分子生物学与基因工程复习提纲

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1、分子生物学与基因工程复习提纲第一章绪论1、分子生物学简史理论上的三大发现生物的遗传物质是DNADNA双螺旋模型遗传信息的传递方式技术上的三大发现基因操作的工具酶的发现载体的应用逆转录酶的发现2、证明遗传物质是DNA的三大经典实验肺炎双球菌转化实验噬菌体感染实验病毒重建实验3、1953年，Watson/Crick提出了DNA双螺旋结构模型。4、遗传信息的传递方式的发现1961年Monod和Jacob提出Z操纵子学说；1964年Nirenberg等提出了“三联体密码说”；Crick提出了遗传信息流向

2、和表达的屮心法则。5、限制性核酸内切酶的定义、特点以及在基因工程中的意义；DNA连接酶6、克隆载体和表达载体第二章染色体与DNA1、核酸、核苷酸、核苷、碱基、嘌呤、嘧啶、DNA、RNA、磷酸二酯键2、染色体、核小体、组蛋白、非组蛋白3、基因组大小与C值矛盾、重复序列4、真核基因组结构的特点；与原核基因组的差异5、DNA双螺旋结构的要点、氢键、碱基堆集力、A、B、Z型结构6、超螺旋结构、正/负超螺旋7、DNA复制、半保留复制、半不连续复制、冈崎片段、拓扑异构酶、Klenmv片段8、真核生物DNA复

3、制的特点9、转座、转座子、转座子的分类和共同特点、转座的遗传效应第三章RNA合成1、转录、转录泡、有义链、反义链、RNA聚合酶2、启动子、终止子、增强子、依赖p因子的终止、不依赖p因子的终止3、原核生物转录的过程4、真核生物mRNA转录后的加工5、真核生物成熟mRNA的结构特点第叫章蛋白质的合成1、遗传密码、密码子、反密码子、密码子偏好性、简并性2、起始密码子：AUG终止密码子：UAA、UAG、UGA3、错义突变、无义突变、同义突变、移码突变4、tRNA的结构：两个关键部位3'端CCA：接受氨基

4、酸，形成氨酰-tRNA;与mRNA的结合部位一反密码子。5、SD序列、反SD呼列6、蛋白质合成过程（翻译的过程）7、蛋白质转运的机制、信号肽第五章基因表达调控1、基因组、管家基因、组成性表达、可诱导基因（奢侈基因）、诱导、阻遏2、操纵子、顺势作用元件、反式作用因子3、原核生物基因调控模型乳糖操纵子调控的机制：阻遏蛋白负调控以及CAP正调控色氨酸操纵子调控的机制：反馈抑制和袞减子调控4、RNA干扰、小干扰RNA（siRNA）、微小RNA（miRNA）第六章基因工程的酶学基础1、限制性内切酶、DNA

5、连接酶、DNA聚合酶和反转录酶、DNA修饰酶、外切核酸酶、单链内切核酸酶、RNA酶2、回文序列、II型限制性内切酶、粘性末端、同工酶、同尾酶、同裂酶3、TaqDNA聚合酶的特点以及在PCR中的应用第七章基因工程载体1、载体、克隆载体、表达载体2、质粒、噬菌体、柯斯质粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体3、标记基因（报告基因）、插入失活、（X-互补、蓝白斑筛选4、质粒作为基因工程载体的优点5、碱变性抽提法提取质粒的原理6、穿梭载体第八章基因操作的主要技术原理1、提取核酸的一般程序2、碱变性法提取质粒

6、DNA的步骤3、核酸浓度与纯度测定的方法：紫外吸收4、核酸电泳：琼脂糖电泳、脉冲场凝胶电泳第九章0的基因的获収1、PCR的原理和步骤2、基因组文库、cDNA文库、鸟枪法、DNA化学合成第十章基因工程的操作过程1、表达载体的结构特征2、将目的基因导入受体：植物：农杆幽转化法、基因枪法、花粉管通道法动物：显微注射法微生物：化学转化法、电转化法3、重组子筛选：双抗生素法、蓝白斑筛选4、重组子鉴定：核酸分子杂交法裂解细菌电泳鉴定分子大小限制性内切酶法PCR法某因产物检测法序列分析5、Northern杂交

7、、Southern杂交、WesternBlot、Elisa（酶联免疫吸附）第十一章基因工程的应用1、植物基因工程2、动物基因工程3、基因工程药物4、基因治疗5、基因工程与环保第十二章基因工程及其产品安全性管理1、基因工程产品对人类健康的影响2、基因工程产品对生态系统的影响3、基因工程生态安全性评价的指标复习题：简答题：1、分子生物学历史上，具有重要意义的理论上和技术上的三大发现分别是什么？2、什么叫转座子？列举转座子的类型及其共同特点。3、什么是C值矛盾？试分析C值矛盾产生的原因。4、载体必备的

8、功能元件是什么，各有什么功能5、什么是克隆载体和表达载体？在基因工程操作中分别起到什么作用？6、限制性内切酶具有什么特点？在基因工程中有什么意义？7、基因组文库的构建过程。8、PCR反应的关键酶是什么？为什么采用这种酶？详述PCR反应的步骤并解释上述问题。9、在基因工程的操作屮，重组子的鉴定有哪些主要方法？10、采用双抗生素法筛选含有目的基因的重组菌株的原理和步骤。11、简述RNA转录的主要过程12、质粒作为基因工程的载体有何优点？论述题：1、简述乳糖操纵子的附遏蛋白负性调控和CAP正性调控的机