hplc法对牛蒡子生品与炮制品中牛蒡苷、牛蒡苷元含量的测定

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1、HPLC法对牛蒡子生品与炮制品中牛蒡苷、牛蒡苷元含量的测定【关键词】牛蒡子;牛蒡苷;牛蒡苷元;高效液相色谱法;含量测定牛蒡子为菊科植物牛蒡(ArctiumLappaL.)的干燥成熟果实。具有疏散风热、宣肺透疹、解毒利咽等功效，是临床应用较为广泛的中药材之一，有牛蒡子和炒牛蒡子两种商品规格。近年来对其进行的研究多以牛蒡子苷为药材质量控制的指标，但药材中其它成分的情况了解较少。本文应用高效液相色谱法(HPLC)对牛蒡子生品与炮制品中牛蒡苷、牛蒡苷元的含量进行了研究，为牛蒡子有效成分检测的质量控制提供了科学依

2、据。　　1材料与方法　　1.1材料与试剂牛蒡子药材购自于辽宁、四川、湖北、浙江四大产区，经内蒙古医学院生药教研室乔俊缠教授鉴定为菊科植物牛蒡的干燥成熟果实。炮制品由自制及市售得到。牛蒡子苷对照品(819-9401)由中国药品生物制品鉴定所提供，测定所用试剂均为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。牛蒡子苷元对照品为自制，经HPLC纯度检验为98.565%，测定所用试剂均为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。　　1.2仪器Agilent1100series高效液相色谱仪(美国)由G1310A输液泵、G1314A紫外检测器和Ag

3、ilent色谱工作站组成;FA-1004电子天平;CQ-250超声波清洗器。　　1.2方法　　1.2.1色谱条件色谱柱：AgilentEclipseXDB-C18柱(4.6mm×150mm，5μm);流动相：甲醇-水(1∶1.2);流速：1.0mL/min;检测波长：280nm;柱温：25℃。　　1.2.2对照品溶液的制备分别精密称取干燥至恒重的牛蒡子苷及苷元对照品，置容量瓶中，加甲醇溶解并定溶至刻度即可。　　2结果与分析　　2.1含量测定将牛蒡子生品、炮制样品均粉碎成过60目筛的细粉，各精密称取0.5

4、g，加甲醇45mL，置超声波清洗器中，超声30分钟后过滤，滤液定溶至50mL，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，经微孔滤膜(0.45μm)过滤后，精密吸取样品液各4μL，注入高效液相色谱仪中，测定牛蒡子苷及苷元的色谱峰面积，用外标法计算样品中牛蒡子苷及苷元的含量，测定结果见图1、图2。　　2.2线性范围分别精密吸取牛蒡子苷对照品溶液(0.617mg/mL)及牛蒡子苷元对照品溶液(0.094mg/mL)各2、4、6、8、10μL，分别注入高效液相色谱仪中，按上述色谱条件进样，测定峰面积。以进样量(μg)为横坐

5、标，峰面积为纵坐标，分别绘制牛蒡子苷和牛蒡子苷元的标准曲线。见表1。　　2.4稳定性试验在室温条件下，精密吸取同一样品溶液，按样品测定方法在0、4、8、12、24、48小时的时间间隔内分别进样10μL，测定峰面积，牛蒡子苷及牛蒡子苷元的RSD分别为0.70%、0.88%，说明样品溶液在48小时内稳定。见表3。表3牛蒡子苷及牛蒡子苷元稳定性试验结果　2.5精密度试验精密吸取一份供试品溶液连续进样5次，每次4μL，结果牛蒡子苷峰面积的RSD为0.80%。牛蒡子苷元峰面积的RSD为1.20%。见表4。表4牛蒡

6、子苷及牛蒡子苷元精密度试验结果　　2.6回收率试验精密称取已知含量的样品(牛蒡子苷8.97%和牛蒡子苷元0.67%)各5份，分别精密加入牛蒡子苷及牛蒡子苷元对照品，按样品测定方法进行测定，计算回收率，结果牛蒡子苷及牛蒡子苷元的平均回收率分别为96.42%、97.75%，RSD分别为1.23%、0.77%。见表5、表6。表5牛蒡子苷回收率试验结果表6牛蒡子苷元回收率试验结果　　本实验表明，用HPLC色谱法对牛蒡子进行含量测定精密度高，重现性及稳定性皆良好，方法简便、易行，可作为牛蒡子苷和牛蒡子苷元含量的测

7、定方法。【参考文献】　[1]李亚秋.高效液相色谱法测定抗感胶囊中牛蒡子苷的含量[J].辽宁中医杂志，2004，31(6):511.　　[2]李深，戴惠民，杜娟.HPLC法测定清热祛毒丸中牛蒡苷的含量[J].辽宁中医杂志，2004，31(5):416.　　[3]张涛.牛蒡子不同炮制品中牛蒡苷含量的HPLC测定[J].中草药，2004,35(4):50-51.