桂花叶枯病病原菌生物学特性研究

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1、桂花叶枯病病原菌生物学特性研究摘要由木樨生叶点霉引起的桂花叶枯病是桂花上普遍发生,且为害较为严重的病害之一。对病原菌进行了生物学物性研究,研究结果表明,病原菌菌丝在PDA、MA和0A等3种培养基上均能生长,在PDA和MA上生长相差不大,在0A上生长相对缓慢;菌丝生长适宜pH值为4.0〜7.0,最适pH值为6.0;生长适温为24〜30°C,最适温度为26°C,黑暗有利于病原菌的生长。关键词桂花叶枯病;木樨生叶点霉;生物学特性中图分类号S436.8文献标识码A文章编号1007-5739(2016)11-0153-02桂花,木犀科、木犀属,是常绿灌木至小乔木

2、,为我国传统十大名花之一。因其具有较高的观赏、药用和食用价值,因此桂花是一个生态效益、社会效益和经济效益都较高的园林树种[1]。目前,在合肥地区,桂花是广泛种植的绿化树种。对合肥市肥东县各地苗、公园、小区及行道路桂花病害调查表明,本县桂花主要病害为枯叶病、褐斑病及冠瘿病,其中最严重的是枯叶病。据笔者调查,该病主要发生在新栽植1〜3年桂花叶片上,主要表现症状为病斑往往发生在叶尖或叶缘,初为褪绿淡褐色小点,渐向内扩张后为形或是向里扩大呈不规则块状大斑,灰褐色至红褐色,病斑上散生许多黑色小点粒状物,并常常导致叶片脱落。查阅国内对桂花叶枯病的研究报道,其病原主

3、要为大茎点霉属(Macrophoma)和链格孢属(Altemaria)等属真菌[2-6],而在肥东地区桂花枯叶病的病原经鉴定为木樨生叶点霉(PhyllostictaosmamthicolaTrian.)[7]本文对桂花叶枯病进行病原菌分离纯化,并对病原菌进行了生物学特性研宄,以期为桂花叶枯病的综合防治提供理论依据。1材料与方法1.1供试菌株2015年1月对采至于合肥市肥东县张集苗圃的桂花叶枯病病叶进行显微鉴定,确定其病原为木樨生叶点霉,属半知菌亚门腔孢纲球壳孢目球壳孢科叶点霉属P]。采用组织分离法对病原菌进行了分离培养,获得纯菌株[8]。生物学特性研究

4、所采用方法主要参考方仲达(1998)等[3,5,8-10]o1.2营养对菌落生长的影响将供试菌株菌种在25°C的恒温培养箱中培养5d,于菌落国缘打取直径4mm菌丝块接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、燕麦芽汁琼脂培养基(MA)、麦片琼脂培养基(0A)平板上,置光照培养箱中,25°C恒温培养,每个处理设3次重复。采用十字交叉法每天测量不同培养基上的菌落直径。1.3pH值对菌落生长的影响用0.1mol/LHC1和0.1mol/LNaOH溶液将经高温灭菌后的PDA培养基的pH值分别调至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0,直径4

5、mm菌丝块接种于不同pH值的培养基上,后置于25°C恒温培养,共8个处理,每个处理3次重复,每天测量各菌落直径。1.4温度对菌落生长的影响将直径4mm菌丝块接种到PDA平板上,分别置于5、10、15、20、24、25、26、28、30、35°C下恒温培养,共10个处理,每个处理3次重复,每天测量落直径。1.5光照对菌落生长的影响将直径4mm菌丝块接种到PDA培养基上,分别在室内漫射光/黑暗自然交替、全光照、全黑暗下,25°C恒温培养。每个处理3次重复,每天测量各菌落直径。2结果与分析桂花叶枯病病原菌在不同培养基、pH值、温度、光照处理条件下培养时,其菌

6、落特征几乎一致,菌落生长速度较快,初期,菌落圆形,菌丝为白色,絮状或葺状;后期,菌丝呈灰黑色。2.1营养对菌落径向生长的影响桂花枯叶病病原菌在3种培养基上均能生长。病原菌初期在PDA上生长速度稍慢于MA,但培养3d后,两者生长速度相差不大;但在OA培养基上的落生长速度较慢。2.2pH值对菌落生长的影响培养基的酸碱度大小对菌落生长影响较大,由2可知,在pH值为3〜8时,菌落均可生长,其生长适宜pH值为5〜7,生长的最适pH值为6。在pH值为6时,培养5d时,菌落直径可达89.3mm,病原菌生长喜偏酸环境。在pH值为2和pH值为9时,桂花叶枯病病原菌菌落几

7、乎不生长。2.3温度对菌落生长的影响落生由图3可知,温度对桂花叶枯病病病原长的影响较大;低于5°C和超过35°C时,菌丝几乎停止生长,而在5°(3与35°C时,菌丝生长缓慢;该菌生长的温度范围为5〜35°C,适宜温度为24〜30°C之间,最适温度为25°C。2.4光照条件对菌落生长的影响表1为不同光照条件下菌落生长直径。由表1可知,全黑暗处理在25°C培养5d时,菌落直径达89.0mm,比全光照和自然漫射光/黑暗交替处理的菌落生长速度快,说明光照不利于桂花叶枯病病原菌生长。3结论与讨论通过对采集到的桂花病叶进行室内分离纯化和鉴定,确定目前在合肥市肥东县

8、导致桂花叶枯病的病原菌是木樨生叶点霉(PhyllostictaosmamthicolaTria

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