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时间:2018-11-10
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1、常用杀虫中药杀虫效果比较及其配伍的初步研究近年来从植物中寻找杀虫活性物质是目前研究开发无公害农药的重要途径之一[1]。中草药不仅具有医疗保健作用,而且还具有杀虫的作用[2]。我国自20世纪30年代开始,曾对烟草、鱼藤、巴豆、百部等杀虫植物进行过比较广泛的研究[3]。进入20世纪90年代,对有杀虫活性的植物资源又作了进一步的调查研究。对单味药的研究较多,尤其是对其有效成分的研究[4]。王氏等[5]分别对苍耳子用不同溶剂提取,发现不同溶剂提取物对菜粉蝶的作用各不相同。胡氏等[6]采用活体及盆栽试验研究水煎液提取的苦楝皮活性成分对蛴螬、金针虫杀虫效果,
2、显示苦楝皮水煮液对地下害虫有杀灭作用。本实验选取10种中药,采用乙醇回流提取和水提取2种方法,选用标准试虫在实验条件下进行严格的生物测定,测定这些中药的杀虫作用,为研制新的植物源农药奠定基础。 1材料与方法 1.1供试昆虫 黏虫Mythimnaseparate引自甘肃省农业科学院敏感体系,室内自然条件下饲养,实验时挑选整齐一致的幼虫供试。甘蓝蚜Brevicorynebrassicae和朱砂叶螨Teranychuscinnbarinus均采自甘肃省农业科学院应用昆虫研究温室。 1.2供试中药 百部、苍耳子、苦参、丁香、甘遂、瑞香狼毒、藜芦
3、、苦皮藤、苦楝皮、雷公藤,甘肃中医药大学附属医院中药房。 1.3主要试剂与仪器 无水乙醇,分析纯,天津市得思化学试剂有限公司。DHP-9272型电热恒温培养箱(上海一恒科学仪器有限公司),QE-10A型高速粉碎机(武义科技有限公司),R-210型旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)。 1.4中药活性部位提取 将上述中药在小型粉碎机上粉碎,过10目筛制成粗粉,每味中药分别称取40g放入圆底烧瓶,分别用纯水和80%乙醇电热套加热提取2次,第1次加8倍量溶剂,第2次加6倍量溶剂,每次提取时间为1h;提取完毕后,抽滤,将2次滤液合并,旋转蒸发仪减压浓
4、缩,最后得到较浓油状或浆状的原粉粗体物,经体积测量,浓缩液1mL相当于1g原药材,即浓度为1g/mL。供生物测定试验使用。 1.5生物测定方法 1.5.1载玻片浸渍法参照联合国粮食及农业组织推荐的测定螨类抗药性的标准方法载玻片浸渍法[7]加以改进。粘在玻片双面胶带上的供试螨在温度(26±1)℃、湿度60%~80%的室内环境下放置4h,然后用双目解剖镜检查,剔除死亡和不活泼的个体,记载总的活螨数,将带螨的一端浸入事先配好的药液中,6s后取出,迅速用剪好的三角滤纸将周围多余的水吸干,温度(26±1)℃、湿度60%~80
5、%,光照明暗交替16h/8h培养48h,每24h检查1次。用毛笔轻触其身体,以螨足不动者为死亡。每个浓度5个处理。实验重复3次。 1.5.2微量点滴法参照文献[8]微量点滴法并加以改进。在培养皿中垫入滤纸,保湿,剪取新鲜油菜叶放入培养皿中。将每味中药提取液分别稀释5个不同系列浓度,由低浓度开始给甘蓝蚜给药,用虹吸管取1μL点滴在甘蓝蚜背部,分别在24h和48h进行观察,用毛笔轻触虫体,不动者视为死亡。实验重复3次。 1.5.3虫体浸渍法在培养皿中垫入滤纸,保湿,剪取新鲜小麦叶子放入培养皿中。将提取液稀释为5个不同系列浓度,倒入小烧杯中,
6、挑取同日龄同样大小黏虫10只(每个浓度各10只),将其虫体浸渍在药液中10s,将其表面液体用滤纸吸干,然后用镊子轻轻夹起,放入培养皿中,将培养皿放入25℃恒温培养箱中,24h和48h检查死亡情况,用毛笔轻触身体,不动者和不能爬行者视为死亡。实验重复3次。 1.6统计学方法 采用Excel2003和SPSS13.0统计软件进行分析,以校正死亡率来表示实验结果。 2结果 2.1载玻片浸渍法对朱砂叶螨的触杀作用 中药醇提物作用优于中药水提物,中药水提物几乎无作用,见表1。苦皮藤、苦参、苍耳子、甘遂、百部醇提物分别对朱砂叶螨具有很强的触杀作用,
7、毒力较强。从校正死亡率分析,在相同浓度下,苦皮藤、苦参、苍耳子、甘遂、百部对朱砂叶螨触杀作用较其他5味药强。当这5味药醇提物按照一定比例配伍后,单味药稀释100倍,其校正死亡率明显高于单味药醇提物,见表2。 2.2微量点滴法对甘蓝蚜的触杀作用 醇提物作用明显优于水提物,瑞香狼毒、百部、藜芦、苍耳子乙醇提取物对甘蓝蚜有较强的杀灭作用,见表3。从校正死亡率分析,瑞香狼毒、百部、藜芦、苍耳子醇提物在相同的浓度下校正死亡率明显高于其他几味药和中药水提物,将这4味药醇提物按照一定比例配伍后,复合物校正死亡率明显高于单味药,见表4。 2.3采用虫体浸渍
8、法对黏虫的触杀作用 10味中药水和醇提物对黏虫的触杀实验中,只有百部醇提物对黏虫具有触杀作用,且毒力较强,其他几味中药水和醇提物均无作
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