实验性糖尿病大鼠勃起功能障碍及中药的作用

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1、实验性糖尿病大鼠勃起功能障碍及中药的作用杨艳梅1朱艳玲2(1辽宁省沈阳市沈河区第二中医院辽宁沈阳110016)(2辽宁省沈阳市医学院奉天医院辽宁沈阳110024)【摘要】木文通过探讨中药复方对糖尿病大鼠勃起功能的影响,得出结论中药复方制剂对糖尿病性勃起功能障碍有防治作用。【关键词】中药糖尿病大鼠勃起功能【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)23-0156-02据文献报道糖尿病患者勃起功能障碍(ED)发病率可达70%左右。糖尿病性ED是糖尿病常见的慢性神经微血管并发症之一,其发病原因复杂。木实验通过酶组织化学方法观察了糖尿病大鼠阴茎组织中一氧化氮

2、合酶(NOS)和乙酰肭碱酯酶(AchE)的活性变化,并检测勃起潜伏期及中药对其影响。1材料与方法1.1实验动物及药品(1)Wistar大鼠,雄性,体重200±20g,室温18—23°C。(2)STZ:美国sigma公司产品。临用前低温(0°C)以PH4.2的枸橼酸缓冲液配成2%的溶液。(3)还原性辅酶n。(4)硝基四哇氮蓝。(5)碘化乙酰硫代胆碱。1.2中药复方水煎剂制备中药复方由女贞子、人参、黄芪、三七、枸杞、淫羊藿等组成。各味中药浸泡1小时后,共煎两次,合并两次滤液浓缩至3.5g/ml。1.3模型制作及实验方法大鼠禁食12小时后,2%链脲佐菌素(STZ)溶液按60mg

3、/kg腹腔内一次注射,造模后第7天禁2小时,眶后静脉丛采血测血糖,血糖高于ll.lmmol/l者作为实验对象。按血糖随机分为实验对照组,n=16;实验组,n=17o实验组大鼠每天定吋以中药复方水煎剂17.7g/kg(1.0ml)灌胃一次。实验对照组同时灌以等量自来水。正常组大鼠自由进食水。给药2个月,分别于给药后第3周,8周测禁食2小吋血糖。2个月检测各组人鼠阴茎勃起潜伏期,取病理用酶组织化学方法观察阴茎海绵体NOS和球海绵体肌AchE活性。1.4人鼠阴茎勃起潜伏期的观察人鼠阴茎根部脱毛后,用多用仪电极刺激其两侧,局部电刺激条件为:电流强度12mA,电压40U,频率128HZ,波宽15

4、ms,观察刺激开始至阴茎勃起需要的时间。采用双盲,每天定吋测量一次,连测5天,取平均值。1.5阴茎海绵体NOS活性测定将阴茎海绵体组织进行恒冷(-40°C)横行冰冻切片,片厚10μm,将其贴于载玻片上,室温干燥后,将切片放入反应液中(NADPH7mg,NBT2.1mg,TritonX—10025ml,TrisHCL缓冲液,PH8.07ml),37°C水浴中反应约90分钟,树胶封片。1.6球海绵体肌乙酰胆碱離酶活性测定(Karnovsky—Roots直接炎色、法)将球海绵体肌取出后放入4%多聚甲醛中固定24小吋后进行恒冷(-40°C)纵行冰冻切片,片厚10um,将其贴于载玻片上,室

5、温干燥,放入Karnovsky—Roots液(0.1mmol/L顺丁稀二酸缓冲液6.5ml,1.0mol/L貯檬酸钠0.5ml,30mmol/L硫酸铜lml,蒸馆水lml,5mmol/L铁氰化钾lml,硫代乙醜胆碱5mg),37'C孵育,树胶封片。1.7酶组化切片采用图象处理与分析系统,在400X光学显微镜下,以切片的空白处为基准进行背底校正,取切片上终板区或平滑肌细胞区测其灰度值,每张切片上取10个视野,计算其平均值。1.8血糖测定采用葡萄糖氧化酶法。试剂盒由北京精细化学品奋限责任公司提供。1.9统计学处理各实验室数据以x-±s表示,t检验。2结果2.1中药复方对阴茎勃

6、起潜伏期的影响与实验对照组比较,中药组阴茎勃起潜伏期明显缩短。2.2中药复方对阴茎海绵体NOS及球海绵体肌AchE活性的影响与实验对照组比较,中药组大鼠平滑肌细胞及神经肌肉接头着色深。2.3中药复方对DM大鼠血糖的影响与实验对照组比较,中药组血糖略低(P>;0.05),表明本中药复方无明显降糖作用。3讨论本实验观察到糖尿病大鼠阴茎勃起潜伏期延长,中药复方煎剂能明显缩短糖尿病大鼠阴茎勃起潜伏期,提高NOS活性,可能通过提高NOS活性,增强NO的作用,促进阴茎海绵体平滑肌松弛,表现出对糖尿病性ED的防治作用。本中药复方还能提高AchE活性,增强球肌收缩,从而增强勃起硬度,因而对DM大鼠

7、ED起到防治作用。本方剂降糖作用不明显,提示其对DM大鼠ED的防治作用不是通过降血糖来完成的。参考文献[1]vinikA,RichardsonD.Erectiledysfuntionindiabetes[J].DiabetesReu,1998,6:16-33.[2]BurnettAL,LowensteinCJ,BredtDS,ChangTS,SnyderSH.NitrilOxide:aphysiologilmediatorofpenileere

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