快速提取及测定紫油厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的研究

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1、快速提取及测定紫油厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的研究刘晓鹏，姜宁，向东山，周大寨，张驰，吴永尧【关键词】厚朴酚；,,和厚朴酚；,,萃取；,,反相高效液相色谱；,,含量　　摘要：目的研究厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的快速提取及测定。方法采用正交实验用ASE300快速溶剂萃取机进行提取方法的研究，用HPLC法厚朴酚及和厚朴酚的含量测定，流动相为甲醇水冰醋酸（85∶15∶0.25），流速为1.0ml/min，检测波长为294nm，柱温为23℃。结果研究表明，用60%的乙醇，71℃的提取温度在快速萃取系统提取3次（10min/次

2、），厚朴中的厚朴酚、和厚朴酚以及总酚的提取率分别为94.59%，85.45%和88.81%；RP-HPLC方法较好，结果理想。结论该研究得到了很好的快速提取及测定厚朴中厚朴酚及和厚朴酚的方法。　　关键词：厚朴酚；和厚朴酚；萃取；反相高效液相色谱；含量　　AStudyonTheExtractingandDeterminingMethodforMagnololandHonokiolinMagnoliaoffcinalisRendetagnololandHonokiolinMagnoliaoffcinalisRen

3、detethodsThemethodofextractingMagnololandHonokiolbyorthoplanandthemethodofdeterminationinedbyHPLC.Results60%alcoholandextractingthreetimesfortenminuteseachtimeat71℃alextractingcoondition.TheRP-HPLCple,rapidandaccurate.ConclusionTheextractinganddeterminingme

4、thodsarepracticaleforMagnololandHonokiolinMagnoliaoffcinalisRendetm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇水冰醋酸(85∶15∶0.25)，流速1.0ml/min，检测波长294nm，柱温23℃，进样量20μl。　　1.3.4线性范围考察精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每毫升含厚朴酚以及和厚朴酚均为400，200，100，50，25，12.5，6.25μg的标准品浓度梯度，分别吸取溶液20μl，注入HPLC仪测定。以对照品浓度为横坐

5、标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。　　1.3.5精密度实验取厚朴酚以及和厚朴酚浓度为100μg/ml的对照品溶液，重复进样6次，记录色谱峰面积，计算RSD。　　1.3.6重复性实验取索氏提取的一个样品，依法平行测定5次，记录厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积，计算RSD。　　1.3.7稳定性实验取索氏提取的一个样品，每隔2h进样1次，共进样5次，考察供试品溶液的稳定性。　　1.3.8回收率实验取已测知含量的样品5份，分别精密加入对照品适量，依RPHPLC法测定，计算回收率，RSD。　　2结果　　2.

6、1HPLC结果及标准品线性关系在前述色谱条件下，厚朴酚与和厚朴酚与其他成分能够很好地分离（见图1）；以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。厚朴酚浓度在6.25～400μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。回归方程为：厚朴酚Y=0.435991X+3.423161，r=0.999694；和厚朴酚Y=0.60906X+4.516839，r=0.999526.　　2.2快速萃取正交实验结果正交实验结果见表2，各因素对和厚朴酚提取的重要性为B＞D＞A＞C，对厚朴酚提取的重要性为B＞D＞C

7、＞A，对总酚提取的重要性为B＞D＞A＞C；综合考虑，快速萃取的最优方法为：酒精度60%，提取3次，提取温度71℃，提取时间为10min/次。　　a标准品HPLC图谱b样品1.和厚朴酚2.厚朴酚　　图1HPLC图谱（略）　　表2正交实验结果表（略）　　2.3优选提取方法的验证采用上述最优方法提取3次，厚朴酚、和厚朴酚以及总酚的提取率分别为94.59%，85.45%和88.81%，表明本方法的提取效果较好。　　2.4精密度实验结果取厚朴酚以及和厚朴酚浓度为100μg/ml的对照品溶液，重复进样6次，记录色谱峰面积

8、，计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为0.71%，1.16%。　　2.5重复性实验取索氏提取的一个样品，依法平行测定5次，记录厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积，计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为0.91%，1.23%。　　2.6稳定性实验取索氏提取的一个样品，每隔2h进样1次，共进样5次，结果供试品溶液在10h内稳定，厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为1.07%，1.32%。　　2.7回收率实验取已测知含