正交实验优选黄芩中黄芩素提取工艺论文

《正交实验优选黄芩中黄芩素提取工艺论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、正交实验优选黄芩中黄芩素提取工艺论文【摘要】目的优选黄芩中黄芩素的提取工艺。方法通过正交实验以黄芩素作为指标考察4个因素（溶剂类型，提取时间，提取方法，提取次数）、3个水平对提取效果的影响，以反相高效液相色谱（RPHPLC）法测定黄芩素的含量。结果黄芩素的最佳提取工艺为A2B1C2D3，即采用冷浸法，用水作为提取溶剂，提取90min.freelizetheextractconditionsforbaicaleinofScutellariabaicalensis.MethodsTheorthogonaldesigne,extractingmethodsandextractin

2、gtimesinedbyRPHPLC.ResultsTheoptimumextractingconditionsaceration,.freelinandtotallyfor4times.ConclusionThesolventsgreatlyinfluencedtheextractionofbaicalein.Theextracttechnologyofbaicaleinisfeasibleandreasonable.KeyasilC18柱，流动相为甲醇－水(65∶35，含0.6%三乙胺，加磷酸调pH2.6)；检测波长275nm；柱温为室温；流速l.0ml/min。在该色

3、谱条件下，黄芩素与其他成分有较好分离，见图1。2.2正交设计正交实验设计选用L9(34)正交实验表，以黄芩素含量为指标，选取提取方法、溶剂、提取时间、提取次数对其影响。因素水平见表1。表1因素水平（略）2.3对照品溶液的制备精密称取黄芩素对照品0.90mg，先用甲醇定溶至5ml，后取0.5ml加甲醇定溶于10ml容量瓶中，即得0.009mg/ml的对照品贮备液。2.4供试品溶液的制备取干燥黄芩粗品，粉碎后过14目筛，每次精密称取5g，根据正交设计实验进行提取，提取物先用甲醇定容置100ml容量瓶中，然后取0.1ml用甲醇稀释置10ml容量瓶中，用0.45μm微孔滤膜过滤,取续

4、滤液，作为供试品溶液。2.5标准曲线的制备取黄芩素对照品贮备液制成浓度分别为0.675，0.900，2.250，4.500，6.75，9.000μg/ml，进样20μl。以峰面积为横坐标，黄芩素浓度（μg/ml）为纵坐标，进行线性回归，得方程为：Y=0.0144X+0.2696，r=0.9994。结果表明在0.675～9.000μg/ml范围内，黄芩素浓度与峰面积呈良好的线性关系，其色谱图见图1。2.6稳定性考察吸取4号样品液和对照品溶液分别于0，2，4，6，8，10h进样20μl，得样品液峰面积RSD=2.56%(n=6)，对照品溶液峰面积的RSD=2.45%(n=6)，表

5、明样品及对照品在10h内稳定性较好。2.7正交实验及结果分析实验结果通过正交实验提取及含量测定后，直观分析结果（见表2）表明：影响黄芩中黄芩素提取的主要因素为B（溶剂），其次是D（提取次数），由计算得出其最佳提取工艺为A2B1C2D3，即采用冷浸法，用水作为提取溶剂，提取90min，共提取4次。表2正交实验设计（略）2.8最佳工艺验证实验按照正交实验优选出的黄芩最佳提取工艺，对黄芩中黄芩素的提取进行验证实验考察。黄芩素提取率平均为5.12%（n=3），与正交实验最大值接近，方法可行。3讨论通过采用甲醇水、甲醇0.2%磷酸、甲醇0.6%磷酸、甲醇水（含0.6%三乙胺，加

6、磷酸调pH）等不同溶剂系统及不同比例为流动相进行试验，确定流动相为甲醇水(65∶35，含0.6%三乙胺，加磷酸调pH＝2.6)，样品峰能得到了较好的分离。黄芩素为黄酮类化合物，其结构中具有邻三酚羟基，易被氧化成对醌结构，所以对照品溶液通常要冰箱保存，并且在一定时间内尽快操作。由本研究结果可知，溶剂的类型对黄芩素的提取影响最大，从其结构分析和溶解度实验来看，虽然黄芩素水溶性不大，但蒸馏水比其他溶剂的提取率都高，其原因可能是一部分黄酮苷类发生水解生成了黄芩素，尤其非加热方法（超声法和冷浸法），使得植物体内原存的水解黄芩苷等的葡萄糖醛酸酶能较好地发挥水解作用。笔者也进行了冷浸法用

7、水作为溶剂、提取120min、提取4次（实验Ⅰ）及冷浸法用水作为溶剂、提取90min、提取5次的实验（实验Ⅱ）。采用实验Ⅰ和Ⅱ中的提取工艺，结果黄芩素的提取率分别为4.90%（n=3）和5.11%（n=3）,故采用本正交实验所确定的提取工艺合理、经济适用。【