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1、淡竹叶中总黄酮提取工艺研究论文.freelumethanolextractionprocessoftotalflavonoidsinLophatherungracileBrongn.MethodsTheextractionoftotalflavonoidsentindex.Ethanolvolumnextractingtimeandtimesumethanolextractionprocessumethanolextractingprocessconditionsinantinfluencingfactor.ConclusionThisopt
2、imumextradionprocessoftotalflavonoidsinLophatherumgracleBrongnisreliable.KeygracileBrongn；totalflavonoids；orthogonaldesign淡竹叶为禾本科多年生草本植物淡竹叶(LophatherumgracileBrongn.)的干燥茎叶,主产于河南、安徽、江苏、浙江、福建、广东、广西等地。该药味甘、淡、寒,归心、胃、小肠经,具有清热除烦、利尿的功效,多用于热病烦渴、口舌生疮、小便赤色淋痛等症1。淡竹叶中含有的黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、
3、抗氧化、降糖等多种生理活性2,因而有效地开发和利用淡竹叶中黄酮类化学成分具有重要意义。笔者选择总黄酮提取量3为评价指标,利用L9(34)正交试验,.freelL容量瓶中,加适量甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1mL中含无水芦丁0.2mg)。精密吸取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分别置25mL容量瓶中,各加水至6.0mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min,进行全波长扫
4、描,在510nm处均有最大吸收。以510nm得的吸收度A对浓度C回归,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为A=3.8657C-0.0525(r=0.9994)。在8～48μg/mL的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。2.2总黄酮提取量的测定按2.3.3项下方法制备样品。精密称定一定量的干燥品,用甲醇定容至25mL容量瓶中,再精密吸取3mL,置25mL容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0mL”起,依法测定吸光度。按照2005版《中国药典》(一部)4规定的方法测定。2.3醇提工艺条件的选择2.3.1醇提
5、浓度的选择将浙江产淡竹叶药材粉碎,称取20g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2h(85℃),3份提取液分别进行抽滤,将滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80℃,0.08Mpa),浓缩液在水浴锅上蒸至成稠膏状,再放置真空干燥箱中(80℃,0.08Mpa),24h后取出,取少量醇浸膏测定总黄酮提取量。同法测定60%、75%、95%醇提液的总黄酮提取量(见表1)。结果表明,以20g原药材中总黄酮提取量为考察指标,75%醇提液得到的总黄酮量最多,故采用75%乙醇提取的工艺。表1醇提浓度的选择（略）2.3.2提取工艺的正交试验按照上述单因素考察结果
6、,按表2中的因素水平进行正交试验。表2因素水平表（略）2.3.3正交试验方法与结果将淡竹叶药材粉碎后,称取20g,用L9(34)正交表安排试验(见表3)。将回流提取液分别过滤,滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80℃,0.08Mpa),浓缩液放置在蒸发皿中于水浴锅上蒸至成稠膏状后,放置真空干燥箱中(80℃,0.08Mpa),24h后取出,于干燥器中干燥1h后称量,再按照2.2.1项下方法测定总黄酮的提取量,结果见表3。表3正交试验设计表及结果（略）2.3.4方差分析(见表4)表4方差分析表（略）注：F0.05(2,2)=19。由上述直观分析结果可知,以
7、总黄酮提取量为考察指标,最佳提取工艺条件为A1B2C1,即18倍量75%乙醇回流提取1次,每次1.5ｈ。方差分析结果显示：A因素(加醇量)对总黄酮提出有显著影响,B因素(提取时间),C因素(提取次数)对总黄酮提出无显著影响。结合生产实际,从降低生产成本出发,对提取条件作适当调整,确定醇提工艺条件为A1B3C1,即18倍量75%乙醇回流1h,提取1次。2.3.5验证试验称取20g原药材,按照A1B3C1进行验证试验,结果见表5。表5验证试验分析表（略）3讨论通过L9(34)正交表试验,最终确定淡竹叶中总黄酮醇提取工艺的条件为：75%乙醇18倍量
8、提取1.0h,共提取1次,其结果经验证试验确认该条件可行,可以作为大生产的参考工艺条件。【
