正交实验法优选重楼皂苷提取工艺的研究论文

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1、正交实验法优选重楼皂苷提取工艺的研究论文【摘要】目的优选重楼皂苷的最佳提取工艺条件。方法以薯蓣皂苷元的含量为考察指标，用高效液相色谱（HPLC）法测定其含量，采用正交实验法对重楼皂苷的提取工艺进行优选。结果最佳提取工艺为重楼药材粗粉加8倍量85%的乙醇回流2次，1.5h/次。结论优化得到的工艺简便易行，稳定性好。【关键词】重楼；薯蓣皂苷元；提取工艺；正交实验OptimizationofExtractionProcessofSaponinsofParisPolyphyllaizetheextractionprocesssaponins

2、ofParispolyphylla.MethodsTheorthogonaldesignmethodizeextractionprocessforsaponinsofParispolyphyllaountofDiosgeninasobservingindex.ResultsTheoptimumextractingprocedurees,eandrefluxingniyminuteseachtime.ConclusionTheoptimumextractingprocessissimple,stableandefficient.Key

3、ethod重楼为百合科植物云南重楼PairspolyphyllaSmithvar.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花ParispolyphyllaSmithvar.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎［1］。重楼中的化学成分主要以甾体皂苷类为主，是其主要活性成分。其苷元主要为异螺甾烷醇类的薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元［2，3］。现代药理研究表明该药具有抗肿瘤、抗菌消炎、止血、镇静镇痛、抑制精子活性、免疫调节等广泛的药理活性［4］。为了更好地开发利用重楼药材，为含重楼中成药制剂开发提

4、供实验依据.freelplicity-185超纯水器(美国密里博公司)；薯蓣皂苷元对照品（中国药品生物制品检定所）；重楼药材（购于广西中医学院一附院仁爱分院药房）；HPLC用水为超纯水，甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯。1.2色谱条件色谱柱：AgilentZorbaxEclipseXDB-C8(4.6mm×150mm,5μm)；流动相：乙腈：水（80:20）；柱温：30℃；流速：1.0ml·min-1；检测波长：203nm；理论塔板数按薯蓣皂苷元峰计不应低于8000。1.3对照品溶液的制备精密称取薯蓣皂苷元对照品5.04mg，用

5、甲醇定容至10ml，摇匀，即得。1.4供试品溶液的制备及测定重楼药材经干燥并粉碎后，准确称取3g，按正交设计进行回流提取，趁热滤过，合并二次提取液，回收乙醇至干。加2mol/L的盐酸30ml，置于沸水浴中水解2h，冷却后用石油醚(60～90℃)萃取5次，20ml/次，合并萃取液，水洗至中性，回收石油醚至干，残渣用甲醇溶解定容于25ml容量瓶中，作为供试品溶液。在上述色谱条件下，分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，进样测定，计算供试品液中薯蓣皂苷元含量。1.5线性关系考察精密吸取薯蓣皂苷元对照品溶液5,10,.freelg/

6、g。3讨论《中国药典》（2005版）有记载薯蓣皂苷元的HPLC测定条件为乙腈∶水（90∶10），柱温：35℃，色谱柱：C18柱。通过比较C18柱没有C8柱的分离效果好，同时用C8柱时流动相为乙腈∶水（80∶20）比乙腈∶水（90∶10）好，所以本文HPLC测定条件较药典有所改动，可使薯蓣皂苷元与其它成分达到基线分离，并且峰形及保留时间均较适合。在初试比较中发现药材粉末粒度对薯蓣皂苷元的提取量有明显影响，药材粉末越细同样条件下提取量越高，但同时过滤就越困难。建议药材粉末过药典2号筛即可，同时用抽滤加快过滤速度。本文确定的重楼皂苷最佳提

7、取工艺，可用于实际生产中作为参考。【