肉碱对鱼类营养代谢的调控机制研究

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1、2018届研究生博士学位论文分类号:学校代码:10269密级:学号:52131300008论文题目:肉碱对鱼类营养代谢的调控机制研究院系:生命科学学院专业:动物学研究方向:水生动物营养代谢生理指导教师:杜震宇教授学位申请人:李加敏2018年4月2018届研究生博士学位论文分类号:学校代码:10269密级:学号:52131300008EastChinaNormalUniversity博士学位论文DOCTORALDISSERTATION论文题目:肉碱对鱼类营养代谢的调控机制研究姓名:李加敏学号:52131300008学

2、院:生命科学学院专业:动物学方向:水生动物营养代谢生理导师:杜震宇教授2018年4月EastChinaNormalUniversity(10269)Dissertationfordoctoraldegreeof2018EastChinaNormalUniversityTHEREGULATIONOFCARNITINNEINFISHNUTRIONALMETABOLSIMName:JiaminLiStudentIDNO:52131300008Department:LifeSciencesMajor:ZoologyRese

3、archarea:AquacultureNutritionSupervisor:Prof.ZhenyuDuApril,2018李加敏博士学位论文答辩委员会成员名单姓名职称单位备注李家乐教授上海海洋大学主席周歧存教授宁波大学庄平研究员东海水产研究所杨嘉龙研究员华东师范大学陈立侨教授华东师范大学中文摘要中文摘要水产养殖中高脂饲料的应用可起到蛋白节约效应,但高脂饲料也会带来鱼类脂肪的严重沉积,进而影响鱼类生长和健康,因此寻找有效的降脂因子以降低高脂饲料的危害受到鱼类营养学家的重视。哺乳动物的已有研究表明,肉碱通过提升线粒

4、体β-氧化能力,促进脂肪分解。肉碱在鱼类营养研究和养殖实践的应用表明,肉碱在众多鱼类中起到促进生长、降低体脂,甚至节约蛋白的作用。然而在不同鱼类中,肉碱作用效果不同,甚至在一些鱼类中增加了组织脂肪的沉积。由于肉碱降脂的机制不清晰,使得人们不能准确理解肉碱作用的这种矛盾性和复杂性。此外,在生产实践中,肉碱以L-肉碱和D-肉碱两种形式存在,而两者之间在鱼类营养代谢中的功能差异并不十分明确,也使得对不同构型肉碱的选择缺乏确凿的科学依据。以上这些问题的存在,严重限制了肉碱在鱼类养殖中的进一步应用。因此系统地研究肉碱在鱼类营

5、养代谢中的调控机制,为鱼类养殖中添加肉碱以实现降脂和节约蛋白的效果提供必要的理论依据。为此本文通过对斑马鱼饲喂含L-肉碱和肉碱合成抑制剂的饲料,构建高肉碱和低肉碱斑马鱼模型,以研究L-肉碱在鱼类营养代谢中的调控机制;之后,又构建了低肉碱罗非鱼模型,并以此为基础研究不同构型肉碱在鱼类营养代谢中调控功能的差异。1.高肉碱对斑马鱼营养代谢调控的研究本论文首先在斑马鱼中进行L-肉碱调控功能的研究。配制含L-肉碱(500mg/kgBW),且脂肪水平为7%的饲料,饲喂斑马鱼6周以构建高肉碱鱼类模型,然后再分别饱食和饥饿处理一周

6、,通过检测生理生化和分子指标,以系统地研究L-肉碱对鱼类营养代谢的调控作用。对肝脏和肌肉组织中肉碱的含量的检测发现,在两种营养状态下,L-肉碱添加组中肝脏和肌肉的游离型肉碱和总肉碱含量都有明显增加;在两种营养状态下,L-肉碱添加组全鱼总脂无明显变化,14但肝脏和肌肉中的甘油三酯含量明显降低。C标记的棕榈酸测定的结果显示,在两种营养状态下,肝脏和肌肉中线粒体的β-氧化能力得到提升,同时QPCRI中文摘要结果显示肝脏和肌肉中cpt1的转录表达显著上调,脂质合成基因(acc、fas、dgat2)的转录表达受到抑制,而过氧

7、化物酶体的β-氧化能力和关键基因-acox3的表达无变化。本实验检测了糖代谢的相关指标以研究肉碱对糖代谢的调控作用,结果发现,在饥饿状态下,肉碱添加组的全鱼糖原含量显著增加,而两种营养状态下,其肝脏糖异生相关基因的表达和肌肉中糖酵解相关基因的表达分别得到显著的增加和降低。对蛋白代谢相关指标的检测发现,饱食状态下,肉碱添加组的全鱼蛋白含量显著增加,肝脏mtor基因的表达显著上调。本实验同时检测了炎症因子的基因表达,结果显示在饱食和饥饿状态下,肉碱添加组肌肉中促炎因子(tnf-α)和抑炎因子(tgf-β1)的基因表达分

8、别受到抑制和增强。以上实验结果表明,饲料中添加合适的L-肉碱可增加鱼类组织中肉碱含量,进而通过增强线粒体的β-氧化能力以降低体脂,也能够抑制机体对糖的利用,还可通过调控mtor信号通路增加蛋白合成,起到节约蛋白的效应;同时添加L-肉碱也有减少炎症发生的可能。总之,L-肉碱在鱼类营养代谢中发挥着综合性的调控作用。2.低肉碱对斑马鱼营养代谢调控的研究由于肉碱作用

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