野黄刺玫果粗总黄酮的提取工艺研究

野黄刺玫果粗总黄酮的提取工艺研究

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1、野黄刺玫果粗总黄酮的提取工艺研究史萌史志辉(陕丙辉胜新兴农业科技发展有限公司712000)【摘要】目的:探讨野黄刺玫果粗总黄酮最佳提取工艺。方法:以野黄刺玫果为原料,以总黄酮含量和提取率为评价指标,乙醇浓度,料液比,提取时间为考察因素,进行三因素三水平L9(34>正交试验、方差分析和验证实验。在上述优选出最佳提取条件不变的情况下,乂对提取次数进行了优选。结果:野黄刺玫果粗总黄酮的最佳提取工艺条件为:用12倍量75%乙醇,加热回流提取三次,每次2h。【关键词】野黄刺玫果总黄酮正交试验方差分析【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-508

2、5(2014)15-0031-02野黄刺玫果为蔷薇科(Rosaceae)截薇属(Rosa)植物野黄刺玫(RosaxanthinaLindl)的干燥成熟果实。9月份果实成熟时釆收,除去杂质,干燥。木品为野生落叶灌木,广泛分布于我国北方的山区和丘陵地带[1][2]。野黄刺玫的花、果、叶和根皮均可入药,味酸甘性平,具有健脾养血,理气活血之功效,用于消化不良,腹痛胀气、胃痛、气滞血瘀的胸痹,对冠心病心绞痛及高脂血症有奇效,并能治疗妇女月经不调[3]。民间广泛有食用野黄刺玫果和用其酿酒的习惯。现代研究表明,野黄刺玫果中含有丰宮的黄酮。皂苷、植物SOD,多种维生素

3、及大量有益的微量元素。野黄刺玫果具有抗氧化作用[4],抗袞老和预防心血管病的作用及降压降脂作用[5][6]。毒理学实验研究表明,野黄刺玫果属于无毒级,可安全使用的药食两用资源[7]。由于总黄酮为野刺玫果的降压,降脂及治疗冠心病心绞痛的有效成份,木实验研宄黄刺玫果粗总黄酮提取的最佳工艺条件,用紫外一可见分光光度法测定野黄刺玫果总黄酮的含量,为野黄玫果最佳粗总黄酮提取工艺的筛选提供了理论根据。1、材料与检测方法1.1材料与试剂野黄刺玫果采自陕西旬邑县石门山区,9月份果实成熟吋采摘,除去杂质,干燥。芦丁对照品由中国食品药品检定研究院提供,供含量测定用,试剂皆

4、为分析纯。1.2仪器与设备UV?765型紫外一可见分光光度计上海精密科学仪器冇限公司;BS210S型电子天平,北京赛多利斯天平有限公司;RE-52A型旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;III型高速中药粉碎机,浙江省瑞安永西制药机械有限公司。1.3野黄刺玫果总黄酮的测定1.3.1对照品溶液的制备取芦丁对照品50mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇适量,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,既得(每lml中含芦丁0.2mg)。1.3.2标准曲线的制备精密量取对照品溶液lml、2ml、3ml、

5、4ml、5ml与6ml、分别置25ml量瓶中,各加水至6.0ml,加5%亚硝酸钠溶液lml,混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液lml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应的试剂为空白,照紫外一可见分光度法(中国药典2010年版一部附录VA),在500nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵座标,浓度为横座标,绘制标准曲线。1.3.3测定法取野黄刺玫果提取物干燥细粉约lg,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚适量,加热冋流至提取液无色,放冷,弃去乙醚液。再加甲醇90ml,加热冋流至提取液无色,转移至100ml量瓶中,

6、用甲醇少量洗涤容器,洗液并入同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取50ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取5ml,置25ml量瓶中。照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计的重量(?g),计算,即得。2、野黄刺玫果加热冋流提取工艺的考察2.1加热冋流提取正交试验固定加热冋流提取三次的条件下,以乙醇浓度,每次加乙醇量为所提野黄刺玫果粗粉的倍数及提取时间为考察因素,进行三因素三水平L9(34)正交试验,以总黄酮百分含量和提取率(%)为评价指标(以

7、下皆同),筛选最佳冋流提取条件。总黄酮百分含量和提取率的权重系数分别为0.5、0.5,并以综合评分作为提取效果的衡量指标。试验结果见表1、表2。表1因素水平表注:加热冋流提取两个评价指标,采用综合评分法进行数据分析,总黄酮含量和提取率的权重系数分别为0.5、0.5。总黄酮含量评分=总黄酮含量/最人总黄酮含量×0.5×100提取率评分=提取率/最大提取率×0.5×100综合评分=总黄酮含量评分+提取率评分从表2极差R值大小显示,各因素对提取效果影响大小顺序为A〉B〉C,再从各因素水平来看(K值分析),因素A

8、为K2〉K3〉K1,因素B为K3〉K2〉K1,因素C为K3〉K2〉K1。从以上直观分析,最佳加

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