丹酚酸抗氧化活性及其对dna损伤保护作用

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1、丹酚酸抗氧化活性及其对DNA损伤保护作用作者：柳艳，李磊，刘王莹，陈茂勇，吴倩【关键词】丹酚酸；抗氧化；DNA损伤；化学发光　　摘要：目的探讨丹酚酸抗氧化活性及其对DNA氧化损伤的保护作用机制。方法运用自由基反应模型观察丹酚酸对二苯代苦味酰肼自由基(DPPH)和羟自由基的淬灭效应，使用邻菲罗啉(Phen)-CuSO4-VC-H2O2-DNA化学发光体系测定丹酚酸对DNA损伤的抑制作用。高效液相色谱(HPLC）测定丹酚酸的组成。结果丹酚酸水提物(AE)、乙酸乙酯萃取物(EE)、大孔吸附树脂纯化物（RE)和对照维生素(VC)、二丁基羟基甲苯(BHT)对DPPH自由基的半数

2、清除浓度(IC50)分别为1412，153，146，158和715μg/ml。化学发光体系中，丹酚酸的加入能明显抑制并延迟DNA损伤。AE、EE、RE抑制发光50％浓度(IC50)值分别为12936，620，492μg/ml。丹酚酸清除DPPH自由基能力和对羟自由基攻击的DNA损伤保护作用受丹酚酸组成和丹酚酸B含量的影响。结论丹酚酸属于预防型和断链型抗氧化剂，并可有效清除DPPH和羟自由基，对DNA损伤有明显保护作用。丹酚酸的抗氧化活性及对DNA损伤的保护作用与丹酚酸B含量有关。　　关键词：丹酚酸；抗氧化；DNA损伤；化学发光　　Antioxidantactiviya

3、ndprotectioneffectofsalvianolicacidsonDNAdamage　　Abstract：ObjectiveTostudyontheantioxidantactivityofsalvianolicacidsandmechanismsofitsprotectionagainstDNAantioxidativedamage.MethodsFreeradicalmodelployedtoinvestigatethescavengingactivityto1，1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH)andhydroxylf

4、reeradicals.ThemechanismsoftheeffectsofsalvianolicacidsonprotectionagainstDNAdamageeasuredbychemiluminescenceonthereactionsystemofphenanthroline(Phen)-CuSO4-VC-H2O2-DNA.SalvianolicacidspositioninsamplesinedaccordingtoHPLCanalysis.ResultsThehemi-inhibitableconcentration(IC50)ofcrudeaqueo

5、usextract(AE)，ethylacetateextract(EE)，resinextract(RE)，ascorbate(VC)andbutylatedhydroxytoluene(BHT)toDPPHfreeradicalsl.ThreeextractscouldobviouslyinhibitanddelayDNAdamagecausedbyhydroxylfreeradicals.TheIC50valvueofchemiluminescenceofAE，EEandREl.Thescavengingactivityandprotectiveeffectsa

6、gainstDNAdamageageage；chemiluminescence　　丹参是我国防治心脑血管病的传统药物，对冠心病、高血压、糖尿病肾病及癌症等疗效确切。近20多年来的药效研究表明，丹酚酸是丹参活血化瘀作用的主要功能成分〔1〕。自由基参与机体多种疾病的发生和发展过程，清除自由基、提高机体抗氧化能力，是许多药物防治慢性疾病的重要途径〔2，3〕。从化学结构上分析，丹酚酸类化合物是酚羟基的供体，具有抗氧化活性的结构基础。本文研究了丹酚酸对二苯代苦味酰肼自由基(DPPH）的清除效应，并探讨其对体外DNA氧化损伤的保护作用及可能机制，为进一步研究丹酚酸药理作用提供科学

7、依据。　　1材料与方法　　11仪器及色谱条件LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津公司)；DU600紫外-可见分光光度计(美国Backman公司)；OrionII高灵敏度板式化学发光检测仪(德国BertholdDetectionSystems公司)。AlltimaC18(150mm×46mm，5μm)色谱柱；流动相为水(05％冰醋酸)(A)-乙腈(B)；梯度条件：0～30min时5％～25％β,30～60min时25％～30％B；流速10ml/min；柱温为室温；检测波长280nm；进样量20μl。　　12试剂丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所，批