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《大鼠同种异体异位节段小肠移植模型》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、大鼠同种异体异位节段小肠移植模型目的：建立大鼠同种异体异位节段小肠移植模型，为研究小肠移植排斥反应提供良好的动物模型。方法：健康成年SD大鼠100只，供、受体各50只，进行同种异体异位节段性小肠移植。结果：预试验10次，术后72h存活率40%。正式实验40次，术后72h存活率85％。全部手术时间平均160min,供体手术时间平均70min，受体手术时间平均90min。结论：良好的血管吻合方法以及输血、补液、保温等围手术期处理是提高手术成功率的关键。 小肠移植是治疗终末期肠功能衰竭，如短肠综合征的唯一确切方法［1］，但由于小肠富含淋巴组织，具有很高的免疫源性，是诸多器官移植中排斥反应发生
2、率最高和最重的器官［2］，使小肠移植成为最具挑战性的腹腔脏器移植。20世纪80年代前，无论是在实验室还是在临床，小肠移植都远远落后于肝、肾等其它脏器的移植，直到20世纪80年代后期随着环孢素Ａ(CsA)的问世，小肠移植才开始有了根本性的突破。近年来虽然有强有力的非特异性免疫抑制剂的应用，但小肠移植排斥反应仍高达50%以上［3］，与其它脏器（肾、肝、心脏）相比，临床小肠移植仍处于起步阶段。目前困扰小肠移植的主要问题是排斥反应、多源性感染、缺血再灌注损伤和移植肠功能障碍等,因此建立可靠的动物模型进行实验研究极其重要。大鼠作为小肠移植模型实验动物有显著的优点,如购买和饲养的花费低、免疫学的构成
3、更可控和对感染相对强的抵抗力等［4］。因此，在小肠移植研究领域最为常用。本实验建立一种并发症少、存活率高、稳定实用的大鼠小肠移植模型，为今后研究小肠移植排斥反应打下基础，现报道如下。 1材料与方法 1.1实验动物选用健康成年SD大鼠100只，体重180～250g(新疆医科大学实验动物中心提供)，分为供、受体各50只。手术前禁食12～15h，饲以5％葡萄糖水喂养。10%水合氯醛((3ml/kg)腹腔注射麻醉,100l/kg)腹腔注射麻醉,待大鼠麻醉完全后,术区备皮，仰卧位固定于显微镜下的木板上,酒精消毒腹部皮肤后,尾静脉置管，缓慢推注肝素乳酸林格液2ml（含肝素12.5U）。十字切口开
4、腹,盐水纱布保护肠管,游离腹主动脉，在右肾动脉水平以下、左肾动脉水平上方结扎腹主动脉。分离解剖结肠系膜与小肠系膜间的粘连带，沿十二指肠找到屈氏韧带，距屈氏韧带约5cm处选择分支较少、供应血管较粗的约15～20cm的一段近端空肠，标记备用。游离结扎切断回结肠动静脉、右结肠动静脉、中结肠动静脉,同时游离横结肠和升结肠。翻开横结肠及升结肠，显露肠系膜上动脉及上静脉，结扎切断肠系膜上动脉及上静脉之间的结缔组织，显露肠系膜上动脉根部，并充分游离骨骼化。沿肠系膜上静脉找到门静脉，结扎切除其周围淋巴结和结缔组织，游离结扎切断十二指肠下动脉和十二指肠上、下静脉，将胰腺从门静脉上剥离下来。显露游离脾静脉，
5、游离结扎肠系膜上静脉汇入门静脉分支至幽门静脉。游离腹腔动脉与左肾动脉之间的腹主动脉，结扎此段腹主动脉的所有腹腔动脉分支，保留肠系膜上动脉。于标记肠管远端同时结扎切断肠系膜上动静脉。于标记肠管两端切断，空肠断端缓慢而轻柔地注入4℃庆大霉素盐水行肠腔灌洗。在腹腔动脉水平阻断腹主动脉,经右肾动脉插管至肠系膜上动脉水平,并以5-0丝线固定。结扎切断脾静脉，紧贴幽门静脉回流平面下方结扎切断门静脉，远心端开放。以含12.5U/ml肝素的4℃乳酸林格液行小肠原位灌洗,同时将大量冰屑敷于小肠上快速降温，低压灌洗肠系膜血管至肠管呈乳白色、门静脉断端流出液清亮为止。剪断肠系膜上动脉根部，将移植物放入4℃肝素
6、乳酸林格液保存。热缺血时间约2～3min。于腹腔动脉上方穿刺腹主动脉，取血约2～3ml，肝素化保存备用。 1.2.2受体手术受体麻醉同供体，肌肉注射阿托品0.2mg/kg,腹部正中切口，上至剑突,下至耻骨联合，用自制的腹部拉钩向两侧拉开腹壁，用乳酸林格液纱布保护切口周围的皮肤,将肠管置于左侧腹外，以乳酸林格液纱布覆盖保护。盐水棉棒暴露游离肾血管水平以下腹主动脉及下腔静脉段约1～1.5cm。5-0丝线于肾动脉水平下及髂血管水平上同时阻断下腔静脉和腹主动脉，依次阻断近心端和远心端。结扎腹主动脉及下腔静脉的所有分支,显微镊提起血管壁，于腹主动脉壁及下腔静脉壁各剪出一椭圆形缺口，直径应略大于供
7、体肠系膜上动脉及门静脉直径，肝素乳酸林格液冲洗血管腔。乳酸林格液纱布包裹移植肠管并置于腹外,生理盐水冰屑覆于纱布上以局部降温。11-0滑线端侧连续吻合腹主动脉－肠系膜上动脉、下腔静脉－肠系膜上静脉，吻合过程中吻合处浸于肝素乳酸林格液中。以棉球压迫动脉吻合口周围,依次松开远心端及近心端，恢复肠管血液循环。冷缺血（50±10）min，如血管吻合口通畅，移植小肠迅速红润并可见明显的小血管搏动，肠腔内分泌出乳白色肠液。吻合后可常规使用凝胶海
