正交实验法从黄芩中提取总黄酮

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1、正交实验优选黄芩中总黄酮的提取工艺林春莲(江两中医药大学330004)伍振峰(江丙中医药大学重点实验室330004)屮文摘要目的:优选黄芩中总黄酮的提取工艺并测定其合量。方法：利用酶解法选取加液量、提取时间、提取次数为考察因素，通过L9(33)正交实验筛选最优提取工艺；采用紫外分光光度法，以芦丁为对照品测定黄芩中总黄酮的含量。结果：优选得到的工艺条件为采用14倍量水提取两次，每次90分钟。结论：优选的提取工艺简单、方便、提取率高，可达到实验要求。关键词：正交实验；黄芩；总黄酮；提取工艺；紫外分光光度法

2、AbstractPurpose:tooptimizingextractiontechnologyanddeterminationofthecontentoftotalflavonoidsinScutellariabaicalensisgeorgi.Methods:byusingenzymatichydrolysisandfluidvolume,extractiontime,extractiontimestoexaminefactors,throughL9(33)orthogonalexperiment

3、toscreentheoptimalextractionprocess.Usingultravioletspectrophotometry,withrutinasreferencesubstancedeterminationofthecontentofflavonoidsinradixScutellariae.Results:theoptimizationofprocessconditionsfortheextractionof14timestheamountofwaterusedtwice,90mi

4、nutesatatime.Conclusion:theoptimalextractionprocessissimple,convenient,highextractionyieldandcanmeettheexperimentalequirements.Keywords:Oorthogonaltest;RradixScutellariae;Flavonoids;Eextractiontechnology;UVspectrophotometry前言黄琴是常用的中药，为唇形科植物黄苓(Scutellari

5、aebaicalensis)的干燥根，黄芩味苦性寒，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。用于湿温、暑湿，胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安［1］。苏主要有效成分为黄酮类化合物，包括黄芩苷(baicalin)、汉黄苓苷、黄苓苷元（baicalein）等，其中以黄芩苷含量最多，具有抗菌消炎、解热、抗肿瘤、抗流感病毒、抗动脉粥样硬化等作用［2_5］。本文以总黄酮含量为考察S标，利用酶解法，采用单因素实验和正交试验优选了黄芩中总黄酮的提取工艺，用紫外分光光度

6、法测定了黄芩提取物中总黄酮的含量。正文一、总黄酮的提取本实验的所采取的提取方法为水提醇沉冋流提取法，有文献报道还可采用醇提酸沉法、超滤法、微波提取法等提取黄酮类化合物，考虑到实验条件及操作的简便性，最终选择实验室较为常用和简便的水提醇沉法回流提取法。1实验仪器、药品与试剂1.1实验仪器：可调式电热套MH-250型250ml（北京科伟永兴仪器有限公司）；恒温水浴锅HH-S6双列六孔（郑州长城科工贸有限公司）；SHB-III循环水式多用真空泵（郑州长城）；热风循环烘箱DZF-6020MBE（上海博迅实业有

7、限公司医疗设备厂）；岛津UV-240型紫外-可见光分光光度仪（日本岛津公司）1.2药品与试剂：黄芩饮片芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）60%乙醇5%亚硝酸钠（广东汕头市西陇化工厂分析纯）10%硝酸铝（广东台山化工）4%氢氧化钠（天津市福晨化学试剂厂分析纯）蒸馏水（实验室自制）2方法和结果2.1因素水平设计根据提取工艺要求，选取加液量、提取吋间、提取次数作为三个考察因素，各取三个水平，以总黄酮为考察指标，选用U（33）正交实验表。表1因素水平表因素加水量A/倍提取时间B/min提取次数C/次1103

8、012126023149032.2总黄酮的含量测定2.2.1供试品溶液的制备称取黄芩药材样品5g，置250ml的圆底烧瓶中，按照水平因素表1的条件置于电热套中进行回流提取，滤过，提取液移至250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，作为样品溶液。用移液管精密量取20ml样品溶液置蒸发皿中放于水浴锅中蒸干，残渣加60%乙醇溶解，过滤，移至25ml容量瓶屮，用60%乙醇定容至刻度。用移液管精密量取5ml溶液置25ml容量瓶屮，加入质量分数为5%亚硝酸钠1.0ml