穿心莲内酯对巨噬细胞炎症因子表达的影响论文

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　　穿心莲内酯对巨噬细胞炎症因子表达的影响论文李明,陈伟强,胡太平,张丽蓉,蔡尤彪,古宏标【摘要】目的研究穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞氧化亚氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素6(IL6)生成的影响。方法培养小鼠巨噬细胞RAethodsAmacrophagecelllineRAEM培养基(美国Gibco公司);酶标仪(美国BioRad公司)。1.2细胞培养及干预实验小鼠巨噬细胞RAEM培养基(含体积分数10%胎牛血清、质量浓度100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素)，体积分数5%CO2，37℃条件下传代培养。取生长状态良好的RAEM培养基调整细胞浓度为1×106/mL，接种到24孔培养板内，待细胞生长至80%融合后，加入不同浓度的穿心莲内酯(终浓度分别为1、10、50μmol/L)孵育1h，然后加入LPS(终质量浓度1μg/mL)进行刺激。实验分组：正常对照组、穿心莲内酯单独作用组、LPS组和穿心莲内酯加LPS组。1.3NO浓度测定细胞加入刺激物后培养24 h，收集各处理组细胞培养上清液，用硝酸还原酶法检测炎性介质NO的浓度。操作步骤按试剂盒说明书完成。1.4细胞因子浓度测定细胞加入刺激物后继续培养24h，收集各处理组细胞培养上清液，用TNFα和IL6Elisa试剂盒检测上清液中细胞因子的含量。操作步骤按试剂盒说明书完成。1.5统计分析所有数据以±s表示，采用SPSS11.0统计软件对实验结果进行Student’st检验，P0.05为差异有显著性。2结果2.1穿心莲内酯对LPS诱导巨噬细胞NO生成的影响收集24h细胞培养上清，用Griess法测定细胞上清中NO的含量。结果见表1。结果显示，50μmol/L穿心莲内酯单独作用并不影响巨噬细胞NO的表达(与正常对照组比较，P0.05);1μg/mLLPS刺激可以显著诱导巨噬细胞RAantovani在Nature杂志上提出，与无限制性生长、转移等特征一样，炎症性微环境与肿瘤关系密切，并认为炎症是肿瘤的7大重要标志之一2。表2穿心莲内酯对TNFα和IL6表达的影响与正常对照组比较：**P0.01;与LPS组比较：#P0.05，##P0.01目前，国内外研究者都在积极寻找抗炎药物，对心血管疾病和肿瘤进行防治研究工作1,.freelingmetastasisJ.Nature,2009,457(7225):36-37. 3何恩其,赵烽.穿心莲的药理作用及其研究进展J.中医药导报,2007,13(50)：107-1084ROSSR.AtherosclerosisisaninflammatorydiseaseJ.AmHeartJ,1999,138(5Pt2):S419-S420.5MAHMOUDIM,CUIZENN,GALLAGHERPJ.Atherogenesis:theroleofinflammationandinfectionJ.Histopathology,2007,50(5):535-546.6CLEVERSH.AtthecrossroadsofinflammationandcancerJ.Cell,2004,118(6):671-674.7LEECH,JEONYT,KIMSH,etal.NFkappaBasapotentialmoleculartargetforcancertherapyJ.Biofactors,2007,29(1):19-35.8BAUDV,KARINM.IsNFkappaBagoodtargetforcancertherapy?HopesandpitfallsJ.NatRevDrugDiscov,2009,8(1):33-40. 9HIDALGOMA,ROMEROA,FIGUEROAJ,etal.Andrographolideinterferesacol,2005,144(5):680-686.