肿瘤的预后判断上有重要意义，并可能成为与肿瘤间质相关的抗肿瘤治疗的一个新靶点。【关键词】PINCH蛋白；鳞癌；食管；免疫组织化学ExpressionandSignificanceofPINCHProteininEsophagusSquamousC
4、ellCarcinomaKeywords:PINCHprotein;Squamouscellcarcinoma;Esophagus;Immunohistochemistry在信号传导屮，接头蛋白通过蛋白相互反应结构域而发挥作用，其屮一•个重要的结构域是一种双锌指结构，该结构是LIM(Lin11,Isl1andMec3Proteins)家族的特征[1,2]cPINCH(Particularyinterestingnewcysteinehistidinerichprotein,PINCH)蛋白是新近发现的LIM家族的一个成员，它在整合素和牛长因子信号的传导屮起着十分重要的接头联结作用，与肿瘤的发
5、牛、发展有一定的关系［3］。Jessica等［4］应用免疫印迹法和免疫组化法对PINCH蛋口在肺癌、前列腺癌、乳腺癌、大肠癌及皮肤癌屮的表达进行了观察研究，发现其与肿瘤的侵袭和转移有关。笔者采用免疫组化ABC法对食管鳞癌组织小PINCH的表达进行检测，并初步探讨其临床病理意义。1材料与方法1.1材料收集河北医科大学第一医院病理科2000年4月〜2004年5月间各项临床资料较完整的食管鳞癌手术切除病例64例，其小伴有淋巴结转移者20例。以上标本均经病理证实为食管鳞状细胞癌。同吋随机选取手术切除标本断端的正常食管粘膜组织10例作为对照。1.2临床资料64例食管鳞癌患者,年龄41〜78岁，平均59
6、.5岁；男50例，女14例。依据WHO鳞癌组织学诊断标准进行组织学分级，高、屮、低分化各20、39、5例。1.3试剂与方法石蜡包埋组织作5pm连续切片，常规HE染色和免疫组织化学ABC法染色。所用兔抗人PINCH蛋白多克隆抗体由Prof.AnnRearden惠赠(DepartmentofPathology,UniversityofCalifornia,U.S.A.),二抗、三抗购自福州迈新牛物技术开发有限公司。免疫组织化学主要染色过程：①切片脱蜡水化；②3%H2O2甲醇灭活内源性过氧化物酶；③依次滴加一抗、二抗和三抗；④DAB显色；⑤苏木精复染；⑥常规脱水，透明、封片。用已知阳性的乳腺癌组织
7、作为阳性对照。1.4染色结果判断以纽织间质屮纤维母细胞样细胞的胞膜及胞质出现棕黄色颗粒为阳性细胞。每例随机选出10个不重复、不重叠的高倍镜视野(10x40),计数阳性细胞数及所有细胞数，计算阳性细胞率匹阳性细胞数/E细胞数xioo%o根据阳性细胞率进行分级，PINCH(),阳性细胞率＜20%；PINCH(+),阳性细胞率20%〜50%；PINCH(++),阳性细胞率＞50%°1.5统计学分析用％2检验进行统计学处理,P<0.05为差异有显著意义。2结果2.1PINCH蛋白在正常食管粘膜纽织屮的表达在10例正常食管粘膜组织屮，除1例在上皮层下1/3有灶性阳性表达外，见图1,其余所有被检组织，无
8、论是上皮、还是间质，均无阳性表达。且这1例的阳性表达部位主要在基底层细胞连接处和棘细胞层下1/3的细胞间连接处特别在棘细胞层细胞连接处表达明显，见图2。2.2PINCH蛋白在食管鳞癌组织小的表达在64例被检癌组织小，有36例PINCH蛋白在肿瘤间质屮阳性表达，见图3。此外，尚发现有少量癌细胞的胞质及胞膜上有PINCH阳性表达，强度较弱，见图4。高倍镜下，阳性表达部位在癌细胞间的细胞间桥上，见图5。在36例间质
