2015动物实验基本操作

2015动物实验基本操作

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1、动物实验基本操作一(固定、性别判定、标识)【实验目的】在做动物试验时,为确保给药、实验顺利进行,防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物,要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。【实验对象】SD大鼠,KM小鼠,雌雄各半,体重180-250g。【实验器材和药品】器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套药品:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉识【实验步骤】一、小鼠的捉拿1、徒手固定:用右手提起尾巴中部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉,此吋,小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤,再置

2、小鼠于左手心,并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤,无名指压住小鼠尾根部,将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。2、固定器固定:尾静脉注射或给药时,将小鼠放进同定器屮或者大小和重量适当的容器(如烧杯),只露出尾巴,该类容器能够压住尾部,避免其活动。勿固定过紧造成室息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时,先准备一个15-20cm的方木板,边缘钉入五颗钉子。将小鼠叫肢分别用20-30cm的线绳捆绑,线的另一头分别绑在方木板的钉子上,并且在头部上颚切齿牵引一根线绳,也固定在钉子上,达到完全同定。二、大鼠的捉拿4-5周内的大鼠,方法同小鼠。周龄较大的,则:1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和

3、食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤,完成抓取保定。三、性别判定小鼠、大鼠性别判定(1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是早,外生殖器与肛门间隔长的是(2)成年动物可直接肉眼辨认,雄性有膨起的阴囊和阴茎,雌性动物有阴道口。四、动物的标记小鼠的短期細记法:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液(黄色),标出属于自己的编号【注意事项】1、实验人员要有精祌准备:掌握方法,胆大心细,做好防护。2、动物兴奋的时候不要抓収,待其安静下来。3、根据受试动

4、物的给药部位或采血方法的不同,事先选择徒手固定还是固定器固定。4、固定时把握好力度,过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡,若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。【思考题】1.在固定实验动物时如何才能快、准、稳?动物实验基本操作二(给药途径、采血)【实验目的】在做动物试验时,为确保给药、采血实验顺利进行,要掌握根据不同的情况进行动物给药以及采血的正确方法。【实验对象】SD大鼠(180-250g),KM小鼠(18-22g),雌雄各半。【实验器材和药品】器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、长钉、细绳、防护手套,灌胃针,注射器(1ml,5ml)、棉球,剪毛剪、手术剪、手术刀、采血管、弯头镊

5、子药品:生理盐水、75%酒精棉球,一次性采血管,一次性EP管【实验步骤】一、给药途径1、大、小鼠的灌胃法用左手固定鼠,右手持灌胃器(安好灌胃针并已吸好药物),将灌胃针从鼠的嘴角插入门腔,压迫鼠的头部,使口腔和食管成一直线,轻轻转动针头刺激鼠的吞咽,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食管,如果动物挣扎厉害,退山灌胃针,待动物安静下来,重新插入。灌胃针前端达到膈肌水平,即可慢慢推灌药液,如很通畅,则说明已进入胃内。如不通畅,且动物挣扎厉害,须拔出重新操作。2、皮下注射左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤,右手持注射器,将注射针刺入皮下,若针头容易摆动则证明针头已在皮下,推送药液,缓慢拔出注射针,稍微

6、用手指压片刻针刺部位,以防药物外漏。3、肌肉注射选用肌肉发达,无大血管经过的部位,如臀部或股部。(肌肉注射比皮下和腹腔注射用得较少,但当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时,常采用肌肉注射)4、腹腔注射A、左手抓取并固定好动物,将腹部朝上。B、右手持注射器将针头在下腹部腹白线稍左或偏右的位置,从下腹部朝头方向几乎平行地刺入皮下,进针3-5mm。C、再使针头与皮肤呈45°角斜穿过腹肌,当针尖穿过腹肌进入腹腔时,有落空感,然后固定针头,保持针尖不动,回抽,无回血,无肠液、尿液,便可缓缓推入药液。5、静脉注射(尾静脉注射)A、大、小鼠尾静脉共有3根(左、中、右),一般常选用

7、两侧的静脉。注射前,先把动物固定在暴露尾部的鼠尾固定器lAl(可用烧杯、铁丝眾或粗试管等物代替).B、拔去尾部静脉走向的毛,用75%酒精棉球反复檫拭鼠尾,以达到消毒、血管扩张及软化表皮角质的目的。C、尽量从静脉的远心端刺入血管,回一下血,将药液缓慢注入。I)、注射完毕,用棉球压住针眼,拔去针头,继续压迫数分钟。二、采血1、心脏采血将动物仰卧固定在鼠板上,剪去胸前区部位的被毛,消毒。在左侧第3-4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手持注射器选择心搏最强处穿刺。当针穿刺入心脏时,血液由于

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