大鼠小肠移植模型的技术改进

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1、大鼠小肠移植模型的技术改进：张立，何纪恩，车向明，樊林，赵伟，于楠【摘要】　　目的建立一种更为简便、稳定、存活率高的大鼠小肠移植模型。方法供、受体手术均双人操作，整体切取供体节段小肠，术中原位冷灌注，4℃Uin和(2±1)min。52只存活超过3d，存活率为86.7%，平均存活(16±9.4)d，最长存活时间为45d。结论科学统筹、供体特异性输血和血管吻合技术的改良能建立更为可靠的大鼠小肠移植模型，为进一步的研究奠定了基础。【关键词】动物模型小肠移植血管吻合供体特异性输血　　ABSTRACT:Objective

2、Toestablishasimpleandstablemodelofsmallboedbytentofsmallboinalaortapatchesentericasuperiorpedicleandsuperiormesentericveintoportalvein,coldperfuseditduringoperation,andthenpreserveditinUosisofdonorabdominalaortapatchesentericasuperiorpedicleandrecipientabdom

3、inalaortaedaccordingtothemicrosurgicaltechnique,donorspecificbloodtransfusionduringtheoperation,anendtoendanastomosisbetalendusedandthedistalendofthegraftentofthesmallboodeladefor60times,andtheoperationinanastomosisbetinand(2±1)min,respectively.Fiftytodel

4、ssurvivedformorethan3days,odifiedtechniqueofdonorsmallboorereliablemodelofsmallboalmodel;smallboosis;donorspecificbloodtransfusion　　小肠移植作为肠衰竭患者有效的治疗方法[1]，已在实验室和临床方面广泛开展。小肠移植的实验研究和动物模型的建立及改进密不可分，通过不断地动物模型实验，小肠移植才得以应用于临床并取得成功[2]。大鼠是小肠移植基础研究方面理想的实验动物，但技术难度较大，移植

5、成功率较低。通过探索，建立了一种稳定的大鼠异位小肠移植模型的制备方法，用来进一步做大鼠同种异体移植时的免疫耐受及相关研究。　　1材料与方法　　1.1实验动物　　选用雄性SD大鼠(西安交通大学医学院实验动物中心)作为供、受体，体重250～300g，受体略重于供体。　　1.2方法　　1.2.1术前准备　　供、受体均至实验室适应性饲养7d，术前禁食12h，自由饮用50g/L葡萄糖盐水。　　1.2.2麻醉　　采用50g/L氯胺酮(江苏恒瑞医药股份有限公司)术前100mg/kg体重腹腔内注射麻醉。　　1.2.3供体手术　

6、　采用双人配合操作，分工明确，术者将大鼠四肢固定取仰卧位，常规消毒腹部，腹部正中切口，上至剑突下至耻骨联合。切开后腹膜，游离肾下腹主动脉并结扎。显露结肠系膜，游离、结扎并切断回结肠动静脉、右结肠动静脉、中结肠动静脉和左结肠动静脉，切除全部结肠。在十二指肠悬韧带下5cm结扎、切断空肠及其系膜，沿肠系膜血管游离近段空肠，并自肠系膜上动脉下将其引至右侧。剪开肠系膜上动、静脉间结缔组织，充分游离肠系膜上动脉。游离腹腔干动脉、右肾动脉和腹腔干动脉与肾动脉间的腰动脉，结扎并切断。游离肠系膜上静脉及门静脉，切除其周围的淋巴结

7、和结缔组织，结扎切断胰十二指肠上、下静脉，将胰腺从门静脉上剥离下来，游离门静脉至肝门。保留20～30cm远端回肠待移植用，余切除。快速结扎、切断脾静脉和幽门静脉，动脉血管夹于腹腔干动脉上阻断腹主动脉[3]，在左肾动脉下方，经腹主动脉插管，以30cmH2O压力行小肠原位灌注。灌注液为4℃UW液，同时将大量生理盐水冰屑敷于小肠上快速降温。灌注开始同时，紧贴肝门部剪断门静脉，灌注至肠系膜和肠壁血管床苍白，门静脉端流出液清亮时，参考樊林等[4]的血管处理方式并予以改进，在供体手术血管灌注满意后，轻轻垂直牵拉肠系膜上动脉

8、，使其与腹主动脉存在一定张力。利用显微弯剪弧度沿肠系膜上动脉根部将腹主动脉弧形剪开，打开后呈一椭圆形动脉瓣补片，明显缩短修剪吻合口时间。　　于大鼠身下垫一吸水棉垫，体位、消毒、腹部切口与供体相同，盐水纱布保护、包裹受体肠管于腹腔右侧，解剖、游离左肾及其动、静脉。结扎左侧输尿管，近腹主动脉处结扎切断左肾动脉，将左肾翻上留置待用。游离左肾下腹主动脉1.5cm左右。动脉血管夹阻断腹主动脉游离