辛伐他汀对压力超负荷大鼠apn、il6及心肌肥

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1、辛伐他汀对压力超负荷大鼠APN、IL6及心肌肥【摘要】目的观察辛伐他汀对压力超负荷大鼠血清脂联素（APN）、白细胞介素6（IL6）水平以及心肌肥厚的影响，探讨该类药物影响心肌肥厚可能的作用机制。方法实验动物随机分对照组、心肌肥厚组、治疗组，每组10只。应用经典的腹主动脉结扎方法，制备压力超负荷大鼠模型。治疗组大鼠给予辛伐他汀5mg/kg每日清晨灌胃，连续6周。心肌肥厚组和对照组同时以同等剂量的9g/L的氯化钠溶液每日清晨灌胃，直至术后6周。采用鼠尾测压法测定大鼠血压的变化；酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清APN、IL6浓度。

2、实时定量PCR检测心肌组织中IL6、脂联素受体1(AdipoR1)的mRNA表达。称量法计算各组大鼠心脏质量及心脏质量/体质量比值，并观察心肌的病理学改变。结果心肌肥厚组大鼠血清APN水平、IL6水平、心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径，以及心肌IL6、AdipoR1mRNA表达与对照组相比差异有显著性（q=3.41～31.83,P<0.01）。治疗组大鼠与心肌肥厚组相比血清APN水平、IL6水平、心脏质量、心脏质量/体质量比值、左心室壁平均厚度、心肌细胞平均直径以及心肌IL6、Ad

3、ipoR1mRNA表达差异有显著性（F=3.57～329.93,q=3.11～31.08，P<0.01）。结论辛伐他汀可能通过增加血清APN的浓度以及心肌细胞因子的表达来抑制压力负荷增加引起的大鼠心肌肥厚。【关键词】心室重构；辛伐他汀；脂联素；白细胞介素6；大鼠,GCoA)抑制剂，除了降低胆固醇外，还具有“多效应作用”[1]，在改善心肌肥厚中的应用还处于探索阶段。本研究将辛伐他汀应用于大鼠心肌肥厚的动物模型，观察大鼠用药后心肌的病理改变以及血清APN水平、心肌细胞因子表达的变化，探讨辛伐他汀对心肌肥厚的影响及可能的作用机制

4、，旨在为心肌肥厚的预防和治疗提供新的手段和方法。现将结果报告如下。　　1材料和方法　　1.1动物及分组　　SPF级L/kg）腹腔麻醉后行剑突下正中切口，于双侧肾动脉分支近心端处将腹主动脉与七号针头结扎在一起后，抽出针头，脏器恢复原位，缝合切口。对照组只实行相同的手术程序，不结扎腹主动脉。术后3d大鼠恢复后，从尾动脉测定收缩压，连续观察血压的变化。心肌肥厚模型选取术后2周血压维持在21.33kPa以上的大鼠用于实验。术后2周治疗组大鼠给予辛伐他汀（由默沙东制药有限公司提供）5mg/kg每日清晨灌胃，连续6周。心肌肥厚组和对照组同时以

5、同等剂量的9g/L的氯化钠溶液每日清晨灌胃，直至术后6周。　　1.3取材　　处死动物前称体质量，处死后取心脏称质量，计算心脏质量/体质量比值。在距心尖与心底等距离处横行切断心脏，心底端置40g/L的甲醛溶液固定，进行病理学实验；心尖端置液氮保存，进行分子生物学实验。　　1.4大鼠血清APN、白细胞介素6（IL6）浓度检测　　采用酶联免疫吸附实验法（ELISA），实验方法参照试剂所提供操作指南，结果在全自动酶标仪上进行比色分析。　　1.5实时定量RTPCR检测心肌细胞脂联素受体1(AdipoR1)、IL6的mRNA的表达　　

6、取冻存心肌组织约100mg，剪碎,用Trizol试剂1000mL提取总RNA(具体步骤参见试剂说明书)。应用引物Oligod(T)18和Random逆转录合成cDNA。配置PCR体系，应用SYBRGreenⅠ荧光染料技术扩增待测基因及内参基因所用引物。见表1。反应条件：第一次循环95℃10s；然后以95℃5s,60℃50s,进行40次循环；最后进行溶解曲线分析。以阴性对照GAPDH作为参考，计算机分析Ct值，即每个反应管内荧光强度达到系统认为的有目的DNA合成时的循环数，用以评定各因子mRNA的实时定量相对表达水平。以上试剂及引物

7、均由宝生物工程(大连)有限公司提供。　　1.6病理学检测　　将甲醛固定的心脏组织做成石蜡切片，经苏木精伊红染色后拍照，用ImagePlus图像分析软件测量左心室前壁、侧壁、后壁和室间隔的厚度，并取平均值即为左心室壁的平均厚度；在显微镜下放大40倍后再拍照，每张切片随机选取10个视野，每个视野选10个细胞，用ImageProPlus软件测每个细胞的面积，取平均值后计算出其等效面积圆的直径，即为心肌细胞平均直径。　　1.7统计学处理　　实验结果以±s表示，采用SPSS11.5统计软件进行单因素方差分析,两组间比较用q检验。　　2

8、结果　　2.1各组大鼠血清脂联素、IL6水平的变化　　腹主动脉结扎术后8周，心肌肥厚组大鼠血清脂联素、IL6水平与对照组比较差异有显著性（F=33.55、87.63,q=11.23、18.66,P<0.01）；治疗组血清脂联素、IL6水